如何区分荧光定量PCR仪与普通PCR仪
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。 普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果,还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病,品种分子标记筛选,甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。 但是,某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量(血液乙肝病毒复制程度),特定基因的表达量(比如结合反转录做的RNA定量分析),某些基因在染色体组中拷贝数(以前往往使用southern blot技术)等等。荧光定量PRC一般不需要......阅读全文
实时荧光定量pcr仪的PCR优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
普通-PCR、实时荧光定量-PCR-和数字-PCR-对比分析
提起 PCR,在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳,无人不知无人不晓,其影响之深,应用之广可见一斑。 1985 年,美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应(PCR),实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而,采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR,由于
普通PCR、实时荧光定量PCR、数字PCR技术的功能区别
一、普通PCR技术 KARY MULLIS (1944.12.28-2019.8.7) Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction ,PCR),据说是载着女友开车的时候,忽然灵光一闪,想到了PCR原理(论开车的好处)
普通-PCR、实时荧光定量-PCR-和数字-PCR-对比分析
提起 PCR,在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳,无人不知无人不晓,其影响之深,应用之广可见一斑。 1985 年,美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应(PCR),实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而,采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR,由
普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析(二)
模板 DNA 量越多,荧光达到域值的循环数越少,即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系,通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,根据样品 Ct 值,就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点
普通-PCR、实时荧光定量-PCR-和数字-PCR-对比分析(一)
提起 PCR,在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳,无人不知无人不晓,其影响之深,应用之广可见一斑。1985 年,美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应(PCR),实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而,采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR,由于该酶不
荧光定量PCR分析仪
荧光定量PCR分析仪是一种用于生物学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2006年11月15日启用。 技术指标 热循环系统:新型半导体,96个样品孔,可以升级到96孔快速热循环样品基座 光学系统:5色激发光源,5色荧光滤光片和超低温CCD成像系统(包括:FAM™/SYBR® Green
实时荧光定量pcr仪优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
荧光定量PCR仪的应用
荧光定量PCR仪可用于医疗,新药研发,诊断检验试剂研发等领域。 在医疗方面,具体可用于病原体检测;产前诊断以防止各类遗传性疾病的发生;药物疗效考核,例如对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析显示:病毒量与某些药物的疗效关系;肿瘤基因检测。 在新药开发研究中,实时荧光定量PC
荧光定量PCR仪的选购
2003年非典型肺炎和2004年禽流感的爆发,使荧光定量PCR技术在临床检验中的应用前景大为提升。为了提升科研水平和检验水平,各单位争先恐后购人荧光定量PCR仪。如何选择更适合本单位实际情况的PCR仪,就摆在了许多科研人员的面前。针对上述疑问,结合各款PCR仪的特征,本人提出一些个人的看法。1 PC
荧光定量PCR仪工作原理
1 系统的组成和工作原理本系统由基本PCR部分、荧光检测部分和上位计算机部分等组成。基本PCR部分是该仪器的基础,包括加热丝、温度采集与处理等部分,它必须具有精确控温、快速升降温、温度场均一等PCR仪的基本要求,保证PCR过程的顺利完成。荧光检测部分包括激励光源、光电倍增管、信号采集与处理等部分。上
荧光定量PCR仪主要构造
qPCR仪包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件。常用的荧光激发方式有三种激光激光是纯粹的单色光,用来做荧光染料的激发光强度超级高而且基本上没有背景干扰,但激光光源的价格也和性能一样高高在上,市场上只有最高端的定量PCR设备才会使用激光光源,价格和性能都令我们绝大多数的普通用户高山仰止。卤钨灯相
荧光定量PCR仪的用途
1. 定量/定性基因表达分析; 2. 熔解曲线分析; 3. SNP基因分型; 4. microRNA分析; 5. 基因突变分析; 6. 质控图形分析; 7. PCR扩展效率计算; 8. HBV、HCV、HIV、HPV、SARS、H1N1、 AIDS 、CSF等各种疾病检测; 9.
