体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TNT 快速超级混合液 T7TNTPCR 增强液 仪器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 离心机 水浴槽 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置 实验步骤 ......阅读全文
G蛋白耦联型受体简介
G蛋白耦联型受体是指受体和酶或离子通道之间的相互作用通过一种结合GTP的调节蛋白介导完成的。配体与受体结合后通过G蛋白间接作用于酶或离子通道，从而调节细胞的生理活动。 G蛋白耦联型受体为7次跨膜蛋白，因此亦有人将此类受体称为七次跨膜受体。受体本身不具备通道结构，也无酶活性，它是通过与脂质双层中
G蛋白耦联型受体简介
G蛋白耦联型受体为7次跨膜蛋白，因此亦有人将此类受体称为七次跨膜受体。受体本身不具备通道结构，也无酶活性，它是通过与脂质双层中以及膜内侧存在的包括G蛋白等一系列信号蛋白质分子之间级联式的复杂的相互作用来完成信号跨膜转导的，因此也称促代谢型受体。G蛋白耦联型受体包括多种神经递质、肽类激素和趋化因子的受
G蛋白耦联受体的分类
A类(或第一类，视紫红质样受体)B类(或第二类，分泌素受体家族)C类(或第三类，代谢型谷氨酸受体)D类(或第四类，真菌交配信息素受体)E类(或第五类，环腺苷酸受体)F类(或第六类，Frizzled/Smoothened家族)其中第一类即视紫红质样受体包含了绝大多数种类的G蛋白耦联受体。它被进一步分为
什么是G蛋白耦联型受体？
G蛋白耦联型受体是指受体和酶或离子通道之间的相互作用通过一种结合GTP的调节蛋白介导完成的。配体与受体结合后通过G蛋白间接作用于酶或离子通道，从而调节细胞的生理活动。
G蛋白耦联型受体的组成
受体受体在结构上均为单体蛋白，由约300~400个氨基酸残基组成，有一个由30-50个氨基酸组成的细胞外N-末端，接着在肽链中出现7个α螺旋的跨膜结构，每个疏水跨膜区段由20~25个氨基酸组成，但各区段之间由数目不等的氨基酸组成的环状结构连接，其中1-2，3-4，5-6环在胞内侧，2-3，4-5，6
耦联到抗体上的荧光团探针
荧光团探针的选择依赖于下面的重要标准： A. 仪器。比如，光源，滤片，检测系统。B. 多标记中对探针色彩区分程度的要求。例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明（TRITC）或者Cy3的区别明显。C. 要求的灵敏度。比如，Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针
G蛋白耦联型受体的组成介绍
受体 受体在结构上均为单体蛋白，由约300～400个氨基酸残基组成，有一个由30-50个氨基酸组成的细胞外N-末端，接着在肽链中出现7个α螺旋的跨膜结构，每个疏水跨膜区段由20～25个氨基酸组成，但各区段之间由数目不等的氨基酸组成的环状结构连接，其中1-2，3-4，5-6环在胞内侧，2-3，4
G蛋白耦联型受体的功能简介
G蛋白耦联型受体介导的信号转导可通过不同的通路产生不同的效应，但信号转导的基本模式大致相同，主要过程包括： （1）配体与受体结合； （2）受体活化G蛋白； （3）G蛋白激活或抑制下游效应分子； （4）效应分子改变细胞内第二信使的含量与分布； （5）第二信使作用于相应的靶分子，使之构象改
G蛋白耦联型受体的不同类型
（1）化学感受器中的G蛋白 气味分子与化学感受器中的G蛋白偶联型受体结合，可激活腺苷酸环化酶，产生cAMP，开启cAMP门控阳离子通道（cAMP-gated cation channel），引起钠离子内流，膜去极化，产生神经冲动，最终形成嗅觉或味觉。 （2）视觉感受器中的G蛋白 黑暗条件下
G蛋白耦联受体的信号转导机制
G蛋白通过与受体的耦联，在信息转导过程中常发挥着分子开关的作用。其跨膜信号转导一般分为以下几步：（1）当外部没有信号或没有受外部刺激时，受体不与配体结合，G蛋白处于关闭（失活）状态，以异源三聚体形式存在，即α亚基与GDP紧密结合，βγ亚基与α亚基、GDP的结合较为疏松；（2）当外部有信号时，G蛋白受
G蛋白耦联受体传导通路的研究展望
近年来，人们在G蛋白耦联受体传导通路的研究上取得了不少进展，但是，仍然存在很多机制上不清楚的地方，主要有以下方面：（1）GPCRs显然不仅仅是简单的开关装置，而是高度动态的结构，处于非活性和活性构象的平衡之中，那么GPCRs活化的具体机制是什么，还有对GPCRs的各种调节机制特别是受体的失敏和内吞机
