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野生型杆状病毒的纯化实验

基本方案 实验材料 杆状病毒 试剂、试剂盒 TE 蛋白酶K N-十二烷基肌氨酸 苯酚 氯仿 异戊醇 乙醇 乙酸钠 仪器、耗材 培养瓶 锥形瓶 转子 离心机 聚苯乙烯管 实验步骤 ......阅读全文

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(一)

生命科学和生物技术的日新月异对疫苗的发展提供了新的契机:疫苗快速规模化生产、质量标准不断提高以及新技术的开发应用成为行业的技术发展趋势。 新型中空纤维膜过滤技术具有温和低剪切力、容尘量高、操作灵活、寿命长成本低、易于放大等优点,解决了病毒颗粒浓缩时易堵膜和对剪切力敏感易聚集两大技术难题,提供

病毒基础知识(2)

三、病毒学的发展历程病毒病害的病原研究阶段; 病毒化学和结构研究阶段。(一)病毒病害的病原研究阶段  自病毒发现直到上个世纪30年代初,病毒学研究主要集中在:分离和鉴定引起各种病毒性疾病的病毒;病毒对疾体所引起的特异性病理效应;病毒的传播方式和感染宿主范围;各种理化因子对病毒感染的影响等方面。  在

上海巴斯德所在艾滋病病毒I型疫苗研发中取得突破

  日前,国际知名杂志《病毒学杂志》(Journal of Virology)在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所周保罗研究组关于艾滋病病毒I型(HIV-1)疫苗的最新成果:一种基于果蝇S2细胞的新型HIV-1 病毒样颗粒(VLP)表达系统。这是世界上首次报道采用果蝇S2细胞表达系统制备HI

重组的果蝇 NAP-1 的表达和纯化实验

实验方法原理 实验材料 晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒 高滴度的 His-NAP-1 杆状病毒储液(Orbigen)磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP-1 纯化缓冲液 Ni-NTA牛血清白蛋白(BSA)标准 乙醇液氮仪器、耗材 离心机

重组的果蝇 NAP-1 的表达和纯化实验1

实验材料晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒高滴度的 His-NAP-1 杆状病毒储液(Orbigen)磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP-1 纯化缓冲液 Ni-NTA牛血清白蛋白(BSA)标准乙醇液氮仪器、耗材离心机Wheaton 杜恩斯

诺如病毒的实验室检查

诺如病毒是一组杯状病毒科的病毒,以前也称之为“诺瓦克样病毒”。诺如病毒感染影响胃和肠道,引起胃肠炎或“胃肠流感”。“胃肠流感”不同于流感病毒引起呼吸道疾病的流感。诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻,具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点,是引起非细菌性腹泻暴发的主要病因。诺如病毒感染性

诺如病毒的实验室检查

诺如病毒是一组杯状病毒科的病毒,以前也称之为“诺瓦克样病毒”。诺如病毒感染影响胃和肠道,引起胃肠炎或“胃肠流感”。“胃肠流感”不同于流感病毒引起呼吸道疾病的流感。   诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻,具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点,是引起非细菌性腹泻

KinExA分子与完整细胞相互作用系统的原理与应用(二)

结果表明,CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM,T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5,Kd与EL的95%置信区间均较窄,数据非常准确可信。 应用二、KinExA在高亲和力检测上应用对于抗肿瘤药市场,目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药

KinExA分子和细胞相互作用仪与SPR的技术对比(二)

四、案例案例一:完整细胞的相互作用检测<背景>:单克隆抗体XMetA是胰岛素受体(IR)变构部分的激动剂,其激活代谢Akt激酶信号通路,而对有丝分裂胞外信号调节激酶(ERK)信号通路几乎没有影响。为了研究这种选择性信号通路的性质,作者验证了XMetA对CHO细胞中IR,Akt和ERK的特

重组G蛋白偶联受体的纯化实验(一)

一、引言天然的整合膜蛋白的量并不充足。因此对其的结构测定和功能分析需要:①重组膜蛋白的生产系统;②能分离得到有活性的膜蛋白(而不是没有功能、折叠错误的膜蛋白)的纯化策略。表达并纯化原核和真核的膜蛋白在文献中都有报道。读者可以参考如Grisshammer 和Tate(1995;2003) 及Gri

重组G蛋白偶联受体的纯化实验

实验步骤 一、引言 天然的整合膜蛋白的量并不充足。因此对其的结构测定和功能分析需要:①重组膜蛋白的生产系统;②能分离得到有活性的膜蛋白(而不是没有功能、折叠错误的膜蛋白)的纯化策略。表达并纯化原核和真核的膜蛋白在文献中都有报道。读者

重组G蛋白偶联受体的纯化实验

纯化受体从概念上可以分成两步: 第一步用合适的去污剂将受体从膜中提取出来 (增溶); 第二步使用如常规的亲和标签、与该受体特异结合的配体层析柱、分子排阻色谱和其他方法纯化受体。最重要的是,必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分,因为很多 GPCR—旦被去

基于量子点的单分子荧光示踪技术揭示肌球蛋白马达的...

