流式细胞术应用|自然水体中病毒细菌区分
实验简介自然水体中病毒、细菌的含量通常可作为水质的评判指标。近年来,借助流式细胞仪对自然水样进行病毒、细菌的鉴别与计数已经成为很多科研工作者研究的热点。本实验用核酸染料 SYBR green I 对自然水样进行染色,借助 CytoFLEX 流式细胞仪检测,区分水体中所含的病毒与细菌,与传统的显微镜计数及平板菌落计数法等相比,具有速度快,操作简便,结果准确的优点。材料与方法▶ 试剂▶ 样品制备Sample Type自然水体SpeciesAge of specimen新鲜样本Prep Method1. 配置 Tris-EDTA buffer(TE,pH=7.5);2. 以 SYBR green I 染色的 TE 溶液 为对照设定阈值;3. 以 SYBR green I 染色的噬藻体界定病毒的大体位置,以 SYBR green I 染色的大肠杆菌界定细菌的大体位置;4. 检测 SYBR green I 染色的湖水样......阅读全文
流式细胞术应用-|-自然水体中病毒细菌区分
实验简介自然水体中病毒、细菌的含量通常可作为水质的评判指标。近年来,借助流式细胞仪对自然水样进行病毒、细菌的鉴别与计数已经成为很多科研工作者研究的热点。本实验用核酸染料 SYBR green I 对自然水样进行染色,借助 CytoFLEX 流式细胞仪检测,区分水体中所含的病毒与细菌,与传统的显微镜计
流式细胞术应用-|-病毒细菌藻类绝对计数
实验简介噬藻体是水体中常见的浮游病毒,具有控制有害藻华、调节水生态结构、以纳米尺度驱动全球生物地球化学循环、特别是碳循环的一类不可忽视的战略生物资源;异弯藻是水体中的常见藻类,在适宜的温度下会大量生长,曾在大连湾、胶州湾等曾多次形成赤潮,对异弯藻计数是水质检测中常见的检测项目。异弯藻富含叶绿素,叶绿
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤展
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在PNH诊断中的应用
实验步骤展开
流式细胞术在生殖医学中的应用
实验步骤展
流式细胞术在生殖医学中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在生殖医学中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在PNH诊断中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在临床检验中的应用
付海龙(蚌埠医学院研究生部)赵亚萍(解放军82医院检验科)流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学、流体力学、激光技术、电子计算机技术等高度结合和发展的结晶,是一种在功能水平上对单细胞或其他细胞粒子、抗原物质进行快速检测分析和分选的技术〔1〕。FCM
流式细胞术在环境检测中的应用
随着流式细胞术的发展,流式细胞仪越来越多的使用在环境相关的研究及检测中。相对于传统的平板法与显微计数法,流式细胞术具有快速、灵敏、精确并能进行多参数分析的特点,且在后期使用成本上具有一定的优势。自 1993 年流式细胞仪首次运用于活性污泥中微生物群落结构分析以来,该技术逐渐成为空气、土壤、水等环境中
流式细胞术的应用
(一)流式细胞术在细胞生物学中的应用流式细胞术最早被应用于生物学研究领域,就是生物细胞周期和动力学的分析。近年来,DNA倍体分析已经越来越广泛应用于临床和基础研究,发挥越来越重要的作用。1. 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断 良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞(DI>1),而恶性肿瘤则伴有相当数
细菌感染和病毒感染如何区分
细菌感染和病毒感染在临床当中的区别很明显,但是在现实生活中老百姓可能不太了解这两者的区别,因为它们的临床表现都差不多,如发烧、咳嗽、肺炎等。另外可以通过临床检查区分细菌感染和病毒感染,比如血常规检查,细菌感染大部分会出现血象升高,即白细胞升高、中性粒细胞升高,表明身体有炎症,这是细菌感染的一个最主要
流式细胞术在血液学中的应用
DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞
流式细胞术在免疫学中的应用
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是二十世纪70年代发展起来的,是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术,能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选,且能保持细胞及细胞器或微粒
