MHC四聚体技术:检测抗原特异性T细胞的金标准

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如 T 细胞介导的细胞免疫和 B 细胞介导的体液免疫。由于 TCR 与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低,半衰期短,相互结合后容易快速脱落,重组的可溶性 MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原特异性的 T 细胞检测。1996 年,美国斯坦福大学 John D. Altman 博士等人开发出 MHC-抗原肽复合物四聚体(简称:MHC 四聚体)技术。该技术由 4 个 MHC-抗原肽单体分子及荧光染料组成的复合物,它以带有信号标记的链霉亲合素为基础,交联四个 MHC 分子单体,形成 MHC 四聚体;一个 MHC 四聚体分子可与同一 T 细胞表面的 3-......阅读全文

T细胞增殖试验类型

  (1) 形态法:其原则是将外周血液或分离的单个细胞与适量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培养72h,取培养细胞作涂片染色镜检。据细胞的大小、核与胞浆的比例、胞浆的染色性和核结构以及有无核仁等特征,分别计数淋巴母细胞、过渡性母细胞和核有丝分裂相以及成熟的小淋巴细胞,以前三者为转化细胞,每份标本

初始T细胞的定义

初始T细胞(naive T cell,Tn),也称作未致敏T细胞,在胸腺中发育成熟迁移至外周淋巴组织中(如脾脏、淋巴结)。

T细胞的分类介绍

T细胞根据功能的差异被分为几个亚型。虽然在胸腺中就分化出了CD+和CD+两者,但是在外周T细胞还会发生进一步的分化。常规适应性T细胞辅助CD+ T细胞辅助T细胞(TH细胞)对其他淋巴细胞的活动起辅助作用,包括B细胞向浆细胞和记忆B细胞的发育,以及细胞毒性T细胞和巨噬细胞的激活。它们也被称为CD+ T

什么是记忆T细胞?

记忆T细胞(TM)是人体免疫细胞。人体免疫的第三道防线中分为两部分,一是体液免疫、二是细胞免疫。T细胞分裂和分化后,会分别形成记忆T细胞和效应T细胞,而记忆T细胞则会在下一次抗原入侵时再次将记忆中的杀毒方法再次调动出来,再次破坏靶细胞即受病菌或病毒感染的细胞,释放出靶细胞中的抗原。

T细胞亚群的分离

T细胞亚群的分离分离T细胞亚群,包括各种CD抗原阳性的亚群、αβ型T细胞受体阳性的T细胞或γδ型T细胞、或者其它表面标志不同的T细胞亚群,通常需要有相应的特异性抗体。用直接或间接免疫荧光染色,通过FACS分离细胞;或用抗体包被的免疫磁珠,通过磁场分离细胞;或用抗体亲和层析柱分离细胞。

T细胞抗原受体

  1、在外周淋巴器官中大多数成熟T细胞(95%)的TCR分子,由α链和β链经二硫键连接的异二聚体分子,也称TCR-2.T细胞特异性免疫应答主要是这一类T细胞完成。  2、少数成熟T细胞的TCR分子是由γ链和δ链组成的异二聚体分子,结构与TCRαβ相似,也称TCR-1.它可直接识别抗原(多肽、类脂分

T细胞受体的结构

T细胞受体是一个固定在细胞膜上的异源二聚体,多数由高度易变的α亚基和β亚基通过二硫键连结构成。这一类T细胞被称为αβ T细胞。少数含有γ亚基和δ亚基被称为γδ T细胞。T细胞受体会与恒定的CD3分子一起构成T细胞受体复合体。每一个亚基都含有两个细胞外的结构域:可变区与恒定区。这些结构域属于免疫球蛋白

效应T细胞的概述

  效应T细胞是T细胞接受抗原刺激后,经过增殖,分化形成的细胞;效应T细胞描述了一组细胞,该细胞包括主动响应刺激(例如Co-stimulation)的几种T细胞类型,包括调节性T细胞、辅助T细胞、细胞毒性T细胞,效应T细胞具有释放淋巴因子的功能,在此过程中,有一小部分T细胞成为记忆T细胞。这个阶段称

什么是T细胞突触-?

T细胞突触是APC(抗原提呈细胞)和T细胞相互作用的过程中,在细胞与细胞接触部位形成了一个特殊的结构,称为T细胞突触(T cell synapse),又称为免疫突触(immunological synapse)。

什么是T细胞受体?

  成熟的T细胞表面特异性识别抗原的受体称为T细胞抗原受体(TCR),它也是所有T细胞的特征性表面标志。95%的TCR是由α和β链组成的异二聚体。人类TCRβ链基因比较复杂,在识别抗原过程中发生基因重排,发挥重要的作用。  TCRβ基因复合体至少包括67个V(variable)基因区,2个D(div

调节性T细胞(Treg)

调节性 T 细胞 (Treg)是近年来免疫学领域研究的热点,其具有免疫应答低下和免疫抑止两大特征,通过“主动”的方式抑止免疫系统――发挥免疫负调作用。现已证实,除CD4Treg外,部分CD8 T细胞也为Treg。根据来源及作用机制,Treg可分为天然产生的CD4+CD25+Treg(自然调节性T细胞

T细胞的移植介绍

去除供体的T细胞可预防GVHD,其代价为移植物被排斥率增加,免疫重建延迟、复发率增加。对去T细胞移植后预防性的输注供体源的T细胞可降低复发率。

T细胞阳的分类

按免疫应答中的功能不同,可将T细胞分成若干亚群,一致公认的有:辅助性T细胞(Helper T cells,Th),具有协助体液免疫和细胞免疫的功能;抑制性T细胞(Suppressor T cells,Ts),具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能;效应T细胞(Effector T cells,Te),具有

