脱氧核酶切割RNA专一位点
实验材料 脱氧核酶 无RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 试剂、试剂盒 5X反应缓冲液 5X乙酸镁或氯化镁 无水乙醇 水饱和酚 实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5X 乙酸镁或氯化镁:300 mmol/L4) 无 RNA 酶的 DMA 酶5) 切割底物 RNA6) 无水乙醇7)......阅读全文
什么是核酶?
核酶(ribozyme)又叫核酸类酶、酶RNA、类酶RNA,是具有催化特定生物化学反应个功能个RNA分子,类似于蛋白质中个酶。核酶由Thomas R.Cech和Sidney Altman各自独立发现。核酶的功能很多,例如剪切、连接酶、磷酸酶和肽键转移酶等活性。
什么是核酶?
核酶(ribozyme)是具有催化功能的小分子RNA ,属于生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。
核酶的分类
自1982年以来,被发现的核酸类酶(R-酶)越来越多,对它的研究也越来越深入和广泛。但是由于历史不长,对于其分类和命名还没有统一的原则和规定。但根据酶催化反应的类型,区分为分子内催化R-酶和分子间催化R-酶,根据作用方式将R-酶分为3类:剪切酶、剪接酶和多功能酶。现将R-酶的初步分类简介如下:(1)
核酶的作用
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RNA
核酶的具体作用
1. 核苷酸转移作用。2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-
大核酶的定义
中文名称大核酶英文名称maxizyme定 义特指由小核酶聚合形成的一种人工二聚体核酶,可以形成同二聚体和异二聚体,使聚合物同时切割两个不同底物或同一底物的两个不同位点成为可能。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶的功能特点
与一般的反义RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。
核酶的应用介绍
①基因治疗;②特定RNA降解;③生物传感器;④功能基因组学;⑤基因发现。
核酶的特点介绍
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。 核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。 核酶一词用于描述具有催化
核酶的具体作用
1. 核苷酸转移作用。2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-
核酶的基本介绍
1982年,美国科学家T.Cech和他的同事在对“四膜虫编码rRNA前体的DNA序列含有间隔内含子序列”的研究中发现,自身剪接内含子的RNA具有催化功能,并因此获得了1989年诺贝尔化学奖。 为了与酶(enzyme)区分,Cech将它命名为ribozyme,其中文译名“核酶”已得到大多数人的认
小核酶的定义
中文名称小核酶英文名称minizyme定 义特指1992年麦考尔(McCall)合成的一种人工核酶,即锤头状核酶的茎Ⅱ(stem-Ⅱ)被短核苷酸链替代后得到的。这一变短的核酶仍保持原有的切割活性,并可形成更具活性的二聚体结构。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶的发现历史
1982年,美国科学家T.Cech和他的同事在对"四膜虫编码rRNA前体的DNA序列含有间隔内含子序列"的研究中发现,自身剪接内含子的RNA具有催化功能,并因此获得了1989年诺贝尔化学奖。为了与酶(enzyme)区分,Cech将它命名为ribozyme,其中文译名"核酶"已得到大多数人的认可。因为
核酶的应用介绍
随着对核酶的深入研究,已经认识到核酶在遗传病,肿瘤和病毒性疾病上的潜力。锤头状核酶,为白血病的基因治疗带来了新的希望。HIV的遗传信息来源于RNA。如果一个能专一识别HIV的RNA的核酶存在于被病毒感染的细胞内,那么它就能切断病毒的RNA,建立抵抗病毒入侵的防线。核酶还被设计成靶向丙型肝炎病毒、非典
核酶的研究历史
1982年,美国科学家T.Cech和他的同事在对“四膜虫编码rRNA前体的DNA序列含有间隔内含子序列”的研究中发现,自身剪接内含子的RNA具有催化功能,并因此获得了1989年诺贝尔化学奖。为了与酶(enzyme)区分,Cech将它命名为ribozyme,其中文译名“核酶”已得到大多数人的认可。因为
核酶的主要应用
①基因治疗;②特定RNA降解;③生物传感器;④功能基因组学;⑤基因发现。
核酶的功能特点
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。 核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RN
工程核酶的定义
中文名称工程核酶英文名称engineered ribozyme定 义利用生物化学和基因工程技术设计的核酶。以提高其在细胞内的活性及对底物的专一性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶的作用特点
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RNA
核酶的应用特点
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。 核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RN
核酶的主要类别
天然核酶主要有:(1)异体催化剪切型,如RNaseP;(2)自体催化的剪切型,如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA;(3)Group I 内含子自我剪接型,如四膜虫大核26S rRNA;(4)Group II 内含子自我剪接型;(5)核糖体中的rRNA人工筛选的核酶:可以对tRNA进行氨酰化的Flexi
核酶的发现历史
1967年,Carl Woese, Francis Crick和 Leslie Orgel 首次提出RNA可以作为催化剂,理由是RNA可以形成复杂的二级结构。1978年,耶鲁大学教授Sidney Altman正在研究细菌的tRNA分子的加工方式,他分离出一种叫做RNase P的酶,可以将前体tRNA
核酶有哪些分类?
核酶是具有催化活性的RNA,主要参加RNA的加工与成熟。天然核酶可分为四类: (1)异体催化剪切型,如RNaseP; (2)自体催化的剪切型,如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA; (3)第一组内含子自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA; (4)第二组内含子自我剪接型。利用反义技术研制的药
细胞化学基础核酶
科学家在研究RNA的转录后加工时发现某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,这些由活细胞合成、起催化作用的RNA称为核酶。许多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反应也具有专一性。已经阐明的天然核酶有锤头状核酶、发夹状核酶、I型内含子、Ⅱ型内含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基转移
核酶的功能特点
到目前为止发现的各种核酶有以下特点。 (1)核酶的化学本质为RNA或RNA片段。有些核糖核蛋白也有催化作用,但活性中心位于其蛋白质成分上,并不属于核酶,例如端粒酶。然而,如果核糖核蛋白的RNA含活性中心,则该RNA组分就是核酶,例如核糖核酸酶P分子中的M1RNA。(2)核酶的底物种类比较少,大多数是
核酶的功能特点
到目前为止发现的各种核酶有以下特点。(1)核酶的化学本质为RNA或RNA片段。有些核糖核蛋白也有催化作用,但活性中心位于其蛋白质成分上,并不属于核酶,例如端粒酶。然而,如果核糖核蛋白的RNA含活性中心,则该RNA组分就是核酶,例如核糖核酸酶P分子中的M1RNA。(2)核酶的底物种类比较少,大多数是自
顺式作用核酶的定义
中文名称顺式作用核酶英文名称cis-acting ribozyme定 义催化RNA链自我剪接的核酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
关于核酶的特点简介
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。 核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。 核酶一词用于描述具有催
核酶的临床意义
①核酶的发现和研究使我们对RNA的生理功能有了进一步的认识,即它既是遗传信息的载体,又是生物催化剂,兼有DNA和蛋白质两类生物大分子的功能。 ②核酶的发现动摇了所有生物催化剂都是蛋白质的传统观念。 ③核酶的发现对于了解生命进化过程具有重要意义,RNA或许是最早出现的生物大分子。
核酶的临床意义
①核酶的发现和研究使我们对RNA的生理功能有了进一步的认识,即它既是遗传信息的载体,又是生物催化剂,兼有DNA和蛋白质两类生物大分子的功能。 ②核酶的发现动摇了所有生物催化剂都是蛋白质的传统观念。 ③核酶的发现对于了解生命进化过程具有重要意义,RNA或许是最早出现的生物大分子。