流式细胞术的应用范围
随着对FCM研究的日益深入,其价值已经从科学研究走入了临床应用阶段,在我国临床医学领域里已有着广泛的应用。可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定,以及免疫学研究,并已开始用于细菌鉴定,病毒感染细胞的识别和艾滋病感染者T4、T8细胞的记数。 自70年代以来,随着流式细胞技术水平的不断提高
流式细胞术的应用特点
应用特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。
流式细胞术的临床应用
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种能够对单个细胞或生物微颗粒的生物学性质进行定量分析和分选的检测手段,具有快速、高精度、高准确性、多参数和高通量等优点,是目前先进的细胞定量分析技术之一。FCM能够快速分析单个细胞或粒子的多种特性,既可以定性,也可以定量,尤其适用于大量样品检
流式细胞术的应用介绍
流式细胞术在很多领域中都有应用,包括分子生物学、病理学、免疫学、植物学、和海洋生物学等[11]。在分子生物学中,它主要用于荧光标记的抗体。特异性的抗体与靶细胞上的抗原结合,能够通过流式细胞仪研究这些细胞的特别信息。这在医学中具有很广泛的应用,尤其是在器官移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、遗传学、精子分
流式细胞术在高等植物研究中的应用
流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于
流式细胞术在血液学中的应用(一)
DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞含有最
流式细胞术在血液学中的应用(六)
白细胞吞噬功能测定粒、单核-巨噬细胞是机体免疫反应和免疫调节细胞中的重要成员。它们不仅具有吞噬功能,吞噬外来的微生物、肿瘤细胞等,同时又分泌多种生物因子参于免疫反应,此外单核-巨噬细胞对抗原物质的摄取、修饰、递呈等作用,是淋巴细胞的免疫功能必不可少的。因此检测白细胞吞噬功能对了解机体免疫状况有重要意
流式细胞术在血液学中的应用(五)
红细胞疾病诊断 (一)网织红细胞测定 计数外周血中网织红细胞数量,对于评价骨髓红系造血及网织红细胞从骨髓到外周血的转送速率有重要意义。有核红细胞在成熟过程中,脱去细胞核后仍有少量RNA残留在细胞浆内,再经过约一天时间残留RNA完全消失,成为成熟红细胞。这种细胞浆内有残留RNA的红细胞称作网织
流式细胞术在血液学中的应用(二)
二、 流式细胞术在血液病学中应用(一)白血病的分类研究 B-cell ALL 1.TdT positive. 2.CD10 positive, except for progenitor B-cell ALL. 3.HLA-DR positive. 4
流式细胞术在血液学中的应用(四)
淋巴瘤免疫分型 目前淋巴瘤的分类方法已从LSG的形态学分类逐渐转变为REAL分类法, REAL分类法是以肿瘤发生源为基础的分类方法,在原来的形态学基础上加上免疫学分型后再加以分类,这种分类方法不仅能够推断肿瘤的发生源,对治疗也有指导意义。因此淋巴瘤的免疫分型越来越重要。如同白血病免疫分型一样,淋巴瘤
流式细胞术在血液学中的应用(七)
细胞凋亡研究细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡,在疾病发生、发展中有重要作用,因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多,应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。 细胞形态变化:通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化来观察细胞凋亡
流式细胞术在血液学中的应用(一)
一、流式细胞术在基础血液学中的应用(一)血细胞的计数和分类研究 1.红细胞的计数、分类及其功能的研究 (1)循环的红细胞总量的测定: 生物素—逆转抗生物素蛋白—FITC系统的特异性和流式细胞 仪(FCM)的敏感性结合起来,建立了FCM测定人红细胞总量的方法,此方法具有标本用量少,无
流式细胞术在血液学中的应用(八)
细胞分选流式细胞仪能够分选某一亚群细胞,分选纯度>95%。目前细胞分选主要用于研究,临床应用较少。血液学应用最多的是造血干细胞的研究,最近随着造血理论的深入研究关于造血干细胞究竟是否都是CD34+细胞出现一些争论,实验研究证明, CD34-造血干细胞较CD34+造血干细胞更具造血潜能,这些实验研究所