基于量子点的单分子荧光示踪技术揭示肌球蛋白马达的步进模式一个真核细胞中有近百个不同的分子马达,各自有不同的作用机制,分别与其承担的独特生理功能相适应。其中肌球蛋白是一个广泛存在的马达蛋白,在细胞内吞、蛋白分泌、囊泡运输、维持高尔基体形态等方面具有重要作用。日本大阪大学的Toshio Yanagi

蛋白质糖基化修饰在生命体中的作用

  治疗性重组蛋白或单克隆抗体是影响细胞、组织、器官乃至生命的外源性重组蛋白,在细胞内成熟过程中几乎均会发生蛋白质糖基化修饰,而糖基化修饰的质和量的差异,可能会影响相关重组蛋白表达水平、结构及功能。重组蛋白表达服务可以帮助研发人员研发高效、高质量的蛋白质。在生物体中50%以上的蛋白质存在糖基化现象,

外源基因在真核细胞中的表达系统

1. 真核生物表达的优越性和必要性① 真核生物具有转录后加工系统,可识别并删除基因中的内含子,剪切加工为成熟mRNA.②具备完善的翻译后加工系统,可进行糖基化、乙酰化等修饰,使蛋白形成正确的天然构型,因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天然状态,有利于其功能、生物活性的研究。③某些真核细胞可将基因表

生物农药的种类与应用

 1、生物农药的概念与种类  生物农药是从微生物、植物和动物体中提取的具有农药效应的物质。这类物质对人、牲畜、农作物比较安全,通常情况下一般不导致对农作物和环境的污染。根据药源,生物农药可分为微生物生物农药、植物生物农药和动物生物农药等类型。微生物农药包括真菌、细菌、放线菌、酵母菌和病毒等

Gateway技术:克隆、表达新方法

Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达一、一种更好的克隆方法Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体

基因组文库和cDNA文库的构建及筛选

刘芝华 中国医学科学院肿瘤研究所  分子肿瘤学国家重点实验室 概念: 基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体;cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。   基因组文库:来源于基因组DNA,反映基因

选择重组蛋白表达的合适方法(一)

一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或 低 量 表 达 . 缺 少 必要的翻译后 修 饰或不适当的修饰 。选 择 表

重组自身抗原在自身免疫疾病诊断产品开发和生产中缺陷

天然自身抗原与重组自身抗原比较 在自身免疫疾病诊断行业中,利用对应抗原对自身免疫疾病的检测是目前主流方法。目前市场中,用于检测产品开发的抗原原料主要分为重组表达和天然提取2个来源,但现阶段很多人对天然自身抗原和重组自身抗原在研发和生产中尤其是在自身免疫疾病检测的应用中的区别,并不清晰,虽然重组表达的

十二种无血清培养基资料及目录(二)

⑷X-VIVOTM无血清培养基X-VIVOTM无血清培养基理念是为细胞提供一个营养成分完全且平衡的环境。它不含任何外源生长因子,人造细胞增殖刺激因子,不明添加剂,任何蛋白激酶C刺激因子。适合于活化的人和鼠淋巴细胞的第二信号系统的研究。⑸UltraCHOTM培养基UltraCHOTM培养基最适于培养转

杂交瘤细胞和重组抗体

在过去的二十五年里,利用杂交瘤细胞生产了成千上万的鼠单克隆抗体。人们用同样的技术从转基因鼠中克隆人类的抗体,并设计了全长型抗体和重组片段,它们可以被用于多种诊断和治疗。而且如果他们能在哺乳动物细胞,牛奶及植物中表达,就可以大量获得。 一个世纪以前,Paul Ehrlich提出了著名的侧

十二种无血清培养基的相关资料(二)

⑺UltraMDCKTM培养基UltraMDCKTM 培养基是一种无血清限定培养剂,适于高/低平板密度培养MADIN-DABBY犬肾细胞(MDCK)。该培养基只添加了两种蛋白-重组的人胰岛素和牛转铁 蛋白,因此蛋白含量极低。经UltraMDCKTM培养基培养的MDCK细胞较在含血清基

生物质谱——蛋白质组学研究的肱股之臣

  分析测试网讯 2017年11月29日,由北京大学,首都科技条件平台主办,安特百科(北京)技术发展有限公司(分析测试百科网)协办的题为“生物质谱在蛋白质组学研究中的应用”的讲座在北京大学化学与分子工程学院化学楼A201报告厅举办,来自蛋白质行业的专家学者参与了此次讲座。北京大学分析测试中心、美国密

十二种无血清培养基的资料

㈠无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如清蛋白,纤连蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反应器剪切力,提

与时间赛跑!国内外企业/机构新冠病毒疫苗研发纪实

  过去5年间,全世界经历了多次病毒疫情的突然爆发,包括非洲埃博拉病毒疫情,美洲寨卡病毒疫情,中东呼吸综合征疫情和此次新型冠状病毒疫情。  与过历次疫情不同的是,借助先进的技术手段,此次疫情中我国研究团队得以快速分离出病毒并获得了新型冠状病毒的基因序列信息。1月12日,世界卫生组织宣布已收到中国分享