转基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6） 为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒，处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。（7） 实验性饲养：将1-2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养，次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠，用磷酸缓冲液处理后24小时，其输卵管潮红。卵细胞应该处于单细胞期或未受孕状态，若处于双细胞期，则输精管切除未完全，雄性小鼠应进行再筛选。3．受精卵的收集（1）受精卵的采集：受精卵获得的方法分自然排卵和激素诱发排卵以及体外受精三种方法。本章对诱发排卵法给予介绍。诱发排卵法：雌性小鼠生后6—8周达到性成熟，性周期均为4—5 日，其排卵时间可用饲养室的明亮和黑暗进行调节，所以必须对饲养室的明暗规律进行准确严格地管理。性周期是卵泡刺激素和黄体生成素相互作用的结果，我们可以从外部给予这些激素诱发排卵。向成熟雌小鼠腹腔内注射5国际单位(IU)的孕马血清促性腺激素(PMSG)之后，约在48—54......阅读全文
转基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6） 为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒，处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。（7） 实验性饲养：将1-2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养，次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠，用磷酸缓冲液处理后24小时，其输卵管潮红。卵细胞应该处于单
转基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1） 点燃酒精灯，调节火焰到最佳。捏持玻璃毛细吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋转过火。2） 当吸管开始变软，快速撤离火焰，向外急剧扯拉使吸管变长，形成口径大约200?l的吸管。注意制备过程中离开火焰的时间以及扯拉的力度，尽量保证制备吸管的一致性。3） 为吸管评分，轻柔地折断吸管，辨别
转基因小鼠模型的建立(SOP)1
名称：转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词：转基因小鼠目的：在动物体研究转化基因原理：转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术，它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供
转基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小，体重在20-25克左右，严禁用低体重以及超重母鼠，若体重较低，其体能不足以维持妊娠，可能导致受精卵的重新吸收；若体重较重，麻醉剂被吸收入脂肪组织，降低麻醉效果，可能使手术困难，而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在，所以手术时切掉脂肪组织可能导
转基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．显微注射（1）导入DNA的制备：显微注射首先涉及导入DNA的制备，显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA，转基因所用载体是真核表达载体，即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠，必须对待导入DNA进行分离
转基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之处]（1）外源基因随机整合；（2）个别原核不清晰，需进行特殊处理；（3）需大型精密仪器，费用昂贵；（4）操作周期相对较长。（二）实验器材的准备1．输精管切除术用器材：弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培
转基因小鼠模型的建立(SOP)7
4） 如果未见DNA溶液流，则轻轻摩擦持样器钝缘，渐渐的打开注射器针头。针头重新进入油内确定DNA溶液流的存在。5） 移动持卵管回到受精卵下部。通过微分驱动水压控制系统使持卵管内产生温和的负压，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧，否则会使
转基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1） RNA的分离：根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单，且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。（2） Northern 印迹分析：该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。（3
转基因小鼠模型的建立(SOP)7
10） 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置将各器官重置于腹腔内。10）缝合切口，用小夹夹持皮肤。常用自动小夹代替缝线，这样可以避免小鼠啃嘶缝线，切口裂开。11）若进行双侧手术，则于另一侧子宫角重复上述操作。12）手术完成后，安置小鼠于清洁的笼中。麻醉状态下，小型哺乳动物无法有效维持机
显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程
实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞)，然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，通过分
小鼠脑出血模型的建立
实验材料小鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠仪器、耗材钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤1．固定小鼠 a．用绳子将已麻醉的小鼠俯卧（背朝上）固定在鼠板上，绳子用活结，这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b．用棉花将小鼠的头微微垫高，这样方便切开皮肤。 2．钻
小鼠脑出血模型的建立
