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辛酸/硫酸铵法提纯IgG

一、原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。二、材料与方法1、材料(1)动物腹水(2)辛酸(caprylic acid,CA),化学纯(3)硫酸铵,分析纯(4)SPA Sepharose 4FF亲合层析柱2、操作方法(1)蛋白含量测定紫外分光光度法测样品在波长260nm,280nm处的I及收光度(A 260, A 280),蛋白含量按以下公式计算蛋白量(g/L)=(1.45* A 280- 0.74* A 260)*稀释倍数(2)主要步骤①腹水滤纸过滤去沉淀和脂质,滤液用4倍体积60mmo1/ L醋酸缓冲液(pH4.0)稀释后,用Na0H调,PH值至4.5。②逐滴加入辛酸(终浓度25u1/ml),室温h搅拌30分钟后,以6000-8000r/......阅读全文

三种方法检测孕妇血清IgG抗A(B)效价的结果比较

用经典法/改良法和微柱凝胶法检测孕妇血清IgG抗A(B)效价的结果比较:作者:张庆侠,郝建华,倪琳婷,程琼,周天祥作者单位:深圳市第六人民医院,广东 深圳 518052【摘要】  目的:比较经典法、改良法和微柱凝胶法抗人球蛋白试验检测孕妇血清中IgG抗A(B)效价的差异。方法:用经典法、改

三种方法检测孕妇血清IgG抗A(B)效价的结果比较

作者:张庆侠,郝建华,倪琳婷,程琼,周天祥作者单位:深圳市第六人民医院,广东 深圳 518052【摘要】  目的:比较经典法、改良法和微柱凝胶法抗人球蛋白试验检测孕妇血清中IgG抗A(B)效价的差异。方法:用经典法、改良法和微柱凝胶法分别检测136例孕妇血清中IgG抗A(B)效价 ,计算其

Jackson ImmunoResearch 二抗选用指南

Jackson ImmunoResearch  公司二抗选用指南( 此部分内容来源于 Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc  网站,如有疑问,请参考原网站)亲和层析法纯化的二抗    用亲和层析法纯化的抗体是指,利用耦

一种关于治疗手足口病的双特异性抗体的研究

  手足口病(HFMD)是由肠道病毒引起的疾病,引发手足口病的肠道病毒有20多种,其中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16(CA16)是手足口病的主要致病因子,可导致严重的中枢神经系统并发症。最近针对EV71病毒感染的疫苗和抗体的开发取得了突破性的进展,然而,针对EV71和CA16同时感染的

Jackson ImmunoResearch 二抗选用指南

Jackson ImmunoResearch 公司二抗选用指南(此部分内容来源于Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc网站,如有疑问,请参考原网站)亲和层析法纯化的二抗用亲和层析法纯化的抗体是指,利用耦联到琼脂糖凝胶上的抗原将抗血清中的抗体亲和层析下

常见传染病保护性抗体IgG检测在疾病预防控制中的作用

一、常见传染病的危害:纵观人的一生,无论是胚胎发育期,还是从幼年到老年的各个时期,都受到各类传染病(破伤风、白喉、百日咳、麻疹、腮腺炎、风疹、脊髓灰质炎、结核、乙脑、流脑、甲肝、乙肝等)的严重威协,给人类健康造成严重危害。如:胚胎期:当育龄期妇女或孕妇自身没有常见传染病特异性保护抗体IgG时,在受孕

免疫球蛋白提取技术(Immunoglobulin isolation technique)

免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。 随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很

优生四项(TORCH检测)的临床结果解读

“TORCH”一词最早由Andre Nahmia在上世纪70年代提出,指的是一组在孕期感染会导致胎儿先天畸形、死胎 、 早产 、 流产、 智力发育异常等的病原微生物。在提倡优生优育的今天,对于备孕或已经怀孕的女性来说,TORCH检测已不陌生。今天,我们主要来了解下TORCH检测的临床意义、结果解读及

TORCH感染筛查、诊断与干预原则和工作流程专家共识

近年来,国内外均发表了与TORCH感染相关的临床实践指南,但仍有内容需要加以补充和明确。国内部分专家就TORCH感染筛查、诊断及干预的临床路径进行了专题研讨,达成共识如下:(1)不是所有的TORCH病原体都需要孕前或孕期筛查;对围孕期妇女不需要进行单纯疱疹病毒抗体分型检测,若无临床症状,不需要等待其

免 疫 球 蛋 白 G (IgG) 片 段 的 水 解

一个新的抗体需要片段化的时候往往要进行摸索性的试验。选择反应时间的时候宁可保留部分抗体不被完全降解,这样可以避免蛋白酶过分裂解后导致抗体结合位点的破坏 。实验步骤木 瓜 蛋 白 酶 水 解 IgG 成 Fab 片段摸索性试验此 法 适 用 于 小 鼠(任何亚类)、大鼠、人 、山羊、绵羊、马 、鸡 、

免疫球蛋白(IgG)临床相关意义及检测试剂

免疫球蛋白(IgG)是人体免疫的主要作用分子,在健康人血浆中占免疫球蛋白总量的75%。人IgG分为4组不同的亚型:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。人IgG亚型的相对血清浓度是 IgG1>IgG2>IgG3>IgG4。这4种IgG 亚型在重链不变区的氨基酸序列95%以上相同,在绞链区(hi

