淋巴细胞的分离
实验方法原理 通过右旋糖酐促沉降作用去除红血细胞后,将枸橼酸或肝素抗凝的全血或血浆层加在致密的 Ficoll-Hypaque 层上面。离心后,大部分淋巴细胞位于 Ficoll-Hypaque 和血浆之间的界面。 实验材料 肝素或枸橼酸抗凝的血液样本 D-PBSA Ficoll-Hypaque 试剂、试剂盒 无血清培养液 仪器、耗材 带有钝头插管的注射器 塑料Pasteur吸管或移液......阅读全文
淋巴细胞的分离技术操作程序
(一)材料与试剂 1.淋巴细胞分层液有两种: (1)聚蔗糖—泛影葡胺液:聚蔗糖(polysucrose solution),商品名Ficoll,分子量400 000,多配制成40±1%(W/V)水溶液,也有干粉出售。应用时,用蒸馏水配制9%溶液。泛影葡胺溶液(Meglumi
淋巴细胞分离液的具体用法
取新鲜抗凝血lml,与注射用生理盐水1:1混匀后,小心加于2ml的细胞分离液之液面上,以600-800g离心(半径15cm水平转子)20-30分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为血浆层(含血小板)。第二层为环状乳白色淋巴细胞(单核/单个核细胞层)。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层(含
你知道淋巴细胞分离液可以分离哪些细胞吗?
有专业的小动物脾脏淋巴细胞分离出来液试剂盒。通常试剂盒构成:全血及机构封闭液150ml体细胞清洗液150ml实验试剂C100ml实验试剂F100ml使用说明1份。重庆市华雅干细胞技术是国内合资生产型经济实体。本公司主要生产和销售以生物工程糖类为主体,集有机,无机,生化等各类精细化学试剂生产企业。检
淋巴细胞分离液使用操作步骤
淋巴细胞分离液是一种用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细胞的密度差异,通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将淋巴细胞从人外周血或脐带血中分离出来。淋巴细胞分离液操作步骤是哪些?今天由重庆市华雅的小编给大家介绍下。 使用操作步骤: (1)
纯淋巴细胞群的采集及分离原则
1.纯淋巴细胞群的采集: 利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时,能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性,从单个核细胞悬液中除去单核细胞,从而获得纯淋巴细胞群。 主要的方法有: ①粘附贴壁法; ②吸附柱过滤法; ③磁铁吸引法。 2.淋巴细胞亚群的分离原则: 选择纯
淋巴细胞亚群的分离原则是什么
选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法,而选择性去除不要的细胞,仅留下所需的细胞为阴性选择法。 常用的方法包括: ①E花环沉降法; ②尼龙毛柱分离法; ③亲和板结合分离法; ④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。
T淋巴细胞的分离技术尼龙毛法
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛( Nylon Wool Fiber)。2.烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3.装填尼龙毛柱,一次性注射
人外周血B、T淋巴细胞的分离方法
目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。方法: 1. 在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。 2. 取肝素抗凝静脉血与等量Hank's液或RPMI1640充分混匀,用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。 3. 离心
T淋巴细胞分离技术的注意事项
1.此种分离法,T淋巴细胞也常有一部分被吸附,吸附的多少与尼龙毛的质量有关,与装柱的松紧也有关系。 2.此法的T淋巴细胞的回收率约20%~30%。 3.用过的尼龙毛可回收,以盐水洗涤,然后浸入0.1Mol/L的HCl中过夜,然后再同前法清洗。
从外周血淋巴细胞(PBls)中分离RNA
[器材和试剂]● 30m1Corex管,酸洗并硅化● 预冷离心机和吊桶式转头● Ficoll(Amersham Biosciences)● 冰冷磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.4● 裂解缓冲液:5mol/L单巯基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl,
人外周血淋巴细胞分离液怎么用
分离方法说明:取新鲜抗凝血1ml,与生理盐水1:1 混匀后,小心加于2ml细胞分离液之液面上;以400g(约1500转/分,半径15cm水平转子)离心20分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层:为血浆层。第二层:为环状乳白色淋巴细胞层。第三层:为透明分离液层。第四层:为红细胞层。收集第二层细胞
从PBMC中分离淋巴细胞的方法有哪些
从PBMC中分离淋巴细胞的方法有:(1)贴壁粘附法;(2)吸附柱过滤法;(3)磁铁吸引法;(4)Percoll分离液法。
哮喘大鼠模型的制作和T淋巴细胞的分离
大鼠哮喘模型的分组及建立实验大鼠分组:根据随机化原则,将24只雄性Wistar大鼠(体重190-250g) 按体重编号,采取随机排列表法分为以下4组:(1)正常对照组、(2)哮喘一周组(激发一周)、(3)哮喘两周组(激发二周)和(4)哮喘四周组(激发四周及以上)。哮喘模型的建立:第一天三组哮喘组大鼠
血液怎么分离出血浆、血清及淋巴细胞
取血后,静置1-2小时,置于离心机内以3000P/m离心15分钟,用移吸管吸出分离的血清(上层乳黄色的上清液),置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。从另外一份全血里,加抗凝剂,分离出淋巴细胞。
低速离心机在分离淋巴细胞中的应用
用Metrizozte-Ficoll法分离血液时,淋巴细胞和单核细胞在同一区带,但是单核细胞具有吞噬胶态铁颗粒的能力,使其密度明显增加,用梯度法可使这两种细胞获得分离。抗凝静脉血在低速离心机中以600g离心10分钟,分离出白细胞,大约1ml,与1ml胶态铁悬浮液混合,在37℃、摇动孵育30分钟,加入
离心机分离生物T淋巴细胞的技术介绍
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte Filters
纯淋巴细胞群的采集及分离原则有哪些?
