就这样做轻松搞定实时PCR探针设计

除了为克隆基因、预测编码蛋白而需要研究基因的构成外,当前在基因组学上的努力也包括对基因组构成的研究,以分析具有结构和调控因子插入的基因。近源物种分析成为比较基因组学的主要内容,被认为是研究进化、基因功能和人类疾病的重要方法。 利用该方法分析微生物,特别是细菌的基因组,早在 1996 年就已开始识别出细菌中的保守基因和与亚种相关的毒性基因(Fredricks and Reiman 1996)。这方面的进展促生了新的、大规模的检测和识别致病菌的方法。近源种 PCR 可以用来研究进化上相关的种,它们在基因组上有一 些共同的特点,这些保守的区域可被用于在基因组水平识别新种。还可以用该技术在尚未测序的物种的基因组中扩增同源基因。 设计策略 根据多元序列比较和引物设计的一般规律来设计近源种 PCR 引物。通过比较少数几个大的相近序列识别出保守区域,这些区域即是近源种引物的可能结合位点。近源种的比较需要对少数大的相近序列......阅读全文

基因探针的标记方法

为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素、地高辛配体等作为标记物的方法。但都不及同位素敏感。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。

自动探针台的维护

  探针测试台x-y工作台的分类  纵观国内外的自动探针测试台在功能及组成上大同小异,即主要由x-y向工作台,可编程承片台、探卡/探卡支架、打点器、探边器、操作手柄等组成,并配有与测试仪(TESTER)相连的通讯接口。但如果按其x-y工作台结构的不同可为两大类,即:以美国EG公司为代表的平面电机型x

探针台的使用方式

  1.将样品载入真空卡盘,开启真空阀门控制开关,使样品安全且牢固地吸附在卡盘上。  2.使用卡盘X轴/Y轴控制旋钮移动卡盘平台,在显微镜低倍物镜聚焦下看清楚样品。  3.显微镜切换为高倍率物镜,在大倍率下找到待测点,再微调显微镜聚焦和样品x-y,将影像调节清晰,带测点在显微镜视场中心。  4.待测

关于基因探针的简介

  基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:  ①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。  ②

eve如何移动扫描探针

先打开恒星系视图,扫描控制面板上也有按钮,打开后激活战术标尺!先释放出一个“探针”,将搜索范围放到15AU,或者你技能和探针能达到的范围!开始第一次扫描,扫面结果会出现:异常空间、引力、磁力、雷达、光雷达和其它信号种类!第一次扫描到的不一定达到100%信号强度!找到了一个你需要的空间种类后,鼠标右键

扫描开尔文探针显微术

在动态非接触模式下,最具发展潜力的电学测量模式是扫描开尔文探针显微术(scanning Kelvin probe microcopy,SKPM),其工作原理是当导电针尖接近样品表面时,由于两者功函数的不同,针尖—样品间会产生静电相互作用,即接触电势差(contact potential differ

TaqMan探针法的操作

在之前发表的文章《实时荧光定量PCR检测方法,你选对了吗?》中提到,实时荧光定量PCR常用的方法包括了SYBR Green染料法、TaqMan探针法、分子信标、荧光共振能量传递(FRET)和LUX Primers等。那么应用最为广泛的则是SYBR Green染料法和TaqMan探针法,两者各

DNA探针的功能特性

  DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以

什么是开尔文探针系统

  开尔文探针系统是一款可以被大多数客户所接收的高端扫描开尔文探针系统,它是在ASKP基础之上包括了彩色相机/TFT显示器、2毫米和50微米探针、外部数字示波镜等配置。

探针台的使用方式

  1.将样品载入真空卡盘,开启真空阀门控制开关,使样品安全且牢固地吸附在卡盘上。  2.使用卡盘X轴/Y轴控制旋钮移动卡盘平台,在显微镜低倍物镜聚焦下看清楚样品。  3.显微镜切换为高倍率物镜,在大倍率下找到待测点,再微调显微镜聚焦和样品x-y,将影像调节清晰,带测点在显微镜视场中心。  4.待测

开尔文探针系统的概述

  开尔文探针系统是一款可以被大多数客户所接收的高端扫描开尔文探针系统,它是在ASKP基础之上包括了彩色相机/TFT显示器、2毫米和50微米探针、外部数字示波镜等配置。  吸附,电池系统,生物学和生物技术,催化作用,电荷分析,涂层,腐蚀,沉积,偶极层形成,显示技术,教育,光/热散发,费米级扫描,燃料

核酸探针标记的简介

  核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。

DNA探针的制备方法

基因组DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。要得到一种特异性DNA探针,常常是比较烦琐的。以细菌为例,细菌的基因组大小约为5×106碱基,约含3000个基因。要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后(如用限制性内切酶做不完全水解)分别

关于探针标记的简述

  探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。利用核苷酸碱基顺序互补的原理,用特异的基因探针即识别特异碱基序列的有标记的一段单链DNA(或RNA)分子,与被测定的靶序列互补,以检测被测靶序列的技术叫核酸探针技术。探针制备就是将目的基因进行标记。特异性探针有三种形式——cDNA、R

电子探针的原理

电子探针的原理如图1所示。图1(1)电子光学系统。电子束直径0.1~1μm,电子束穿透深度1~3μm。被激发原子发射特征X射线谱过程如下:围绕原子核运动的内层电子,被电子束的电子轰击后,其他外层电子为补充轰击出的电子而发生跃迁,在跃迁过程中释放出能量,即发射出X射线。(2)X射线谱仪。测量各种元素产