厌氧氨氧化与砷还原耦联循环研究获进展
近日，广东省科学院生态环境与土壤研究所研究员孙蔚旻团队在厌氧氨氧化与砷还原耦联循环研究方面取得新进展。相关研究发表于Geochimica et Cosmochimica Acta。 该研究通过微宇宙培养证明了水稻土中确实存在厌氧氨氧化与砷还原的耦联循环过程（Asammox），hzsB和arrA
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（一）
液相色谱耦联Q Exactive 台式轨道阱质谱仪分析利妥昔单克隆抗体关键词单克隆抗体，完整蛋白质的质量测定，序列确定，蛋白质去卷积，自上而下的测序 目的优化液相色谱质谱工作流程，采用整体柱在线耦联Thermo Scientific Q Exactive 台式轨道阱质谱仪对单克隆抗体进行分析和表征。
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（三）
图 2. 抗体上常见的糖链结构的命名 图 3 显示的是用 250×0.2 mm 内径整体柱分析 20 ng 利妥昔抗体得到的一级质谱图。在 m/z 1800–5000 范围内采集的质谱图显示了大分子蛋白质的典型电荷分布。插图显示的是 m/z 3269 时，放大的最大丰度电荷态（z=+45)
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（四）
表 4 显示的是轻链、非糖基化重链和完整抗体的计算质量数，分别从轻链的 213 和重链的 451 位氨基酸开始逐步计算。两个蛋白序列都包含的 N- 末端谷氨酰胺应会被修饰为焦谷氨酸，这将导致质量数丢失 17.0265 Da。此外，重链中 C- 末端赖氨酸有可能被切掉，导致质量数丢失128.0
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（五）
表 5. 单糖的化学组成和分子量 表 6. 用于计算表 4 和表 5 分子量的元素的单同位素原子量和平均原子量 最初的计算是根据发表在 DrugBank 数据库【2】的序列进行的，然而计算结果与我们实验测得的质量数并不匹配。通过将 DrugBank 中的序列与之前文献发表过的序列【3】进行
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（六）
为了评价使用 250×0.2 mm PepSwift 整体柱时仪器的检测限，采集了一系列进样量的 LC/MS 样品。将 50pg-20ng 的完整抗体从最低浓度开始注入色谱柱（图 8）。在序列开始之前和各样品之间运行两针空白样品，以排除残留的影响。通过这种方法，我们发现完整抗体的最低检测限是
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（七）
图 11. 将利妥昔抗体还原、烷基化、胰蛋白酶切后，酶切后肽段的基峰色谱图。 图 12. 利妥昔单抗轻链和重链的氨基酸序列。黑色字母显示的氨基酸代表通过二级质谱图鉴定到的部分。绿色显示的序列是仅通过完整肽段一级全扫描数据鉴定到的。红色显示的是重链部分的两个氨基酸（AK），他们既不能用一级也
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TNT 快速超级混合液 T7TNTPCR 增强液仪器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 离心机 水浴槽 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置实验步骤 ―、材料与设备1) 无核酸酶污染的水。2)[35S] 标记的甲硫氧
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TN
液相色谱耦联Q－Exactive－台式轨道阱质谱仪分析利...（二）
其他实验均采用 Thermo ScientificTM NanoFlexTM 离子源进行，离子源上配置 15 cm 的 PicoTipR 喷雾针（New Objective，Woburn，USA；20 μm 内径，360 μm 外径，10 μm 针尖)，流速为 1 μL/min，电压为 1.