荧光定量PCR仪的应用
荧光定量PCR仪可用于医疗,新药研发,诊断检验试剂研发等领域。 在医疗方面,具体可用于病原体检测;产前诊断以防止各类遗传性疾病的发生;药物疗效考核,例如对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析显示:病毒量与某些药物的疗效关系;肿瘤基因检测。 在新药开发研究中,实时荧光定量PCR
PCR仪梯度与普通区别
1、梯度pcr仪就是可以允许用户在退火步骤时选择同时进行不同的退火温度以筛选zui佳退火温度。以wealtec的SEDI G为例,96孔控温模块按照8x12排布,解链步骤设置完后,设置退火步骤时,可以选择“梯度步骤”,此时程序会允许你设置梯度温控范围,让12个纵列孔位在此步骤时以不同温度运行。之所以
梯度pcr仪与普通pcr仪有什么区别
梯度pcr仪就是可以允许用户在退火步骤时选择同时进行不同的退火温度以筛选最佳退火温度。以wealtec的SEDI G为例,96孔控温模块按照8x12排布,解链步骤设置完后,设置退火步骤时,可以选择“梯度步骤”,此时程序会允许你设置梯度温控范围,让12个纵列孔位在此步骤时以不同温度运行。之所以pcr仪
梯度pcr仪与普通pcr仪有什么区别
梯度pcr仪就是可以允许用户在退火步骤时选择同时进行不同的退火温度以筛选最佳退火温度。以wealtec的SEDI G为例,96孔控温模块按照8x12排布,解链步骤设置完后,设置退火步骤时,可以选择“梯度步骤”,此时程序会允许你设置梯度温控范围,让12个纵列孔位在此步骤时以不同温度运行。之所以pc
荧光定量pcr仪定量方法之绝对定量
在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。 使用标准曲线进行绝对定量 绝对定量是通
梯度PCR仪与普通PCR仪的区别是什么?
PCR仪是广泛应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等领域的一款仪器设备,在实验室中的应用频率很高,而随着科技的发展以及行业实际工作的需要,梯度PCR仪等开始出现,而用户在进行了解的时候,往往不知道梯度PCR仪与普通PCR仪的区别,因此给他们的选择带来了一定的困难,因此下面就来简单介绍一下
普通pcr引物设计和荧光定量pcr引物设计的区别
一、方法不同1、普通pcr引物设计:引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。2、荧光定量pcr引物设计:通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,标记跟踪PCR产物进行实时监测反应,利用与之相适应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度二、原理不同1、普通pcr引物设计:为了找到一对合适的核
普通的PCR仪
把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。
普通的PCR仪
把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。
实时荧光定量PCR仪的优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
荧光定量PCR检测仪特点
1.体积小,重量轻,易于携带。轻松满足外出实验的需求。 2.内置10寸高清电容屏PDA,触屏操作,简便快捷。 3.Marlow高品质Peltier制冷片,结合德国高端PT1000温度传感器以及电性电阻加热补偿边缘的温度控制模式,最大升温速度7℃,最大降温速度5℃,大大缩短实验时间。 4.整
关于实时荧光定量pcr仪简述
实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常
实时荧光定量PCR仪-采购要领!
目前购买荧光定量PCR仪系统,一般包括: 实时荧光定量PCR仪 +实时荧光定量PCR仪 开机检测试剂+通用电脑+自动分析软件 荧光定量PCR仪 组成:温控模块、光学系统(光源、检测器、光路传导) 采购要领 1 温控模块/Peltier: 普通的Peltier加热方式具有明显边
荧光定量PCR仪选择要点
光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资
什么是实时荧光定量PCR仪
实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常
实时荧光定量pcr仪技术原理
所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在 real-time 技术的发展过程中,两个重要的发现起着关键的作用:(1)在90年代早期,TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的
实时荧光定量pcr仪医疗应用
⑴ 病原体检测 目前,采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。 如:结核菌基因诊断的意