几种菌种的保存及复苏方法
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等,经洗涤、干燥、包装、灭菌后使用。1.2溶解培养基配料先在烧杯中放适量水,按培养基配方称取各项材料,依次将缓冲化合物、主要元素、微量元素、维生素等材料加入水中溶解,最后加足水量,搅拌均匀。1.3调pH值配料溶解后将培养基冷却至室温,根据要求加稀酸(0.1mol/L盐酸)或稀碱(10%氢氧化钠)调pH值。加酸或碱液时要缓慢、少量、多次搅拌,防止局部过碱或过酸而导致测量不准确和营养成分被破坏。1.4加凝固剂配制固体培养基时需加凝固剂,如,琼脂、明胶等。将凝固剂加入液体培养基中,加热并不断搅拌至融解,再补足所蒸发水分。1.5过滤分装在二......阅读全文
几种菌种的保存及复苏方法
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸
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定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸
菌种保存的几种常用方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种:
菌种保存方法
甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右.(1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落.(2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右.(3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或
菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代
菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代
菌种保存方法
菌种保存方法 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以
菌种保存方法汇总
甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右. (1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落. (2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右. (3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL
菌种保藏的几种方法
基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种
菌种保藏的几种方法
菌种保藏方法大全 基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方
菌种保藏的几种方法
一、基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力. 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的. 二、保藏方法
菌种保藏的几种常用方法
基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可
菌种保藏的几种方法
基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下
微生物菌种保存方法
一、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的
常用的菌种保存方法有哪些
菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作,是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。菌种保藏的方法多种多样,有的虽然保藏效果好,但投资高或操作繁杂。在生产实践中,更需要设备投入少,能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法,如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相
保存菌种技巧
保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种,挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml LB中(如菌种含质粒则应加抗生素)37摄氏度快摇 8小时,按0.1%-0.5% 比例转种,培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量,以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时,读数值在0.1-0.5
菌种保存的原理
菌种保存的原理是预防或减缓DNA 复制时自发突变导致菌种退化,因此要创造代谢不活泼的状态,而菌种保存时使菌种进入休眠态(孢子、芽孢),并创造干燥、低温、缺氧、缺营养的环境,创造的环境越接近此状态,所保存的菌种的时间就越长,所以从原理上讲,所有菌种都可用这种方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感嗜
常用实验室菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又
菌种保存管能保存霉菌及酵母菌吗?
对于霉菌等真菌需培养7 天进行保存,而酵母菌需培养三天将孢子洗脱下来进行保存,保存管中的小瓷珠可以作为介质来吸附孢子和菌丝,相当于砂土保存法中砂土作为载体起到的作用。
甘油菌种怎么复苏,甘油菌种保藏具体步骤
1、将无菌操作台灭菌30min,并用75%酒精棉球消毒包括手在内的所有物品。2、用灭菌接种环扣取试管中的冷冻菌块,然后放入3mlLB液体培养基上,最后在37℃150rpm过夜培养。3、将过夜菌液重新按照上一个步骤活化一次,一般经2次活化的菌液即可用于实验。这个过程操作一定要快,应提前准备好所有的物品
能用菌种保存管永久保存菌株吗?
温度越低,保藏效果越好。从目前的试验数据及实际保存效果来看,-20℃可保存1-5 年,-80℃或液氮中可保存5-10 年,不同菌种及不同的保存温度保存时间会有所不同(例如:大肠、沙门等常规细菌-20℃我们目前可以保存到6年)。但需要注意的是所保存的菌种需每年抽检进行生化特征的鉴定,确定菌株无变异。
传统的菌种保存方式简介
斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可广泛用于细菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。液体石蜡保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌,方法简便,可防止斜面干燥和氧气进入,但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。甘油冷冻保存法:用于一般细菌的保存,需使甘油终浓度为20%左右,然
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液(10 mmol/L Tris • HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中,其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子,从而抑制 DNA 酶的活性(Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂)。 TE 的 pH 为 8.0 是为
瓷珠菌种保存流程
1.从培养18h以上的平板上刮去新鲜纯培养物于菌种保存管中,配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液。2.拧紧保存管,来回颠倒几次使细菌乳化,不能旋摇。3.用无菌移液器将菌种保存管内的液体吸取干净,妥善放置被吸出的液体。4.拧紧保存管,迅速将其置于-20℃或-70℃冰箱中。
瓷珠菌种保存法
传统的菌种保存方式简介• 斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可广泛用于细菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。• 液体石蜡保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌,方法简便,可防止斜面干燥和氧气进入,但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。• 甘油冷冻保存法:用
在使用后,菌种保存管的保存环境要求
菌种保存管采用的是低温冷冻保存法,因此,使用后,需放置低温环境,如-20℃、-80℃或液氮中保存,而且温度越低,保存效果越好。用户需根据菌种的保存要求选择具体保存温度。
不可不学的微生物菌种保存方法
一、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的
瓷珠菌种保存法的原理
瓷珠菌种保存管是实验室保存菌种的容器,管内有表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存,放置于-20℃或-80℃下便可创造干燥、低温、缺营养的环境,使菌株处于“休眠” 状态,方可长期保存(视不同菌种与保存温度,一般可保存3-10 年), 同时菌种保存管的取用和保存较为便利(取用复苏及保存菌种仅需1分钟)。
瓷珠菌种保存法的优点
优点:操作简单方便、菌种保存快速、包装物体积小、菌种保存时间长。操作简单方便:挑取细菌新鲜纯培养物,接入菌种保存管。菌种保存快速:混匀后,吸出冷冻保存液。包装物体积小:1.8ml冷冻管。菌种保存时间长:2-8℃可保存6个月;-20℃可保存12个月;-80℃可保存24个月。
微生物质控菌种复苏、保藏、使用及管理(二)
2、冻干菌株复苏补充说明1)志贺氏菌、阪崎肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、粘质沙雷伯氏菌、弗氏柠檬酸杆菌、铜绿假单胞菌、芽孢杆菌类、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌:复苏水化液为脑心浸液培养基,复苏培养