常见RNA探针及其特点

常见RNA探针及其特点:RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA、cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。 cRNA探针:是以cDNA为模板,通过体外转录而获得的。因为它是一种单链探针

“DNA探针”的技术依据

DNA探针根据其来源分为3种:一种来源于基因组中的基因本身,称为基因组探针(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一种是从相应的基因经转录获得mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe);此外,还可在体外人工合成20~50个碱基的与基

手动探针台规格描述

  手动探针台规格描述 (以实验室常见的仪准ADVANCED八寸,六寸探针台为例):  探针台载物台平整度:5μm探针台右侧标配显微镜升降机构,可抬高显微镜,便于更换镜头和换待测物探针台左侧标配升降器,可快速升降台面8mm,并具备锁定功能探针台右下方标配精调旋转轮,可微调控制台面升降范围25mm(客

探针扫描系统详细解析

技能篇太空测量学---每级允许多放一枚探针。玩家初始是3枚探针,满级就是3+5=8枚定点测量学---每级减少10%扫描误差三角测量学---每级提高10%扫描强度天文探测学---每级提高10%扫描速度(初始10秒)舰船篇EVE中最适合扫描的舰船是各族T2护卫舰---隐秘护卫舰,也就是隐侦(隐侦这个词有

电子探针分析方法

利用电子探针分析方法可以探知材料样品的化学组成以及各元素的重量百分数。分析前要根据试验目的制备样品,样品表面要清洁。用波谱仪分析样品时要求样品平整,否则会降低测得的X射线强度。 1 点分析用于测定样品上某个指定点的化学成分。下图是用能谱仪得到的某钢定点分析结果。能谱仪中的多道分析器可使样品中所有元素

AFM探针的操作模式

随着AFM技术的发展,各种新应用不断涌现。具体包括如下技术:(1) 接触模式 (contact mode) 最早的模式,探针和样品直接接触,探针容易磨损,因此要求探针较软,即悬臂的弹性系数小,一般小于1N/m。(2) 轻敲模式 (tapping mode) 也叫Dynamic Force或者Inte

基因探针的制备-方法

进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组DNA探针进,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外重组

SECM探针的清洗方法

1.快速循环伏安法       设置足够的阴极电位区间,在1M H2SO4溶液中做一个快速的循环伏安曲线,使金属表面循环吸氢放氢。同样地,如果电位区间是足够的阳极电位区间,铂表面会形成氧化层,然后在还原过程中会被清除。电位快速扫描将帮助清洁铂表面。典型的电位范围是-0.65VSCE~0.85VSCE

溶酶体荧光探针原理介绍

溶酶体荧光探针溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等,是物质代谢的场所。弱碱性胺选择性聚集在胞内低pH值的小室中,可用于研究溶酶体的生物合成和发病机理。其中最常用的就是DAMP,它不发荧光,需要和抗DNP的抗体共同使用

随机引物法标记探针

实验概要本实验探针标记采用TAKARA公司的随机引物标记试剂盒Ver.2。实验步骤1.于1.5ml离心管中加入5μl H2O,2μl引物(N6),5μl DNA(0.1μg-1μg)。2.充分混匀,98°C 3分钟。3.离心1秒钟,将离心管盖上的汽化水甩下。4.加入2.5μl dNTPs(各2.5m

探针台如何工作?分类

  探针台如何工作?  探针台可以固定晶圆或芯片,并精确定位待测物。手动探针台的使用者将探针臂和探针安装到操纵器中,并使用显微镜将探针尖端放置到待测物上的正确位置。一旦所有探针尖端都被设置在正确的位置,就可以对待测物进行测试。对于带有多个芯片的晶圆,使用者可以抬起压盘,压盘将探针头与芯片分开,然后将

主机探针的工作原理

温度探针是一个固定在汽缸壁上的中间具有四个孔的金属杆。金属杆的前端穿过汽缸壁插入汽缸与汽轮机内流动做功的蒸汽接触,受到蒸汽的冲刷,金属杆在汽缸壁外面部分则予以保温,一支热偶装在探针的一个孔中,它的热接点敷设在受到蒸汽冲刷的探针前端的金属中,另一支热偶装在探针的另一个孔中,它的热接点则敷设在距探针前端

地高辛对探针的标记

实验概要本实验拟通过随机引物及PCR方法,将DNA探针片段用DIG标记,进一步掌握探针的标记技术。实验原理带有地高辛标记的dUTP(图1)通过缺口翻译、随机翻译或PCR等反应而使探针核酸片段带有地高辛,进一步可与带有AP、CSP等各种抗地高辛抗体复合物发生免疫反应,使探针上带有AP等分钟,进一步能催

扫描探针隔振措施

隔振措施任何一个扫描探针显微镜系统都可以看作为一个具有一个特征共振频率ωk的振子系统。当外界的机械振动频率与ωk一致时,会激发扫描探针显微镜自身的共振,导致探针样品之间的相对振动。这种振动对扫描图像来说是一种周期性噪声。为了减小外部振动对扫描探针显微镜的影响,扫描探针显微镜的机械部件通常由刚性很好的

荧光定量PCR技术特点、原理及其应用1

荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ- PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及