电子显微镜免疫细胞化学技术概述
第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术第一节 电子显微镜免疫细胞化学技术概述免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗体技术、铁蛋白抗铁蛋白复合物技术、蛋白A-铁蛋白标记技术、免疫酶技术及胶体金技术等。电子显微镜免疫细胞化学技术（以下简称免疫电镜技术技术）区别于免疫细胞化学和常规电镜技术主要在以下几方面：一、组织固定与取材在这方面的要求是即要保存良好的细胞超微结构，又要注意保持组织的抗原性。因此，选用固定剂不宜过强。常用的免疫电镜固定剂有多聚甲醛―戊二醛混合液和过碘酸-赖氨酸―多聚甲醛液（Periodate―Lysine �Paraformaldehyde简称PLP液）。也有采用B......阅读全文
酶免疫技术的概述
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法，是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展，应用不同标记物，根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷，而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型，对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技
分子印迹分离技术概述
分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子（印迹分子）完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理：当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点，通过聚合过程这种作用被记忆下来，当除去印迹分子后，聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点的空穴，这样的空穴将对印
概述标记的免疫技术
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标记，则在与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物
固相萃取技术概述
它利用分析物在不同介质中被吸附的能力差将标的物提纯，有效的将标的物于干扰组分分离，大大增强对分析物特别是痕量分析物的检出能力，提高了被测样品的回收率。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来，发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。
层析分离技术概述
一、层析分离技术原理：层析分离技术是利用混合物中各组份物理化学性质的差别（如分子吸引力、分子亲和力、分子形状、分子大小、分子极性和分配系数等），使各组分以不同的分配比例分布在固定相和流动相中，从而达到分离目的。层析分离技术常与离心机分离技术结合使用。二、层析分离技术发展历程：1903年利用层析分离技
标记免疫分析技术概述
一、概要 定义：应用广泛、先进的免疫分析技术，是生物活性物质分析方法的新领域；基本技术是将多种标记示踪技术和高度灵敏性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的分析技术。 特点：灵敏度高，特异性强，重复性好，准确性高，操作简便，易于自动化商品化。 发展：放射免疫分析，免疫放射分析，酶标记免疫分析，
免疫扩散技术概述
抗原与抗体成分的一种定性与半定量分析方法，通常采用半固态透明琼脂凝胶作为支持介质。置于孔中的抗原和抗体相向扩散，在两者浓度比例适当处相遇后如能结合形成复合物则形成沉淀线。分为单向扩散（single immunodiffusion）、放射状扩散（radial immunodiffusion）和双向扩散
核酸杂交技术的概述
DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼龙膜上，与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时，探针通过氢键与其互补的靶序列结合，洗去未结合的游离探针后，经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针。
真菌基本检验技术概述
真菌检验基本上可分为培养技术和非培养技术两大类。非培养技术又分为显微镜检查技术、生化免疫检查技术和分子生物学技术。前者是直接观察真菌形态，其中组织病理学检查为侵袭性真菌感染诊断的金标准；后者是检测真菌的抗原、抗体和核酸。这些技术的综合使用可大大地提高侵袭性真菌感染诊断的准确性。图1为常见的真菌检验技
层析技术概述（二）
分辨率： 由上式可见，Rs值越大，两种组分分离的越好。当Rs = 1时，两组分具有教好的分离，互相沾染约2%，即每种组分的纯度约为98%。当Rs=1.5时，两组分基本完全分开，每种组分的纯度可达到99.8%。如果两种组分的浓度相差较大时，尤其要求较高的分辨率。 为了提高分辨率Rs 的值，可采用以下方
标记免疫分析技术概述
一、概要 定义：应用广泛、先进的免疫分析技术，是生物活性物质分析方法的新领域；基本技术是将多种标记示踪技术和高度灵敏性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的分析技术。 特点：灵敏度高，特异性强，重复性好，准确性高，操作简便，易于自动化商品化。 发展：放射免疫分析，免疫放射分析，
酶免疫技术的概述
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法，是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展，应用不同标记物，根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷，而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型，对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技
激光超声检测技术概述
激光超声检测的原理是利用激光脉冲辐照材料表面，因热弹性效应产生应力脉冲，应力脉冲同时以纵波、横波和表面波等形式的超声波向试样内部或沿表面传播，通过超声波的反射、散射或衰减表征缺陷，从而获取工件信息和缺陷表征，比如工件厚度、内部及表面缺陷，材料参数等。 与目前广泛应用的超声检测技术相比，激光超声