EB病毒不同感染阶段的抗体阳性情况以及免疫检测策略

1. 实验目的:采用德国IBL的EB病毒不同抗原的抗体检测试剂盒对不同感染阶段的病人样本进行检测,统计出,不同阶段各种抗体的阳性率。为临床EB病毒的诊断,特别是EB病毒的免疫学诊断提供方法和策略依据。 2. 材料与方法 为了确定IBL EBV ELISA试剂盒的临床灵敏度和特异性,我们总共做了242

igg和igm区别

  新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 19,COVID-19)是由2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)感染引起的传染病。在造成全国数万人感染的同时,这一疫情也迅速向全球多个国家开始蔓延。2020年3月4日,国家卫生健康委员会

荧光偏振法快速准确高通量检测IgG和含Fc段衍生物

荧光偏振法快速、准确、高通量检测IgG和含Fc段衍生物Dr. Carolanne DohertyValitacell, NIBRT, Fosters Avenue, Blackrock, Dublin, Ireland    BMG多功能酶标仪可应用于定量IgG的新技术Valit

戊型肝炎病毒IgA抗体的研究进展

作者:周越球 陆松尧 梁立敏【摘要】  戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的经消化道传播的急性传染病,发病率逐年升高,目前尚无特效治疗方法,也无特异性被动和主动免疫制剂可供预防。在急性戊型肝炎患者中,血液或粪便中HEV

二抗的选择和定位

第一步:选择抗体。三种二抗抗体:Whole IgG,F(ab&;rsquo;)2片段,Fab片段。 Whole IgG抗体适用于多数情况,是性价比最高的。Whole IgG是完整的抗体分子,有一个Fc部分和两个与抗原结合的Fab部分 (Figure 1, Jackson Immun

荧光二抗如何选择更好-根据一抗种属及类型

荧光二抗如何选择更好-根据一抗种属及类型二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合

一种基于DNA的通用型蛋白检测系统

摘要:基于抗体的蛋白质检测方法,主要有western blot、ELISA、点杂交以及免疫组化等,这些方法被广泛地应用于科研和诊断领域。在蛋白质的免疫检测过程中,样品蛋白首先结合与特异性一抗上,然后再用携带标签(诸如:荧光染料,放射性元素,酶等)的二抗进行检测。然而,为了避免种间内的交叉反应,必

人体血清免疫球蛋白IgG是什么?

人体血清免疫球蛋白IgG是什么?人体血清免疫球蛋白IgG是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在。血清中含量最高的免疫球蛋白,是血液和细胞外液中的主要抗体。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG,它在抗感染中起到主力军作用,它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用),中和细菌毒

双水相萃取分离免疫球蛋白和单克隆抗体研究

抗体广泛用于疾病治疗、医疗诊断和免疫分离,具有广阔的市场需求和发展前景。抗体主要从动物血液、腹水和细胞培养液中分离得到,尤其是动物细胞培养制备单克隆抗体,已实现规模化生产。然而,目前抗体分离过程的成本仍旧较高,成为抗体产业发展的一个瓶颈,开发经济高效的抗体分离新方法,具有重要意义。双水相萃取具有生物

细胞系开发过程中IgG检测流程的简化

  介   在不同的研究人员中,以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员,例如 HPLC 和表面干

新冠igg抗体阳性意义

  新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2或2019-nCoV)感染引起的主要经呼吸道传播的急性病毒性疾病。截至4月23日23时30分,全球新冠肺炎累计确诊超过两百万,达到了2664262例,现有确诊达到了1748245例。死亡病例超过18万,达到186245例。

免疫球蛋白的作用和特性

五类免疫球蛋白中,IgM和IgG以高浓度遍布全身,是全身性体液免疫反应的主要效应分子。下面介绍各类Ig的特性和功能。一、IgGIgG是再次体液免疫反应产生的主要Ig,在血清中含量最高,达600~1600mg/100ml,占血清Ig总量的75%~80%,不同个体间差异很大。IgG多为单体,分子量150

鸡马立克氏病病毒抗体IgG(MDV IgG)ELISA试剂盒组成说明

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清,血浆及相关液体样本中鸡马立克氏病病毒抗体IgG(MDV IgG)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中鸡马立克氏病病毒抗体IgG(MDV IgG)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入马立克氏病病毒抗体Ig

免疫球蛋白提取技术(二)

(12)IgG的纯度鉴定,可采用下列方法之一鉴定。①玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可加样电泳后,只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时,同时可用全血清样品,不同浓度(NH4)2SO4盐析样品进行电泳,以资比较。②琼脂双相双扩散鉴定预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗IgG血清

细胞系开发过程中IgG检测流程的简化

简介在不同的研究人员中,以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员,例如 HPLC 和表面干涉

免疫球蛋白提取技术(一)

免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数

临床标本中的干扰物质(免疫)

干扰物是临床实验室检测误差的一个很重要的来源,它们在某种程度上对病人来说表现为是一种危害。常规工作中精密度通过室内质控监控,准确性通过与参考物质作比较试验进行验证,但实验室不能很容易的检测干扰物质引起的误差。广义上干扰物是导致分析物浓度或催化活力出现偏移的物质,如免疫法干扰常由交叉反应所致,因此,干

能影响酶免疫测定结果的标本内源性干扰因素

内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质,从而导致测定结果的假阳性。 1.类风湿因子(rheumatoid fact

免疫荧光三标实验如何做?如何选择二抗?

免疫荧光三标?——蓝色荧光的AMCA与Dylight 405标记二抗做免疫荧光实验中,经常要进行免疫荧光的双标记实验,也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时,可以选择不同来源的一抗,然后再选择分别针对一抗的二抗,同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里,都会选择一个