激光扫描共焦显微镜技术及应用

l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文

简介激光显微共焦拉曼光谱仪的探测、放大和记录系统

  探测器又称检测器,在拉曼光谱仪中,被用于探测仪器收集到的拉曼散射光或经过变换的信号。传统的拉曼光谱仪一般采用光电倍增管或电子计数器作为检测器,用于对分光后的光谱逐点(即逐频率)扫描以得到完整的拉曼光谱。常用的探测器有硅CCD探测器、紫外强化CCD探测器、近红外(NIR)单元探测器和光电倍增管。C

激光共聚焦显微分析中是如何实现共焦的,有什么优点

  共聚焦显微镜的工作原理是样品中的点激发(衍射极限点)和所得荧光信号的点检测。探测器上的针孔提供了阻挡离焦荧光的物理屏障。仅记录通风盘的对焦或中心点。光栅一次扫描一个样本允许通过简单地改变z焦点来收集薄的光学部分。可以堆叠所得到的图像以产生样本的3D图像。  激光扫描共聚焦显微镜与传统宽场显微镜相

激光显微共焦拉曼光谱仪的外光路系统相关介绍

  外光路系统是指在激光器之后、单色仪之前的一套光学系统(包括样品池)。它的作用是为了有效地利用光源强度、分离出所需要的激光波长、减少光化学反应和减少杂散光、以及最大限度地收集拉曼散射光,还要适合于不同状态的试样在各种不同条件下(如高、低温)的测试。纯化后的激光经反射镜改变光路再由物镜准确地聚焦在样

联合应用量子点及荧光发射扫描显微镜技术的肿瘤转移...

联合应用量子点及荧光发射扫描显微镜技术的肿瘤转移示踪肿瘤转移是实现肿瘤有效治疗的一大障碍,而目前有关肿瘤转移(特别是侵润Extravasation)过程的认识非常有限。主要原因是参与肿瘤转移的多细胞、多分子之间的相互作用复杂,肿瘤转移过程难以实现在体示踪。随着新技术的发展,荧光显微镜成像可实现对细胞

共定位分析应通过获得薄的光学切片来进行

对于厚度小于 5μm 的样品,比如贴壁细胞或很薄的组织切片,在常规的宽场荧光显微镜下,定量的共定位分析一般是可以的。然而,对于厚样品,图像应以具有一定轴向尺寸的光学切片来记录,来分析看起来共定位的荧光团是否真正位于同一个侧向焦平面上,或在 Z 轴上他们是否彼此叠加。厚样品的荧光团共定位分析应通过获得

激光扫描共聚焦显微镜在古气候纹层学的应用

激光扫描共聚焦显微镜在古气候纹层学的应用1984年第一台商业化的激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,简称 LSCM)出现,随之共聚焦显微镜技术成为了一个热点,并广泛应用在国内外生物和工业检测领域。现今,我们将LSCM首次应用于国内古气候纹层学研

激光扫描共聚焦显微镜在材料生产检测领域中的应用

在材料生产检测领域中的应用      除了在生物及医学研究领域,LSCM在陶瓷、金属、半导体、芯片等材料科学及生产检测领域中也具有广泛的应用。例如,钢的铸造组织一般比较粗大,可直接用 LSCM 进行观察,同时可以利用其模拟微合金钢在不同冷却工艺下的凝固以及奥氏体不锈钢的敏化过程,原位观察过程中样品表

激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域中的应用

在骨科研究领域中的应用激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域的应用现状表明,CLSM在观测骨细胞形态学研究、骨细胞特异性蛋白(骨钙素)以及骨细胞之间的相互作用具有显著的优势。

激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域中的应用

在骨科研究领域中的应用激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域的应用现状表明,CLSM在观测骨细胞形态学研究、骨细胞特异性蛋白(骨钙素)以及骨细胞之间的相互作用具有显著的优势。

激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域中的应用

在骨科研究领域中的应用激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域的应用现状表明,CLSM在观测骨细胞形态学研究、骨细胞特异性蛋白(骨钙素)以及骨细胞之间的相互作用具有显著的优势。

激光扫描共聚焦显微镜在细胞凋亡研究中的应用(一)

摘要 激光扫描共聚焦显微镜作为80年代发展起来的一种高精度分子细胞生物学分析仪器,具有组织细胞断层扫描、活细胞动态荧光监测、三维图像重建、共聚焦图像定量分析等先进功能,在近年的细胞凋亡这一研究热点中得到了大量创造性的应用。本文拟就对激光扫描共聚焦显微镜在凋亡的形态学、分子水平变化及重要生理过程三方面

共聚焦显微镜

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细微结构的成像

扫描电子显微镜的原理及应用

扫描电子显微镜工作原理(1)扫描电子枪产生的高能电子束入射到样品的某个部位时,在相互作用区内发生弹性散射和非弹性散射事件,从而产生背散射电子、二次电子、吸收电子、特征和连续谱X射线、俄歇电子、阴极荧光等各种有用的信号,利用合适的探测器检测这些信号大小,就能够确定样品在该电子入射部位内的某些性质,例如

扫描电子显微镜的原理及应用

扫描电子显微镜工作原理(1)扫描电子枪产生的高能电子束入射到样品的某个部位时,在相互作用区内发生弹性散射和非弹性散射事件,从而产生背散射电子、二次电子、吸收电子、特征和连续谱X射线、俄歇电子、阴极荧光等各种有用的信号,利用合适的探测器检测这些信号大小,就能够确定样品在该电子入射部位内的某些性质,例如