4.5－体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
TNT 耦联网织红细胞裂解物系统乂可以分为：TNTT7 系统、TNTSP6 系统和 TN 下 PCR 系统。其屮，TNTT7 系统可以从线状和环状 DNA 中翻译蛋白质，SP6 系统只能使用环状 DNA 进行翻译，而 PCR 模板可使用 TNTPCR 系统迸行翻译实验材料质粒 DNA 模板试剂、试剂
生物物理所等揭示G蛋白耦联受体的信号转导机制
9月8日，中国科学院生物物理研究所的王江云课题组和山东大学医学院的孙金鹏课题组应用最新的非天然氨基酸编码技术，揭示了G蛋白偶联受体重要的信号转导机制，相关文章发表在Nature communications上。 G蛋白偶联受体（GPCR）是药物研究的重要靶点，超过30%的临床处方药是直接作用在
细胞信号传导通路与受体耦联的G蛋白的结构与分类
G蛋白是一类与GTP或GDP结合的、具有GTP酶活性、位于细胞膜胞浆面的外周蛋白。它由三个亚基组成，分别是α亚基（45kD）、β亚基（35kD）、γ亚基（7kD）。总分子质量为100kD左右。G蛋白有两种构像，一种是以αβγ三聚体存在并与GDP结合，为非活化型；另一种构象是α亚基与GTP结合并导致β
方案5－利用－NanoLC－耦联－MS/MS－分析复杂蛋白质混合物实验
实验材料蛋白分部收集物试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）乙 腈（5%) 5%甲酸HPLC 溶液甲醇（HPLC级）仪器、耗材酒精灯二元泵或四元泵C18反相层析填料C18固相抽提移液吸头陶瓷划片熔融石英毛细管金线有刻度的玻璃毛细管带压力计的氦气罐高效液相色谱系统激光拉针器Nano-LC 离子源PEEK 微型
研究揭示翻译调控型Tbox核糖开关折叠与识别tRNA耦联的结构与动态机制
T-box核糖开关是一类位于革兰氏阳性细菌mRNA的 5'非翻译区的结构元件。它的长度通常在300核苷酸以下，可分为适配体结构域和表达平台结构域。T-box核糖开关通过其适配体结构域识别和结合特定的tRNA，并感知其3'末端的氨酰化状态，引发下游RNA元件构象状态的转变，进而在翻
细胞的基本功能
细胞膜的结构和物质转运动能膜结构的液态镶嵌模型，单纯扩散、膜蛋白介导的跨膜转运和主动转运的定义和基本原理细胞的跨膜信号转导G-蛋白耦联受体、离子受体和酶耦联受体介导的信号转导的主要途径细胞的兴奋性与生物电现象静息电位和动作电位的定义、波形和产生机制肌细胞的收缩神经-骨骼肌接头处兴奋的传递过程、骨
G蛋白偶联受体的分类
根据对人的基因组进行序列分析所得的结果，人们预测出了近千种G蛋白耦联受体的基因。这些G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型，分属其中的G蛋白耦联受体的基因序列之间没有同源关系。A类（或第一类，视紫红质样受体）B类（或第二类，分泌素受体家族）C类（或第三类，代谢型谷氨酸受体）D类（或第四类，真菌交配信息素
G蛋白偶联受体的分类介绍
根据对人的基因组进行序列分析所得的结果，人们预测出了近千种G蛋白耦联受体的基因。这些G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型，分属其中的G蛋白耦联受体的基因序列之间没有同源关系。 A类（或第一类，视紫红质样受体） B类（或第二类，分泌素受体家族） C类（或第三类，代谢型谷氨酸受体） D类（或第
G蛋白偶联受体的主要分类
根据对人的基因组进行序列分析所得的结果，人们预测出了近千种G蛋白耦联受体的基因。这些G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型，分属其中的G蛋白耦联受体的基因序列之间没有同源关系。A类（或第一类，视紫红质样受体）B类（或第二类，分泌素受体家族）C类（或第三类，代谢型谷氨酸受体）D类（或第四类，真菌交配信息素