CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

试剂、试剂盒 十六烷基溴化吡啶 EDTA-Tris EDTA-Tris-DNA 溶液 乙醇-乙酸钠溶液 乙醇 乙酸钠 TE(pH7.6) 或适当的预杂交液 核酸和寡核苷酸 纯化的原料 仪器、耗材 干冰 乙醇浴 实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。十六烷基溴化吡啶(CPB)1%,m/V)将 1 gCPBW(sigma 公司)溶于 100 ml 水中,加热并用磁力......阅读全文

CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

            试剂、试剂盒 十六烷基溴化吡啶 EDTA-Tris EDTA-Tris-DNA 溶液 乙醇-乙酸钠溶液 乙醇 乙酸钠 TE(

CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

本方案介绍用阳离子去污剂——十六烧基溴化吡啶(cetylpyridinium bromide,CPB) 定量差异沉淀分离放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物。此方法最初是用于回收磷酸缓冲液从羟磷灰石柱洗脱的 DNA(Geek and Nasz 1983), 也可用于沉淀放射性标记核酸包括寡核苷

沉淀反应实验:环状沉淀反应

可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation)。由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。为了求得抗原与抗体的适宜比例,保证有足够的抗体,而且抗原分子小,具有较大的反应面积,因此操作上通常是稀释抗原,不稀释

液体内沉淀试验絮状沉淀试验

抗原抗体溶液在电解质的存在下结合,形成絮状沉淀物,这种絮状沉淀受抗原和抗体比例的直接影响,因此常用来作为测定抗原抗体反应最适比例的方法,常见类型有:(一)抗原稀释法 抗原进行一系列稀释与恒定浓度抗血清反应。(二)抗体稀释法 抗体进行一系列稀释与恒定浓度抗原反应。(三)方阵滴定法 即棋盘滴定法。

液体内沉淀试验:絮状沉淀试验

絮状沉淀试验是反映血清白蛋白和球蛋白改变的一类定性性质的肝功能试验。当肝脏有实质性病变时,所引起的蛋白质量与质的变化可以使浊度增加。正常值正常值0-6单位。临床意义异常结果:(1)、轻、中度增高,见于肝脓肿、肝癌。 (2)、显著增高,见于急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、脂肪肝等。 需要检查人群:肝功能不

沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法

沉淀DNA的实验可应用于分离DNA。实验方法原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比9

水质—阴离子洗涤剂的测定—电位滴定法原理

2 原理以PVC-AD电极为工作电极,饱和甘汞电极为参比电极,组成工作电池;以CPB为滴定剂对污染水体中阴离子洗涤剂进行电位滴定。在工作电极的能斯特响应区内,电池电势与阴离子洗涤剂浓度有如下关系:E=E0-Klg a阴式中:E——电池电势,mV;E0——其值与所用参比电极,接界电位,膜的内表面膜电位

继沉淀和共沉淀的基本性质

共沉淀是一种沉淀从溶液中析出时,引起某些可溶性物质一起沉淀的现象。例如,用氯化钡沉淀硫酸钡时,若溶液中有K+、Fe3+存在,在沉淀条件下本来是可溶性的硫酸钾和硫酸铁,也会有一小部分被硫酸钡沉淀夹带下来,作为杂质混在主沉淀中。继沉淀现象共沉淀现象的区别如下:1、继沉淀引入杂质的量,随沉淀在试液中放置时

环状沉淀试验

 环状沉淀试验是Ascoli于1902年建立的,其方法是:先将抗血清加入内径1.5~2mm小玻管中,约装1/3高度,再用细长滴管沿管壁叠加抗原溶液。因抗血清蛋白浓度高,比重较抗原大,所以两液交界处可形成清晰的界面。此处抗原抗体反应生成的沉淀在一定时间内不下沉。一般在室温放置10min至数小时,在两液

免疫共沉淀

实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3

免疫沉淀

免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。材料:上样buffer的配方(用前现配):2ul        1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul       distilled water2.5ul       2-mercaptoethanol12.5ul      10%SD

沉淀的作用

在经典的定性分析中,几乎一半以上的检出反应是沉淀反应。在定量分析中,它是重量法和沉淀滴定法的基础。沉淀反应也是常用的分离方法,既可将欲测组分分离出来,也可将其它共存的干扰组分沉淀除去。

尿沉淀检查

一、尿沉渣检查的内容  正常人尿中可有很少量红细胞,白细胞,上皮细胞,结晶,粘液丝,罕见有透明管型。  但如果有过多的血细胞和异常上皮细胞和管型,以及细菌,滴虫,肿瘤细胞和病毒包涵体,那就提示有肾脏及泌尿系统的疾病或损伤。  其中,管型可根据横径大小分为(1)狭窄型(为1-2个红细胞直径大小),(2

​沉淀的滤过

滤过是使沉淀和母液分开,与过量沉淀剂、共存组分或其他杂质分离,从而得到纯净的沉淀。若后续处理需要灼烧的沉淀,用定量滤纸过滤,这种滤纸已用HCl和HF处理,大部分无机物已被除去,每张滤纸灼烧后残留灰分小于0.2mg。根据沉淀的性质,选择疏密程度不同的定量滤纸。①一般无定形沉淀,应选用疏松的快速滤纸;②

沉淀重量法

  一. 沉淀重量法的基本步骤   例:沉淀形式与称量形式相同   沉淀形式与称量形式不同:   二. 沉淀重量法对沉淀的要求   (一)对沉淀形式的要求   1. S 要小:溶解损失小于称量误差;   2. 沉淀要纯净;   3. 沉淀易于过滤、洗涤(尽可能生成晶型 ¯ )。   

