食品微生物鉴定之生化实验汇总(二)
(二)蛋白质和氨基酸的代谢实验明胶液化实验(1)原理:某些可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶),能使明胶分解为氨基酸,使明胶失去凝固能力而液化,因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。(2)实验方法:取18~24h的斜面培养物穿刺接种,并有两支未接种的空白对照。(3)结果观察:于30℃培养20天后观察,明胶液化的为阳性。由于室温下明胶培养基呈液状,因此在观察结果时,应将其放置于4℃的冰箱中30分钟后拿出观察。若明胶仍能全部凝固,为阴性,有部分或全部不能凝固为阳性。 吲哚实验(1)原理:某些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨水中的色氨酸产生吲哚,当加入吲哚试剂(对二甲氨基苯甲醛)后则形成红色的玫瑰吲哚。(2)培养基:蛋白胨水培养基。(3)实验方法:将待检菌接种于富含色氨酸的蛋白胨水培养基中,35℃孵育24~48h,沿试管壁慢慢加入吲哚试剂,观察结果。(4)结果:于两液面接触处出现红色为阳性,无色为阴性。(5)应用:主要用于肠......阅读全文
食品微生物鉴定之生化实验汇总(二)
(二)蛋白质和氨基酸的代谢实验明胶液化实验(1)原理:某些可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶),能使明胶分解为氨基酸,使明胶失去凝固能力而液化,因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。(2)实验方法:取18~24h的斜面培养物穿刺接种,并有两支未接种的空白对照。(3)结果观察:于30℃培养20天后观
食品微生物鉴定之生化实验汇总(一)
不同的细菌具有各自的独特的酶系统,因而对底物的分解能力各异,其代谢的产物也不相同。这些代谢产物又具有不同的生物化学特性,可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。掌握各种生化反应的原理和应用是细菌鉴定的基础。生理生化特性的测定主要根据Shirling & Gottlieb《Internatio
食品微生物鉴定之生化实验汇总(三)
(三)碳源和氮源的利用实验 唯一碳源利用实验(1)原理:在基础培养基只提供一种待检测碳源,若菌株生长则表明菌株能以此种碳源为唯一碳源,否则不能。(2)培养基:基本培养基:(NH4)2HPO41g;NaCl 1g;MgSO4•7H2O 0.2 g;KH2PO40.5 g;琼脂20g;蒸馏水1000mL
食品微生物鉴定之生化实验汇总(四)
(四)各种酶类实验 氧化酶试验(1)原理:氧化酶(即细胞色素氧化酶),是细胞色素氧化酶系统中的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。因此,本试验结果与细胞色素C的存在有关。(2)实验方法:菌落法:直接滴加试剂于被检菌落上;滤纸
微生物鉴定之生化实验大全
不同的细菌具有各自的独特的酶系统,因而对底物的分解能力各异,其代谢的产物也不相同。这些代谢产物又具有不同的生物化学特性,可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。掌握各种生化反应的原理和应用是细菌鉴定的基础。生理生化特性的测定主要根据Shirling & Gottlieb《Internatio
食品微生物实验室常见19种培养基配方汇总(二)
七、蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml。欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于9
实验室微生物基础操作知识小汇总(二)
培养 1、根据培养时是否需要氧气,可分为好氧培养和厌氧培养两大类。 好氧培养:也称“好气培养”。就是说这种微生物在培养时,需要有氧气加入,否则就不能生长良好。在实验室中,斜面培养是通过棉花塞从外界获得无菌的空气。三角烧瓶液体培养多数是通过摇床振荡,使外界的空气源源不断地进入瓶中。 厌
微生物实验操作中常见注意事项汇总(二)
4、灭菌温度与时间 压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间见下表: (1)干热灭菌器灭菌温度160℃,1.5-2h。 (2)压力蒸气灭菌 锅灭菌温度与时间。 间接灭菌方法 1、灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌,某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏,可用此法灭菌。 (1)将欲灭菌物品置于
微生物检测基础操作汇总(二)
1、倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。
微生物常见检测方法汇总(二)
商业化快速微生物检测法 微生物的检测,其发展方向是快速,准确,简便,自动化,当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理,结合不同的检测方法,设计了形式各异的微生物检测仪器设备,正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。例如:1、抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术2、BACTOMETER
微生物鉴定中常用的生化反应
实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物鉴定中常用的生化反应