扫描电子显微镜的原理及应用

扫描电子显微镜工作原理(1)扫描电子枪产生的高能电子束入射到样品的某个部位时,在相互作用区内发生弹性散射和非弹性散射事件,从而产生背散射电子、二次电子、吸收电子、特征和连续谱X射线、俄歇电子、阴极荧光等各种有用的信号,利用合适的探测器检测这些信号大小,就能够确定样品在该电子入射部位内的某些性质,例如

共聚焦显微镜的基本原理

传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形

激光共聚焦扫描显微技术原理

激光共聚焦扫描显微技术(Confocal laser scanning microscopy)是一种高分辨率的显微成像技术。普通的荧光光学显微镜在对较厚的标本进行观察时,来自观察点邻近区域的荧光会对结构的分辨率形成较大的干扰。共聚焦显微技术的关键点在于,每次只对空间上的一个点(焦点)进行成像,再通过

关于共聚焦激光扫描显微的不同类型介绍

  1、共聚焦激光扫描显微镜使用多个镜子(通常沿x轴和y轴线性扫描2或3个)来扫描样品上的激光,并通过固定的针孔和检测器“扫描”图像。  2、旋转盘(Nipkow盘)共焦显微镜在盘上使用一系列移动针孔来扫描光点。由于一系列针孔平行扫描一个区域,因此与激光扫描显微镜相比,允许每个针孔在特定区域上悬停更

扫描电子显微镜的技术特点和应用

扫描电子显微镜(SEM)是一种介于透射电子显微镜和光学显微镜之间的一种观察手段。其利用聚焦的很窄的高能电子束来扫描样品,通过光束与物质间的相互作用,来激发各种物理信息,对这些信息收集、放大、再成像以达到对物质微观形貌表征的目的。新式的扫描电子显微镜的分辨率可以达到1nm;放大倍数可以达到30万倍及以

北京市2023年激光共焦及超高分辨显微学学术研讨会召开

  2023年4月15日,北京市 2023 年度激光共焦及超高分辨显微学学术研讨会在北京四川龙爪树宾馆成功举办。本次会议由北京理化分析测试技术学会电子显微学专业委员会主办,旨在推动激光共焦超高分辨显微学的进步和发展,提高广大相关工作者的学术及技术水平,促进激光共焦超高分辨显微学在生命科学等领域中的应

共焦显微拉曼光谱仪

1. 共焦拉曼指的是空间滤波的能力和控制被分析样品的体积的能力。通常主要是利用显微镜系统来实现的。 仅仅是增加一个显微镜到拉曼光谱仪上不会起到控制被测样品体积的作用的—为达到这个目的需要一个空间滤波器。2.(1)、显微是利用了显微镜,可以观测并测量微量样品,zui小1微米左右(2)、共焦是样品在显微

2011年激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会在京召开

奥林巴斯(中国)有限公司 齐冬工程师  奥林巴斯(中国)有限公司的齐冬工程师作了《活细胞分子扩散测量的共聚焦解决方案》的报告。  共聚焦一般成像和活细胞成像没有办法得到分子扩散信息。通过荧光关联谱(FCS)可总结分子荧光的变化规律,得到下列信息:分子量信息、分子浓度、胞内动力学、胞间环境和分子相互作

共聚焦显微镜介绍

  一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展   科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

雷尼绍中标海关总署4台激光显微共聚焦拉曼光谱仪

  分析测试百科网讯 近日,海关总署2019年激光显微共聚焦拉曼光谱重新招标采购项目评标工作已结束,此次采购共计4台,中标品牌:雷尼绍 规格型号:inVia Qontor,中标总金额:990.87 万元(人民币),用于矿产品、金属氧化物、废塑料、冶炼渣、矿灰、废催化剂、废皮革、废纺织原料、危险废物等

反射式共焦显微镜检查13例毛囊角化病病例报告

毛囊角化病是一种常染色体显性遗传病,临床上 较少见。本病具有特征性的临床和组织病理学特征,本 文回顾 13 例毛囊角化病患者临床、组织病理及反射式 共焦显微镜资料,并将组织病理与反射式共聚焦显微 镜扫描结果进行比对,初步探讨反射式共聚焦显微镜 在毛囊角化病诊断中的应用价值。1 资料与方法1.1

显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰

  虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的

扫描探针显微镜的应用

SPM的应用领域是宽广的。无论是物理、化学、生物、医学等基础学科,还是材料、微电子等应用学科都有它的用武之地。SPM的价格相对于电子显微镜等大型仪器来讲是较低的。同其它表面分析技术相比,SPM 有着诸多优势,不仅可以得到高分辨率的表面成像,与其他类型的显微镜相比(光学显微镜,电子显微镜)相比,SPM

扫描探针显微镜的应用

  目前扫描探针显微镜中最为广泛使用管状压电扫描器的垂直方向伸缩范围比平面扫描范围一般要小一个数量级,扫描时扫描器随样品表面起伏而伸缩,如果被测样品表面的起伏超出了扫描器的伸缩范围,则会导致系统无法正常甚至损坏探针。因此,扫描探针显微镜对样品表面的粗糙度有较高的要求;  由于系统是通过检测探针对样品

共聚焦扫描仪的原理

激光扫描共聚焦扫描仪的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下