细胞内细胞因子的流式细胞仪检测

简介 随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析( limiting dilution analysis , LDA )和单细胞 PCR ,应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及 mRNA 表达可以识别 Th1 和 Th2 细胞,此方法可获得较强的细胞内信号,但此方法工作量大、主观性强,难以进行大样本检测,且人肉眼识别能力有很大的局限性,而 ELISPOT 及单细胞 PCR 技术,技术性强、劳动强度大,难以进行广泛推广。随着多标......阅读全文

细胞内细胞因子的流式细胞仪检测

简介随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(limiting dilution analysis

细胞内细胞因子的流式细胞仪检测

简介 随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析( limiting dilution anal

细胞内细胞因子的检测

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激活的淋巴细胞内细胞因子的检测

简介细胞因子是可溶性蛋白,在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞因子可以调节细胞生长、分化以及一系列功能,并且介导正常与病理性免疫应答。细胞因子是具有效应及调节双重作用的独特蛋白。近来研究显示,细胞因子可以具有多重功能,作用于多个细胞亚群并可在不同亚群细胞表达。早期细胞因子表达与T细胞功能相关性

流式细胞仪检测细胞内因子

实验步骤基本方案  细胞内因子的荧光标记材 料辅 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 细胞材 料辅 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 细胞材 料辅 助 方 案 3 固定和 冻存 PBMC材 料辅 助 方 案 4 PBMC 的细胞表面标记材 料辅 助 方 案 5 用荧光标

流式细胞仪检测细胞内因子

实验步骤基本方案  细胞内因子的荧光标记材 料辅 助 方 案 I PM A 和 ionomyciii 激 活 T 细胞材 料辅 助 方 案 2 抗 原 活 化 T 细胞材 料辅 助 方 案 3 固定和 冻存 PBMC材 料辅 助 方 案 4 PBMC 的细胞表面标记材 料辅 助 方 案 5 用荧光标

细胞内细胞因子染色步骤

1.样本准备:1) 收集细胞。经刺激和阻断处理的细胞(具体处理方案请参考文献进行),加细胞染色Buffer(或含0.1%BSA的PBS)制成单细胞悬液,调整细胞浓度约为1×107/ml。2) 取100μl细胞/管(约1×106细胞),分别加到做好标记的流式管底部。2.固定:1) 如需要表面染色,选用

流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离分泌细胞因子细胞

实验步骤基本方案细胞因子分泌实验材 料冰冷的或 37°C 预温的培养液。例如,培养人细胞用含 1 0 % 人 A B 血浆或自身血清的 1640 完全培养液。培养小鼠细胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培养基抗原, 1〜10ug/m l 肽 或 1〜100ug/m l 蛋

如何用流式细胞仪检测细胞内的ROS

流式检测ROS的特异性比较差。一般来说,针对过氧化氢和超氧化物有荧光探针。加到细胞培养液后,细胞摄龋遇到ROS,可以发出荧光,上机检测可以比较各组之间荧光强度的变化从而代表ROS水平的不同。你这个图横坐标代表的是相对荧光强度,纵坐标代表的是细胞计数。 图的含义就是在每个荧光强度有多少细胞。 估计你用

如何用流式细胞仪检测细胞内的ROS

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如何用流式细胞仪检测细胞内的ROS

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用流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离

实验步骤基本方案细胞因子分泌实验材 料冰冷的或 37°C 预温的培养液。例如,培养人细胞用含 1 0 % 人 A B 血浆或自身血清的 1640 完全培养液。培养小鼠细胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培养基抗原, 1〜10ug/m l 肽 或 1〜100ug/m l 蛋

用流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离分泌细胞因...

用流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离 分泌细胞因子的细胞基本方案细胞因子分泌实验材 料冰冷的或 37°C 预温的培养液。例如,培养人细胞用含 1 0 % 人 A B 血浆或自身血清的 1640 完全培养液。培养小鼠细胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培养基抗原, 1〜10

细胞因子的检测

白介素2受体(IL-2R,CD25) γ干扰素(IFN-γ) α肿瘤坏死因子(TNF-α)             实验步骤

细胞因子的检测

随着免疫学理论研究的深入,发现的细胞因子日益增多,并在免疫应答的调节和效应中起着重要作用,其在体内水平的高低直接反映机体的免疫状况。细胞因子检测的方法主要分三类:①细胞生物学活性检测法。②免疫学标记技术,常用ELISA。③分子生物学方法,常用逆转录PCR检测细胞因子的mRNA转录的情况。现以生物活性

细胞因子的检测

白介素2受体(IL-2R,CD25)实验步骤展开γ干扰素(IFN-γ)实验步骤展开α肿瘤坏死因子(TNF-α)实验步骤展开

鉴定细胞产生的细胞因子等炎症介质的分析

各种激活类型的细胞可以分泌细胞因子,趋化因子和其他炎症介质,如穿孔素,粒酶免疫或炎症反应的一部分。如ELISA和BD?式微珠阵列(CBA)测量整个细胞群所产生的分泌蛋白的方法。与此相反,细胞内流式细胞仪允许于感兴趣的细胞群,表型鉴定的个别类型的细胞产生的细胞因子等炎症介质的分析。  流式细胞仪检测细

细胞因子的检测方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子

细胞因子的检测方法

  细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。   但

细胞因子的检测方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子

细胞因子的检测方法

细胞因子的检测方法细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。