荧光显微镜原理
一、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像(图3-15)。图3-15 荧光显微镜的结构和主要部件 (一)光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光,足以激发各类荧光物质,因此,为荧光显微镜普遍采用。 超高压汞灯也散发大量热能。因此,灯室必须有良好的散热条件,工作环境温度不宜太高。 新型超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃,使用一些时间后,则需要高压启动(约为15000V),启动后,维持工作电压一般为......阅读全文
荧光显微镜观察肿瘤细胞凋亡
荧光显微镜(Fluorescence microscope) : 荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发
荧光显微镜的注意事项
1、严格按照操作说明书的要求制造的荧光显微镜,不改变该程序。2、检查应在暗室进行。进入暗室后,接通电源,点燃超高压汞灯5-15分钟。当光源发出强光并稳定下来时,眼睛有效适应暗室,然后开始观察标本。3、为防止紫外线对眼睛造成损害,调节光源时戴防护眼镜。4、每次检查时间为1~2h,超过90min,超高压
olympus荧光显微镜的应用要点
荧光显微镜是利用“光化荧光”成像,如果所选激发波长在肉眼所看不见的近紫外光区(320~400nm),荧光的发射光谱也较普通光镜光源的平均波长短,光学分辨率提高。高能量的光子与电子碰撞,使得电子从基态跃迁到激发态。激发态的电子很不稳定,会重新回落到基态,这个过程中会消耗部分热能,并发出新的光子。新的光
荧光显微镜含油性的判断
荧光显微镜--含油性的判断一、油井含油井段(产层)镜下特征1、缝内的沥青主要是指有效缝内的沥青由缝内向缝外浸染,缝内沥青重,色泽较深,缝外沥青较轻(愈远离缝愈轻),色光连续,范围较广,褐褐黄黄一绿一蓝白色等。所谓有效缝,这里指荧光镜下发光,经试油能产油的缝。有张开缝,张裂纹以及一部分半充填缝。这部分
荧光显微镜中各滤色片的作用
荧光显微镜最关键的问题是滤光片的组合,激发滤光片与屏蔽滤片都必须适合于被观察的荧光体并相互匹配。对一些特定用途,选择滤光片若有错误,有可能产生误解,甚至错误的结果。荧光显微技术的成就和高质量滤光片及巧妙配用滤光片组是不可分隔的,荧光显微镜的滤光片种类有以下几种。1、吸热滤光片吸热滤光片是防止光源光谱
宽场荧光显微镜的优势
1、高分辨率16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光,共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及,这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。2、断层扫描共聚焦采取电动马达自动控制步距,使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴
荧光显微镜含油性的判断
荧光显微镜--含油性的判断一、油井含油井段(产层)镜下特征1、缝内的沥青主要是指有效缝内的沥青由缝内向缝外浸染,缝内沥青重,色泽较深,缝外沥青较轻(愈远离缝愈轻),色光连续,范围较广,褐褐黄黄一绿一蓝白色等。所谓有效缝,这里指荧光镜下发光,经试油能产油的缝。有张开缝,张裂纹以及一部分半充填缝。这部分
Nikon-普通倒置荧光显微镜共享
仪器名称:Nikon 普通倒置荧光显微镜仪器编号:17026962产地:德国生产厂家:Zeiss型号:Stemi508出厂日期:201606购置日期:201710所属单位:生命学院>蛋白质研究技术中心>细胞影像平台>细胞影像 平台放置地点:生物医学馆U6 121固定电话:固定手机:固定email:联
OLYMPUS荧光显微镜操作规程
仪器名称 OLYMPUS荧光显微镜 型 号 BX51TF 国别厂家 日本 OLYMPUS公司 主要指标 1、目镜放大倍数10X; 2、物镜放大倍数分别为 4,10,20,40,100X(油镜); 3、制冷CCD摄像头(300万像素)与IBM电脑连机操作; 4、除明
荧光显微镜的维护和保养
显微镜的维护和保养的知识1、日常放置:当显微镜在长时间不使用的情况下,请您用防尘罩盖好,并储放在干燥的地方防尘防霉。同时强烈建议将物镜和目镜保存在干燥器之类的容器中,并放些干燥剂。2、常备清洁工具清洁灰尘用的刷子吹气球擦镜布擦镜纸(请使用不掉丝的擦镜纸)擦镜液(1:2的无水乙醇乙醚混合液)。3、常规
荧光显微镜的使用方法
(1)打开灯源,超高压汞灯要预热15min才能达到最亮点。(2)透射式荧光显微镜需在光源与暗视野聚光器之间装上所要求的激发滤片,在物镜的后面装上相应的压制滤片。落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激发滤片、双色束分离器、压制滤片的插块。(3)用低倍镜观察,根据不同型号荧光显微镜的调节装置,调
关于落射荧光显微镜的简介
荧光显微镜(Fluorescence microscope) 是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不
简述荧光显微镜的光源内容
多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
倒置荧光显微镜的构成简介
倒置荧光显微镜[1]由荧光附件与倒置显微镜有机结合构成的,主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。 倒置显微镜(Inverted microscope)是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于这些活体被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中