外周血T细胞的检测

用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析            

调节T细胞的分类

  调节/抑制T细胞有很多种,可分为自然存在与诱导产生两类:  自然存在:  [[CD4 CD25T细胞]]:在维持机体对自身抗原的耐受中扮演重要角色,是研究最广泛深入的一种调节/抑制T细胞。 诱导产生:  [[TR1细胞]]:以分泌IL-10为特征,负调节免疫应答。  [[TH3细胞]]:最早在口

效应T细胞的介绍

  效应T细胞是T细胞接受抗原刺激后,经过增殖,分化形成的细胞;效应T细胞描述了一组细胞,该细胞包括主动响应刺激(例如Co-stimulation)的几种T细胞类型,包括调节性T细胞、辅助T细胞、细胞毒性T细胞,效应T细胞具有释放淋巴因子的功能,在此过程中,有一小部分T细胞成为记忆T细胞。这个阶段称

小鼠脾脏T细胞和人PBMCs的体外T细胞活化实验(一)

导言成熟T细胞通过TCR识别并与抗原-MHC复合物反应。TCR活化的最直接后果是信号通路的起始,这些信号通路包括诱导特异性蛋白酪氨酸激酶(PTKs)、PIP2分解、PKC活化以及细胞内钙离子浓度的升高。这些早期事件被传递到核,产生诸多效应:1、 T细胞克隆的扩增2、 细胞表面活化标志的上调3、 分化

Immunity:效应性T细胞和耗竭性T细胞早期命运决定机制

  2019年10月9日,E. John Wherry组在Immunity杂志上发表了文章“TCF-1-Centered Transcriptional Network Drives an Effector versus Exhausted CD8 T Cell-Fate Decision”,揭示在

新型T细胞疗法!Hyleukin7多水平作用T细胞成熟

  NeoImmuneTech(NIT)是一家专注于开发T细胞疗法的临床阶段生物制药公司。近日,该公司宣布与百时美施贵宝(BMS)签订了一项临床合作协议,评估其T细胞放大器——长效IL-7疗法Hyleukin-7(rhIL-7-hyFc, NT-I7)和PD-1阻断抗体疗法Opdivo(欧狄沃,通用

小鼠脾脏T细胞和人PBMCs的体外T细胞活化实验(二)

材料1X 无菌 PBSAnti-human CD3:Clone OKT3 (Functional Grade, eBioscience Cat. No. 16-0037) or Clone HIT3a (Functional Grade, eBioscience Cat. No. 16-0039)R

免疫分子与受体工程学—MHCIg二聚体检测抗原特异性T细胞

实验步骤 基 本 方 案 构 建 MHC I-Ig 二聚体材 料编码目的 M H C I 类分子的 c D N A 及合适的引物M Z w I 和 X k I 限制性内切核酸酶及缓冲液(N e w England Biolabs)T A 克 隆 试 剂 盒(Invitrogen),可选p X I g

T细胞与B细胞的活化过程

T、B细胞活化都需抗原,但T细胞不能直接识别抗原,而只能识别经抗原提呈细胞处理过的抗原B细胞可以直接识别抗原,也可以识别经提呈细胞处理过的抗原。T\B细胞活化过程所需的Th细胞不同。

T细胞变身异型细胞大战EB病毒

  为早日将其他B细胞体内病毒逼出体外,参谋T细胞想出一个办法:每个细胞的内力就像一条溪流,或许溪流之力难以将病毒逼出体外,可是聚溪成海,将这些点滴内力聚在一起则威力惊人,将之在每个细胞的体内循环,病毒必受不了压力,而逼出体外,外面先锋可乘机将其斩首。可是既然病毒受不了这个压力,那B淋巴细胞可以忍受

细胞毒性T细胞的分类特征

  CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:  1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。  2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,

关于T细胞、B细胞亚群的简介

  淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群,参与机体细胞及体液免疫。可将其分为 T 淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)。T细胞亚群是细胞免疫的主要免疫应答形式,根据表型不同分为CD3细胞、CD4细胞、CD8细胞三类,在正常情况下,这三类细胞处于动态平衡状态,其中CD3细胞是全T细胞标志,

细胞毒性T细胞的作用机制

当细胞毒性T细胞遇到受感染或是不健康的体细胞,细胞毒性T细胞会释放出细胞毒素,如穿孔素、颗粒酶,以及颗粒溶解素。这些酵素会进入目标细胞的细胞质,并使细胞内的丝氨酸蛋白酶诱发胱天蛋白酶的级联反应,这个反应会使一连串的胱胺酸蛋白酶活化,引发细胞凋亡。另外一种诱发细胞凋亡的途径是借由细胞表面受体的结合。细

从单个核细胞中分离T细胞

从单个核细胞中分离T细胞1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反

红细胞血型抗原的特异性

  有一些血型抗体,如抗IH,抗IA,抗IB,抗IP1等,只与带有I抗原及另外一个抗原的细胞发生反应,而不与其中只有一个抗原的细胞发生反应。说明这些抗原为复合抗原,在一个分子上具有两种特异性。  Lewis血型抗原实际上是血浆中的抗原,红细胞上的Lewis抗原是从血浆中吸附来的。I抗原在分泌液中虽有

关于急性T淋巴细胞白血病(TALL)细胞表型介绍

  非T细胞型急性淋巴细胞白血病(nonT-ALL),约占全部ALL的75%-85%,所有nonT-ALL细胞内部都有重排的Ig基因,因此nonT-ALL大多属于B细胞系白血病,极少数起源于淋巴干细胞。根据T-ALL细胞表型与不同分化阶段B系细胞表面标志的对应关系,将非T淋巴细胞白血病进一步划分为无