分子杂交技术(一)
一、概述 前面已经介绍了核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键(主要是氢键)的形成即出现稳定的双链区,这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补,所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序(即某种程度的同源性)就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进行。由于DNA一般都以双链形式存在,因此在进行分子杂交时,应先将双链DNA分子解聚成为单链,这一过程称为变性,一般通过加热或提高pH值来实现。使单链聚合双链的过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或非同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。 核酸杂交技术基本上是Hall等1961年的工作开始的,探针与靶序列在溶液中杂交,通过平衡密度梯度离心分离杂交体。该法很慢、费力且不精确,但它开拓了核酸杂交技术的研究。Bol......阅读全文
怎样维修分子杂交仪
分子杂交仪,或称分子杂交炉,是目前分子生物实验室的常用仪器之一。它每次可同时安放10支外径42mm、长150mm或10支外径42mm、长250mm的杂交瓶。由于我们实验室任务较多,杂交箱的使用率较高,加之杂交箱在使用过程中需加温(我们常用的温度是68℃,每次连续运转16h),长时间的高温烘烤,导致旋
核酸分子杂交的类别
核酸分子杂交可分为液相杂交和固相杂交。1.液相杂交液相杂交是让DNA探针和待测核酸在溶液中进行反应。在溶液中,待测核酸和探针均自由运动,增加了两者结合的机会,因此液相杂交要比固相杂交快5~10倍。但液相杂交不易分离杂交体和游离核酸探针,常规应用不易。2.固相杂交固相杂交是先将待测核酸样本结合到固相载
分子杂交仪的原理
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。 核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单
核酸分子杂交的简介
核酸分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA或RNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 杂交过程是高度特异性的,可
什么是核酸分子杂交?
核酸分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA或RNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。
分子杂交的实验原理
分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键(主要是氢键)结合,从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补,所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序(即某种程度的同源性)就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进
DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DN
分子杂交有什么分法
通过碱基对之间非共价键(主要是氢键)的形成即出现稳定的双链区,这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补,所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序(即某种程度的同源性)就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链
怎样维修分子杂交仪
分子杂交仪,或称分子杂交炉,是目前分子生物实验室的常用仪器之一。它每次可同时安放10支外径42mm、长150mm或10支外径42mm、长250mm的杂交瓶。由于我们实验室任务较多,杂交箱的使用率较高,加之杂交箱在使用过程中需加温(我们常用的温度是68℃,每次连续运转16h),长时间的高温烘烤,导致旋
分子杂交的方式介绍
1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、
怎样维修分子杂交仪
分子杂交仪,或称分子杂交炉,是目前分子生物实验室的常用仪器之一。它每次可同时安放10支外径42mm、长150mm或10支外径42mm、长250mm的杂交瓶。由于我们实验室任务较多,杂交箱的使用率较高,加之杂交箱在使用过程中需加温(我们常用的温度是68℃,每次连续运转16h),长时间的高温烘烤,导致旋
分子杂交仪的原理
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。原理分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA
分子杂交——Northern基因检测
实验概要Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳,将分子量大小不同的RNA分离开来,随后将其原位转移至固相支持物(如尼龙膜、硝酸纤维膜等)上,再用放射性(或非放射性)标记的DNA或RNA探针,依据其同源性进行杂交,最后进行放射自显影(或化学显影),以目标RNA所在位置表示其分子量的大小,而其显影强度则
什么是分子杂交仪
分子杂交仪又称分子杂交炉、分子杂交箱,是采用核酸分子杂交技术检测待测基因组中是否含有已知基因序列的设备。广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的检测和遗传病的基因诊断等方面。
CRISPR分子诊断技术(一)
本篇为“连环画”系列中的第二篇。“连环画”中的每一篇都会介绍一个最新生物医药技术或趋势。以图画为主,文字为辅。虽然无法做到系统全面,但希望能给读者带来一些启发。每篇文章只代表作者个人的观点或解读,与礼来亚洲基金的投资决定无关。1 脊椎动物的免疫系统分为先天免疫(或非特异性免疫),和获得性免疫(
分子诊断常用技术(一)
分子诊断技术即是利用分子生物学方法对人类及病原体的各类遗传物质进行检测,以帮助对疾病进行诊断。以技术原理出发对分子诊断技术进行归类与评价,以对目前临床常用技术的沿革进行回顾。1961 年Hall 建立的液相分子杂交法标志着人类掌握分子生物学技术对特定核酸序列进行检测,开启了对疾病分子诊断的大门。19
原位分子杂交技术依标记物的不同分类
原位杂交技术依据其标记物的不同可分为电镜放射性原位杂交技术和电镜非放射性原位杂交技术。 原位杂交技术应用放射性同位素作为标记,具有敏感性高,标记物不会干扰杂交反应,并且结果适合于进行定量分析等特点。常用的几种放射性同位素:3H,35S,125I和32P都已经被用于电镜原位杂交,但各有优缺点,目
Southern杂交技术
SOUTHERN BLOT1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs.2. Photograph the gel with a r
Northern杂交技术
经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Miller,
简述DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人
分子杂交仪的操作步骤
1. 通电预热 [2] 接通电源线、打开电源开关、恒温室温度显示、应显示室温值,按温度预热20分钟后,恒温室将处于恒温状态。 2. 安装杂交管 旋转门锁、打开玻璃门、向下点动旋转、步进开关、使杂交支架旋转到合适的位置,将杂交管卡紧在旋转支架上,关上玻璃门并锁紧。 3. 启动旋转支架 向
分子杂交仪主要特征
FYY系列分子杂交仪该仪器采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置。该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶标板或
分子杂交仪简介及特点
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 核酸分子杂交仪,本仪器的各项技术指标均达到国外同类产品水平。可替代进口杂交仪,
主要特征/分子杂交仪
FYY系列分子杂交仪该仪器采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。 具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。 温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置。 该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶
关于核酸分子杂交的应用
核酸分子杂交作为一项基本技术,已应用于核酸结构与功能研究的各个方面。核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性,因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床
分子杂交仪的原理分析
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。 核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单
分子杂交仪产品类型
分子杂交仪 Hybridization Oven根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。1、是用于大容量的分子杂交仪;2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;3、用于小容量的核酸杂交仪;4、微孔板原位杂交仪;5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;6、Western杂交仪。原位分
简述DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人
分子杂交仪有哪些特征?
该仪器采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。 具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。 温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置。 该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶标板或试剂
分子杂交箱的工作原理
分子杂交箱是采用核酸分子杂交技术检测待测基因组中是否含有已知基因序列的设备,广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的检测和遗传病的基因诊断等方面。 Techne分子杂交箱可调节支脚保证精确的平衡;温度范围:高于室温10°C-100°C ;独特的双面玻璃门;无声安