荧光显微镜常见故障解析
荧光显微镜目镜下和照片背景不够黑,怎么办? 诊断:荧光拍照时可以把透射光的聚光镜摇出来,不然看荧光时会有一个反射像。 还有一个方法,如果荧光够强,适当调节荧光的孔径光阑,可以稍微去一下背景。另外软件里面有一个黑平衡选项,可以将背景变得黑一些。 荧光显微镜荧光范围变小,40倍物镜看不清楚? 诊断
荧光显微镜使用注意事项
(1)严格按照荧光显微镜厂家说明书要求进行操作,不要随意改变程序。 (2)观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本。 (3)应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。 (4)载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧
认识荧光显微镜的光立方
什么是荧光?荧光即为物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光,是非温度辐射光——冷光。即:物质吸收短波光,进入激发态, 发射出的长波光。无论是物质的自发荧光、荧光染料还是融合表达的荧光蛋白,均需经过特定波长的光激发(激发光Excitation),电子发生迁移后,能
如何正确制作荧光显微镜标本
(一) 玻片及盖玻片(Slide and Coverslips)玻片及盖玻片品质必须很好而没有荧光,玻片厚度≦1.0mm 者便可用,玻片之清洗,必须以中性清洁剂洗净,再浸于含有3%HCl 之乙醇12~ 24 小时,然后再储存于纯酒精。要用时,以清洁纱布擦净或火焰烘干。用完后可浸于水中,移去封埋物,再
正置荧光显微镜共享应用
仪器名称:正置荧光显微镜仪器编号:A23000007产地:日本生产厂家:Olympus型号:BX53出厂日期:20230216购置日期:20230216所属单位:化学系>分析中心>光学显微成像放置地点:清华大学生命科学馆141固定电话:010-62771139固定手机:13121649595固定em
双光子荧光显微镜的优点
双光子荧光显微镜有很多优点:1)长波长的光比短波长的光受散射影响较小容易穿透标本;2)焦平面外的荧光分子不被激发使较多的激发光可以到达焦平面,使激发光可以穿透更深的标本;3)长波长的近红外光比短波长的光对细胞毒性小;4)使用双光子显微镜观察标本的时候,只有在焦平面上才有光漂白和光毒性。所以,双光子显
倒置荧光显微镜的正确使用
倒置荧光显微镜是用于高端生物科学研究领域的多功能显微镜,其结构复杂且价格昂贵,因此,要想医学研究生正确掌握倒置荧光显微镜的操作使用规范,教师得首先在示范倒置荧光显微镜的实际操作之前,开设学习倒置荧光显微镜基本知识的课程,介绍倒置荧光显微镜的结构、原理、功能和基本使用方法,再在具体的使用操作中,针
荧光显微镜的光源相关介绍
多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。
认识荧光显微镜的光立方
什么是荧光? 荧光即为物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光,是非温度辐射光——冷光。即:物质吸收短波光,进入激发态, 发射出的长波光。 无论是物质的自发荧光、荧光染料还是融合表达的荧光蛋白,均需经过特定波长的光激发(激发光Excitation),电子发
Leica荧光显微镜使用说明
简要操作步骤1.打开12V/100W Leica的电源开关,至少预热10分钟。2.打开显微镜的电源开关。3.放置样品,调好放大倍数、焦距和视野。 4.移动light stop至 。5.滑动filter block至相应光路。6.将光线调节旋钮调到最小。7.镜下观察样品的荧光染色情况。8.如果
怎样选择荧光显微镜的光源?
我们在选择荧光显微镜(Fluorescence Microscope)的光源时,要注意的是弧光的尺寸,就是光源发光区的大小,例如50W的汞灯,它的弧光尺寸为110X0.13MM, 200W的弧光尺寸为212X0.15MM,而100W的弧光尺寸为0.125×0.125m,能否正好充满系统的入瞳使光能充
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片 载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 2、盖玻片 盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若
荧光显微镜照片的merge方法
我们经常在文章中会看到荧光照片会以merge的方式进行展示,如下图。通过merge可以区分组织或细胞中同一位置的两种(或多种)荧光信号是否重叠。今天我们来讲讲如何merge荧光显微镜照片~ 1、基本原理 基本原理是将两张(或多张)等大的张片相同位置像素的颜色数据按照一个公式重新计算得出一个新
荧光显微镜的功能和应用介绍
荧光显微镜(Fluorescence microscope) : 荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一
荧光显微镜CCD的使用范围
一般情况下,单独使用荧光显微镜即可以达到我们想要的成像效果,但在某些情况下,比如说当荧光比较微弱的情况下,仅仅通过荧光显微镜并不能达到理想的拍摄效果,或者我们希望可以将拍摄的荧光图片上传的电脑生面预览,修改甚至发表学术论文,这时候没有荧光显微镜CCD是不能达到要求的。