TCA沉淀方法

培养基上清直接电泳跑出来的条带经常很难看,可以TCA沉淀浓缩后跑电泳,一般表达量大于1mg/ml可以看到明显条带,这是我用的TCA沉淀方法,效果很好:1.菌液10000g,离心5分钟,收集表达上清。2.取500-1000ul上清于EP管中,加入1/9体积的100%TCA,颠倒10次混匀。3.样品置于

共沉淀分离法的常用沉淀剂

  当沉淀从溶液中析出时,溶液中某些可溶的组分被沉淀夹带而混杂于沉淀中,这种现象称为共沉淀现象。   在称量分析中,由于共沉淀现象,使沉淀不纯,影响分析结果的准确度,应设法消除。但在分离方法中,利用共沉淀现象可以分离和富集痕量组分。例如,海水中含UO22+量为2~3ug/L,不能直接用沉淀法分离

提高沉淀池沉淀效果的有效途径

沉淀池是污水处理工艺中使用最广泛的一种处理构筑物,如何提高沉淀池的去处效率和减小沉淀池容积,值得研究探讨。除了可以在沉淀区增设斜板(管)提高沉淀池的分离效果和处理能力外,其他方法还有:对污水进行曝气搅动以及回流部分活性污泥等。曝气搅动是利用气泡的搅动促使污水中的悬浮颗粒相互作用,产生自然絮凝。采用这

共沉淀分离法的常用沉淀剂

  当沉淀从溶液中析出时,溶液中某些可溶的组分被沉淀夹带而混杂于沉淀中,这种现象称为共沉淀现象。常用的沉淀剂又有哪些?  在称量分析中,由于共沉淀现象,使沉淀不纯,影响分析结果的准确度,应设法消除。但在分离方法中,利用共沉淀现象可以分离和富集痕量组分。例如,海水中含UO22+量为2~3ug/L,不能

沉淀条件的选择——根据沉淀类型及纯度影响因素

  (一)晶形沉淀的条件   1. 在适当稀的溶液中进行   降低 (Q-S)/S ,易得到粗晶形¯ 易洗涤、易过滤、吸附杂质量小;(但不宜过稀,否则被沉淀离子的损失量大。)   2. 在不断搅拌下进行,慢慢加入沉淀剂溶液   防止局部过浓,以免生成大量晶核。   3. 在热溶液中进行   增大 S

冷沉淀指的是什么?冷沉淀中含有什么物质?

冷沉淀指血浆的冷不溶物,是将新鲜冰冻血浆置于2~4℃融化,离心分离出的冷不溶的白色絮状沉淀而制成[医学'教育|网]。冷沉淀含有5种主要成分:①丰富的因子Ⅷ;②血管性血友病因子vWF;③纤维蛋白原;④因子XIII;④纤维结合蛋白。

蛋白质的沉淀方法及常见沉淀剂

名称  上清液 0.5ml血浆中不同沉淀剂使蛋白沉淀的% PH值 0.20.4 0.60.8 1.0 1.5  2.03.0   4.0 10%三氯醋酸 1.4-2.0 99.7 99.3 99.6 99.5 99.5 99.7 99.8 99.8 99.8 6%高氯酸 

苯芴酮溴代十六烷基吡啶分光光度法测定钢铁中微量钛

一、方法要点样品用酸溶解,加高锰酸钾溶液至微红色,加亚硝酸钠溶液还原至清亮,稀释于100mL容量瓶中,吸取于50mL容量瓶中,加抗坏血酸将Fe3+、V5+还原为低价以消除干扰,加苯芴酮-CPB显色,在波长535nm处测量吸光度。二、试剂与仪器(1)钛标准溶液:精确称取光谱纯二氧化钛0.1668g,加

免疫共沉淀-简介

蛋白质间相互作用研究方法:免疫共沉淀1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3.收集上清(约30 ml)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动免疫沉

环状沉淀反应实验

最简单、古老的一种沉淀试验。即在小口径试管内加入已知抗血清,沿管壁加入待检抗原于血清表面,若抗体与相应抗原发生反应,两层液面交界处出现白色环状沉淀,是为阳性,主要用于抗原的定性实验。实验方法原理当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。实验材

分级沉淀的概念

【分级沉淀】当溶液中含有两种或两种以上离子时,在滴加一种共同沉淀剂时,发生沉淀有先后的现象叫作分级沉淀或分步沉淀。

环状沉淀反应实验

实验方法原理 当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。实验材料 免疫血清试剂、试剂盒 抗原生理盐水仪器、耗材 小沉淀管毛细吸管橡皮头实验步骤 1.  取小沉淀管2只,以毛细吸管吸取抗人血清约0.2毫升,加入第一管,加时注意不能有气泡。2.

免疫沉淀实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 裂解缓冲液稀释缓冲液SDSTrisTSA仪器、耗材 转子离心机实验步骤 1.  表面标记或生物合成标记的细胞在裂解缓冲液中于4℃放置1 h 后,再于4℃3 000 g 离心10 min 除去细胞核,然后将所得上清在10000 g 离心1 min。 2.  一次性对上清进

沉淀反应的应用

  免疫沉淀反应(Immunoprecipitation)主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下,按适当比例所形成的可见沉淀物现象。据此现象设计的沉淀实验主要包括絮状沉淀试验,环状沉淀试验和凝胶内的沉淀试验。凝胶内的沉淀试验依所用的实验方法又可分为免疫扩

沉淀原的定义

中文名称沉淀原英文名称precipitinogen定  义参与沉淀反应的抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)