固相萃取技术——概述
所谓萃取法，就是从样品中提取组分，传统的方法是液-液萃取法 ( LLE)，即用液体作为提取剂。固相萃取（Solid Phase Extraction, SPE） 是19世纪70年代后期发展起来的样品前处理技术。它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域 。 固相萃取（SPE）是利用
层析技术概述（四）
⑷ 洗脱当我们选定好洗脱液后，洗脱的方式可分为简单洗脱、分步洗脱和梯度洗脱三种。简单洗脱：柱子始终用同样的一种溶剂洗脱，直到层析分离过程结束为止。如果被分离物质对固定相的亲合力差异不大，其区带的洗脱时间间隔（或洗脱体积间隔）也不长，采用这种方法是适宜的。但选择的溶剂必须很合适方能使各组分的分配系数较
层析分离技术概述
一、层析分离技术原理：层析分离技术是利用混合物中各组份物理化学性质的差别（如分子吸引力、分子亲和力、分子形状、分子大小、分子极性和分配系数等），使各组分以不同的分配比例分布在固定相和流动相中，从而达到分离目的。层析分离技术常与离心机分离技术结合使用。二、层析分离技术发展历程：1903年利用层析分离技
基因敲除技术概述（三）
2.1.2.2 诱导性基因敲除法诱导性基因敲除也是以Cre/loxp 系统为基础，但却是利用控制Cre 表达的启动子的活性或所表达的Cre 酶活性具有可诱导的特点，通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre 基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性
Illumina－测序技术原理概述
基因的变异类型有多种（点击查看），对应的分子检测方法亦有多种，针对不同的需求，都有对应的理想检测方法，每个检测平台都有着自己的优势，比如：操作简单：PCR，ARMS-PCR，HRM等时间快速：ARMS-PCR，HRM等成本低：PCR，PCR-RFLP，MassARRAY等准确：Sanger等通量高：
基因敲除技术概述（二）
2.1.2条件性基因敲除法条件性基因敲除法可定义为将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段的一种特殊的基因敲除方法[2]。它实际上是在常规的基因敲除的基础上，利用重组酶Cre介导的位点特异性重组技术，在对小鼠基因修饰的时空范围上设置一个可调控的“按钮”，从而使对小鼠基因组的修
细胞破碎的技术概述
细胞破碎，细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易
基因敲除技术概述（一）
1．概述：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成
恒温核酸扩增技术概述
恒温核酸扩增技术是利用各种酶，引物，脱氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及缓冲液的混合物在同一温度下温浴一定时间，让不同的酶与DNA进行反应，从而达到特定DNA片段的扩增。与传统的PCR核酸扩增相比，恒温核酸扩增不需要在不同温度之间的转换，只要保持酶反应的最佳温度，37℃、42℃、56℃或6
DNA提取纯化技术概述
质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为核酸克隆和测序最常用的载体。质
医学真菌检验技术概述
医学真菌学检查是诊断真菌病的重要依据，随着真菌感染病例的日益增多，对实验室的诊断也提出了更高的要求。不论是患者浅部或深部感染诊断，几乎全依赖于临床标本的真菌学检查。特别是系统性真菌感染，其早期特异的诊断方法是挽救患者生命的关键，而病原真菌的形态结构十分多样，在不同条件下同一真菌
层析技术概述（一）
层析法又称色层分析法或色谱法（Chromatography），它是在1903-1906年由俄国植物学家M. Tswett首先系统提出来的。他将叶绿素的石油醚溶液通过CaCO3管柱，并继续以石油醚淋洗，由于CaCO3对叶绿素中各种色素的吸附能力不同，色素被逐渐分离，在管柱中出现了不同颜色的谱带或称
层析技术概述（三）
柱层析的基本装置及基本操作目前，最常用的层析类型是各种柱层析，下面就简述柱层析的基本装置及操作方法，薄层层析的装置和操作将在后面详细讨论。1. 柱层析的基本装置柱层析的基本装置示意图如图3－3 所示：2. 柱层析的基本操作柱层析的基本操作包括以下一些步骤：⑴ 装柱柱子装的质量好与差，是柱层析法能否成
精密干燥技术特点概述
干燥技术有很宽的应用领域，面对众多的产业、理化性质各不相同的物料、产品质量及其他方面千差万别的要求，干燥技术是一门跨行业、跨学科、具有实验科学性质的技术。通常，在干燥技术的开发及应用中需要具备三个方面的知识和技术。第一是需要了解被干燥物料的理化性质和产品的使用特点；第二是要熟悉传递工程的原理，即
分子印迹分离技术概述
分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子（印迹分子）完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理： 当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点，通过聚合过程这种作用被记忆下来，当除去印迹分子后，聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点
酶免疫技术的概述
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法，是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展，应用不同标记物，根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷，而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型，对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技
肿瘤早筛技术概述
一.肿瘤早筛意义重大，显著提升患者生存率肿瘤早筛是指用快速、简便的方法，从大量看起来健康、尚未出现症状的目标人群中筛选出极少数肿瘤高危群体，能够及早发现肿瘤，降低发病风险，尤其是发病率高、死亡率高、发展周期足够长的癌种，比如肺癌、胃癌、结直肠癌等。以结直肠癌为例，中国人群结直肠癌的5年生存率在I、I