免疫电镜胶体金标记法
第四节 免疫电镜胶体金标记法 金标法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时，在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色，不需加外进行染色。在电镜水平，金颗粒具有很高的电子密度，清晰可辨。因此，免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面，并取得了要喜的进展，解决了一些过去未能解决的问题，80年代以来似有取代免疫电镜PAP技术的趋势。胶体金标记抗体技术在电镜水平应用有许多优点：首先，手续不如PAP法烦琐，不需用H 2 O 2 等损伤微细结构的处理步骤，对微细结构的影响较少。其次，金颗粒具有很高的电子密度，在电镜下金颗粒清晰可辨，易于与其他免疫产物相区别。因此，金标法还可以和PAP法相结合进行双重或多重染色的超微结构定位。另外，利用不同直径的金颗粒标记不同的抗体，是研究突触小泡内神经递质共存的有力工......阅读全文
酶免疫电镜试剂
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基联苯胺)加入10mlTris－HCl缓冲液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制时，避光进行，
酶免疫电镜技术
（一） 原理 酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度，借助于电子显微镜观察，证明酶的存在，从而对抗原进行定位。（二）材料与试剂1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液 取5m
酶免疫电镜试剂
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基联苯胺)加入10mlTris－HCl缓冲液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制时，避光进行
免疫细胞电镜技术
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗
扫描免疫电镜技术
实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤，扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集
扫描免疫电镜技术
实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤，扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集
关于免疫胶体金标记技术的简介
免疫胶体金标记技术(immunologic colloidal gold signature，ICS) 胶体金是分散相粒子的金溶液，经凝聚法制成的金溶胶颗粒表面带有较多电荷，能吸附抗体形成金标记的抗体。用这种金标记抗体与组织或细胞标本中的抗原反应，借助显微镜观察颜色分布即可定位、定性测定组织或细
胶体金的稳定性因素及免疫胶体金贮存
胶体金有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性
免疫电镜技术关键的几个问题
免疫电镜技术关键的几个问题 免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体，能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置，已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长，操作程序烦锁，因此，要得到满意的免疫金染色切片，必须在关键环节上给予注意，以下我们就免疫电镜染色技术中的几
胶体金及金标检测技术研究进展
继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶）之后，一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique, ICG）逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物，利用抗原抗体特异性反应，对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来，该技术因其操作简
什么是胶体金法？胶体金法定义及分类
胶体金是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫
细胞免疫化学：免疫酶标技术
1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色
免疫金标记检测方法标准操作程序
【目的】 保证免疫金标技术检验准确性 【本SOP适用范围】 免疫金标技术 【原理】 氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒，颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥，使其保持一个比较稳定的胶体状态，故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和
免疫组化技术的原理、分类和优点介绍
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
免疫组化技术的原理、分类和优点
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
免疫组化技术的原理、分类和优点
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
免疫胶体金(Immune－colloidal－gold)基本原理和常用的免疫胶...
免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学
胶体金标记蛋白A技术（Protein－Agold－technique,－PAg法）2
(2)0、5mol／L，pH7.4 Tris-Hcl缓冲液：Tris，60.57g，1mol／L Hcl约420m1，调pH值至7.4，最后加双蒸水至1000m1，此为储备液。(3)0、05mo1／L Tris缓冲生理盐水：氯化钠8.5-9g；0.5mo1／L，pH7.4 Tris-Hcl缓冲液10
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的方法原理
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点： *方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。 *短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。 *
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成； (2)成本低，不需要特殊的仪器设备； (3)应用范围广，可适应多种检测条件； (4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本； (5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的应用特点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的使用优点
(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定