1.纯淋巴细胞群的采集: 利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时,能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性,从单个核细胞悬液中除去单核细胞,从而获得纯淋巴细胞群。 主要的方法有: ①粘附贴壁法; ②吸附柱过滤法; ③磁铁吸引法。 2.淋巴细胞亚群的分离原则: 选择纯
密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理
密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理是:常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是1.077±0.001的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,_W水性高,平均分子量为400,000,当密度为1.2g/ml仍未超出正常生理
淋巴细胞分离液的原理及使用注意事项
淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异,借助离心产生的重力加速度,进行细胞的分离纯化的常用试剂。可用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞,适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞,在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 淋巴细胞分离液的原
从动物脾脏组织分离淋巴细胞应如何操作
取动物脾脏组织时,应注意取材的无菌操作.分离出脾脏组织,研磨后过200目筛网,保证所分离的细胞为单个细胞悬液.获得细胞悬液后应该使用相应的淋巴细胞分离液进一步分离单个核细胞.
为什么要从新鲜血液分离淋巴细胞
因为淋巴细胞属于白细胞,需要从血液中提取,而淋巴细胞寿命较短,所以需要新鲜的!
你知道淋巴细胞分离液的操作步骤吗?不懂进来看看吧!
淋巴细胞分离液可用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞,适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞,在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 淋巴细胞分离液操作步骤是哪些?今天由重庆市华雅的小编给大家介绍下。淋巴细胞分离液主要用于分离
淋巴细胞的简介
淋巴细胞的简介: (1)生理性增多:外周血淋巴细胞绝对值成人>4×109/L、儿童>7.2×109/L、4岁以下>9×109/L.见于儿童期淋巴细胞生理性增多。 (2)病理性增多:见于急性传染病(如风疹、流行性腮腺炎、传染性琳巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、百日咳等)、某些慢性感染(如结核病等
淋巴细胞的定义
淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞,由淋巴器官产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T淋巴细胞(又名T细胞)、B淋巴细胞(又名B细胞)和自然杀伤(NK)细胞。T细胞和B细胞都是抗原
淋巴细胞的特点
发挥体液免疫的功能。B细胞的细胞膜上有许多不同的标志,主要是表面抗原及表面受体。这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子。 T淋巴细胞亦可简称T细胞。源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。发挥细胞免疫及免疫调节等功能。
淋巴细胞的特征
淋巴细胞是无粒白细胞,从形态上看,血液中的所有淋巴细胞均相似,只有直径大小的区别。若是用免疫学方法来鉴.别,可发现淋巴细胞是不同功能、不同分化阶段的混合细胞群体。这个群体至少有四类功能不同的细胞,即(1)T淋巴细胞,占血液中淋巴细胞总数的75%左右;(2)B淋巴细胞,占血液中淋巴细胞总数的10%
淋巴细胞的检测
1.特异**敏淋巴细胞在溃疡性结肠炎、外周神经炎及实验性**反应性脑脊髓炎等疾病,可能与自身反应**敏淋巴细胞有关。虽然这些淋巴细胞在疾病中的确切作用要比自身抗体的作用更难证实,但相关性本身也具有一定参考价值。 检测致敏淋巴细胞可用器官特异性抗原作诱导剂,进行淋巴细胞转化试验或吞噬细胞移动抑制
淋巴细胞的简介
淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生,主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中,是机体免疫应答功能的重要细胞成分,是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者,是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵”。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、
淋巴细胞的特征
淋巴细胞描述:血液中主要是小淋巴细胞和一定数量的中淋巴细胞。小淋巴细胞核相对很大,细胞质极少。核内染色质多,染色较深。核圆形深染,核周围浅染,胞质蓝灰色。在光学显微镜下观察淋巴细胞 ,按直径不同区分为大(11~18微米)、中(7~11微米)、小(4~7微米)3种。周围血液中主要是中小型细胞。根据淋巴
淋巴细胞的分类
T淋巴细胞(又名T细胞)和B淋巴细胞(又名B细胞)都起源于 造血干细胞。T细胞随血循环到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,B细胞则在骨髓或腔上囊发育成熟。然后再随血循环到周围 淋巴器官,在各自既定的区域定居、繁殖。受抗原激活即分化增殖,产生效应细胞,行使其免疫功能。T淋巴细胞激活后,分化增殖形成多种具