实验材料 小鼠试剂、试剂盒 戊巴比妥钠仪器、耗材 钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤 1．固定小鼠 a．用绳子将已麻醉的小鼠俯卧（背朝上）固定在鼠板上，绳子用活结，这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b．用棉花将小鼠的头微微垫高，这样方便切开皮肤。
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立实验
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立可以：（1）建立一个能真实模拟临床胃癌的理想动物模型；（2）深人研究胃癌的转移机制和寻找新的治疗方法；（3）为人胃癌转移机理与抗转移治疗提供一个有价值的工具。皮下移植块原位移植法实验方法原理采用两种不同的肿瘤细胞株分别在昆明小鼠胃部原位建立胃癌模型。造模后对原位移植瘤的
哮喘致敏小鼠模型的建立及脾脏CD4+T细胞的分离（二）
1.4.2 肺组织标本留取 打开未经支气管肺泡灌洗的各组各 6 只小鼠胸腔 ,观察肺脏的大体改变 ,剪取部分肺组织 ,经10 %甲醛固定后切片 ,行 HE染色。1.5 CD4+T细胞的分离及鉴定1.5.1 CD4+T细胞的分离 打开小鼠腹腔 ,无菌取出脾脏放入冷 Hanks液中 ,将其
哮喘致敏小鼠模型的建立及脾脏CD4+T细胞的分离（一）
哮喘致敏小鼠模型的建立及脾脏 CD4+T细胞的分离Establishment of sensitized asthma model in mice and CD4+T lymphocyte isolation from spleens 程晓明,王长征,李淑平,钱桂生(第三军医大学附属新桥医院全军呼吸
最新RNAi技术可媲美转基因小鼠模型
基因编辑技术一直都是生命科学的热门研究领域，近来编辑领域出现了可与转基因小鼠技术相媲美的新RNAi干扰技术，该技术由洛克菲勒大学的研究人员研制出，在全基因组水平上首次对小鼠进行RNAi筛查研究，并在数月内发现了导致表皮肿瘤生长的基因，研究成果发表在《自然》期刊上。 RNAi技术筛查致病基因
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
实验方法原理 将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE 染色。 实验材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌细胞株8988 试剂、
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
实验方法原理 将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE 染色。实验材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌细胞株8988试剂、试剂盒 RPMI-1640 完全
人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验
人胰腺癌裸小鼠模型的建立用于：（1）胰腺癌的诊断；（2）胰腺癌治疗的研究；（3）观察胰腺癌细胞株在移植前后形态学是否发生变化。实验方法原理将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞
Cell:－CRISPR技术加快转基因小鼠模型构建
Whitehead研究所的研究人员利用基因调控系统CRISPR/Cas，仅需一步操作就可将报告基因和条件性等位基因转入小鼠基因组中。目前生成包含如此复杂工程等位基因的动物只需数周而非数年的时间，科学家可快速利用这些动物来构建疾病模型及研究基因功能。这一突破性的研究发表在《细胞》(Cell)杂志上
破译声音“疗伤”的密码－首次建立声音镇痛的小鼠模型
声音何以“疗伤”？年轻的科研人员创新思路，建立小鼠模型寻找答案。 日前，中国科学技术大学生命科学与医学部张智教授课题组、美国国立卫生研究院刘元渊教授课题组及安徽医科大学陶文娟副教授课题组合作，在国际学术期刊《科学》发表论文，揭示了声音镇痛的关键因素及神经机制。 早在1960年，《科学》杂志就
研究建立新的银屑病关节炎小鼠模型
众所周知，银屑病关节炎(PsA)是一种慢性炎症性疾病，可降低患者的机动性和灵活性，且PsA会增加II型糖尿病的风险。最近发表在FASEB杂志上的一项研究测试了一种新型的小鼠模型，这种模型有一天可能用于治疗人类皮肤病理学，以及关节侵蚀和椎间盘退变，从而改善PsA患者的生活质量。 为了进行这项研究
地塞米松诱导少肌性肥胖小鼠模型的建立与评价
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科研人员建立渐冻人症转基因猪模型
近日，记者在中科院广州生物医药与健康研究院获悉，该院研究员赖良学与中科院遗传与发育生物学研究所教授李晓江、澳大利亚蒙纳什大学教授肖志成、南方医科大学教授姜晓丹等联合攻关，成功培育出渐冻人症模型转基因猪。 渐冻人症是一种渐进和致命的神经退行性疾病，病人由于上、下运动神经元都退化和死亡并停止传
黄忠小组建立手足口病病毒感染小鼠模型
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我国科学家建立世界首例Tau转基因猴模型
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509520.shtm
Protein－－Cell：农科院团队建立新冠病毒小鼠感染模型
据中国农科院最新消息，该院哈尔滨兽医研究所研究员步志高团队研究建立了能同时在小鼠上呼吸道和下呼吸道稳定、有效复制的新冠病毒（COVID-19）感染模型。研究发现，自然情况下，小鼠对新冠病毒不易感，因而研发出对新冠病毒具有易感性的小鼠感染模型具有无可替代的价值，为深入探索新冠病毒的感染与免疫机制提
大鼠癫痫模型的建立
[摘要]目的:用氯化锂—匹鲁卡品制备Wistar 大鼠癫痫模型,探讨匹鲁卡品合适的用量及用法。方法: Wistar 大鼠腹腔注射氯化锂3mmol /kg , 24h 后,给予不同剂量的匹鲁卡品腹腔注射。结果:40mg/ kg 组和30mg/ kg 一次注入组的持续性癫痫大发作(SE) 出现率和亡
上海巴斯德所建立柯萨奇A16型病毒感染的小鼠模型
近期，国际学术期刊Antiviral Research 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所的研究论文A murine model of coxsackievirus A16 infection for anti-viral evaluation。 手足口病是一种常见的儿童传染性疾病。
人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验
实验方法原理 采用SCID 小鼠皮下接种107 细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤（DLBCL ）移植瘤模型，成瘤率70%，肿瘤的组织学表现类似于人DLBCL。实验材料 SPF 级SCID 小鼠试剂、试剂盒 RPMI 1640培养液青霉素谷氨酰胺链霉素CD19 APC抗体CD20 PE抗体