实验方法原理1. 有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。2. 细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)
微生物鉴定中常用的生化反应
实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物鉴定中常用的生化反应
微生物的生化反应对常见的微生物鉴定有着简单便捷的应用,从而证明微生物生理特征的多样性。例如(1)判断微生物为革兰阳性还是阴性细胞。(2)初步判断微生物是否为厌氧性微生物。实验方法原理1. 有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色
微生物鉴定中常用的生化反应
一、实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄
微生物鉴定中常用的生化反应
实验概要有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物鉴定中常用的生化反应
实验概要有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物常规鉴定技术(二)
4、甲基红(Methyl Red)试验 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。 试验方法:挑取新的待试纯培养物少许,接种于通用培养基,
食品微生物检测技术全自动微生物鉴定仪鉴定原理
碳源是为微生物提供碳素来源的物质,用于合成菌体,碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的物质(如糖类、脂质、蛋白质等)。碳可占一般细菌细胞干重的一半。全自动微生物鉴定仪就是利用微生物对不同碳源代谢率的差异,针对每一类微生物筛选95种不同的碳源,配合显色物质(如 TTC、TV),固定
微生物检测基础知识汇总(二)
微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。2、细菌细胞在固
微生物鉴定中常用的生化反应2
实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物鉴定中常用的生化反应介绍
实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。
微生物生理生化鉴定的新方法
微生物鉴定中的生理生化试验代谢,在所有活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢,代谢过程主要是酶促反应过程。各种微生物具有不同的酶系统,利用的底物不同,或虽利用相同的底物但产生的代谢产物不同,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌,尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中,生理生化试验占有重要的地位
微生物生理生化鉴定的新方法
微生物鉴定中的生理生化试验代谢,在所有活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢,代谢过程主要是酶促反应过程。各种微生物具有不同的酶系统,利用的底物不同,或虽利用相同的底物但产生的代谢产物不同,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌,尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中,生理生化试验占有重要的地位。 常
微生物鉴定常见生化反应及应用价值
明胶液化试验 (1)原理:某些细菌可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶),能使明胶分解为氨基酸,使明胶失去凝固能力而液化,因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。 (2)方法:将待检菌接种于明胶培养基中,22℃培养7d或更长时间,每天观察结果有无凝固。 (3)结果:如无凝固,则表示明胶
食品微生物检验之纸片法
摘要:纸片法在食品检测的实际应用中表现出操作简便、灵敏度高、速度快等特点,为食品检测技术的发展提供了有力的技术支持。本文主要介绍了纸片法的原理和纸片法在食品中微生物检测中的方法应用以及与平板计数法进行了对比研究。 前言: 食品安全问题越来越受到人们的重视,微生物对食品的污染问题也相应地备
微生物鉴定之培养基的制备程序
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。 (一)配料 按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。 (二)溶化
微生物鉴定之细菌的大小与形态简介
(一)的大小 细菌形体微小,通常以微米(μm;1μm=1/1000mm)为测量单位。须用放大数百至上千倍才能看到。一般球菌的直径约1μm,中等大小的杆菌长2~3μm,宽0.3~0.5μm。菌龄与环境等因素对菌体大小有影响。
空气、食品接触面微生物的检验方法、检验标准汇总(二)
3.2.2.2大肠菌群:(1)平板法:a) 以无菌操作,选择1~2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿(平行样),将VRBA培养基倾入平皿,每皿约15~20ml,充分混合。待琼脂凝固后,再覆盖一层培养基,约3-5 ml。b) 待琼脂凝固后,将平皿翻转,置36℃±1℃ 培养
微生物实验室常见20种培养基配方汇总(二)
十一、营养琼脂 成分: 蛋白胨10g 牛肉膏3g 氯化钠5g 琼脂15~20g 蒸馏水1000mL 制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,