液相流动相知识

流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液,但是如何配制。选择配制的方法不同,分析结果特别是保留时间,是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液,水性溶剂也常用于缓冲液。常因资料上表示的内容和实际的配制方法不同,而产生流动相的差异,影响了色谱图和分析结果。一般来说,溶剂的混合按体积比(V/V)或重量比(W/W)进行。溶液的体积因温度而变化,所以按重量比混合可调制再现性较好的混合溶剂,但由于操作较麻烦,通常多用体积比混合。只要没有特别标明,就可按体积比进行混合,但在特殊情况下,如胺类粘度高的溶液混合时,有时用重量—体积比(W/V)的方法。液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:a.流动相对样品具有一定的......阅读全文

高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办

1、Dry Prime,呵呵,既然流动相都干了,那流路大概也干了进行dryprime的操作步骤如下1.轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.2.在灌注排液阀出口插上一支注射器,然后打开排液阀(反时针旋转半圈).不要将注射器固定在排液阀上,而要用手将其贴紧阀的出口.3.选择DryPrime,然

高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办

1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走

高效液相色谱流动相的几点注意事项

  高效液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。  一、 流动相溶剂的选择  1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求

液液分配色谱法流动相

液液分配色谱法流动相 :流动相与固定液应尽量不互溶,或者二者的极性相差越大越好。根据流动相与固定相极性的差别程度,可将液液色谱分为正相分配色谱(流动相极性小于固定相极性,极性小的先流出,适于强极性和中等极性组分分离)和反相分配色谱(流动相极性大于固定相极性,极性大的先流出,适于非极性或弱极性组分分离

高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气

脱气方式:在线脱气机脱气,前期流动超声波超声脱气;系统中气泡的产生:流动相本身存在,梯度淋洗混合后放出气泡;气泡的影响:存在于管路中,系统压力不稳定,实验结果有偏差;存在于单向阀中,易造成液体回流,流量不准确,甚至是不吸液;存在于检测器中,出现鬼峰,影响检测准确性。所以做液相对流动相的气泡和杂质要求

液相流动相可以将盐酸换成乙酸铵吗

HPLC中常用的缓冲盐就是醋酸铵或者磷酸盐等,无机酸一般很少用。但是用什么还是要取决于待分析物的性质。在使用缓冲盐后要确保将柱子中盐冲洗干净后再用有机相保存,不然有机盐会结晶出来,对柱子造成不可逆的损伤。

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱使用流动相时需要注意哪些问题

1.色谱柱中的流动相是否会会排干的问题:    不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相泵将溶剂瓶中的流动相吸干了HPLC系统由此而停止工作了这会损坏色谱柱吗?泵是否排出了塔中的所有流动相?色谱柱还能用吗事实上,如果泵吸收了溶剂瓶中的流动相,就不会对色谱柱造成损坏,即使泵

液相色谱流动相常用的添加剂有那些

离子对试剂:庚烷磺酸钠,表面活性剂:十六烷基三甲基溴化胺,甲酸调pH等

高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气

防止溶解在流动相中的气体因为压力和温度的变化释出来 液相色谱柱的分离。

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱对流动相选择的一般要求

液相色谱所采用的流动相通常为各种低沸点有机溶剂与水或缓冲溶液的混合物。为了保证色谱系统的分离过程可重复性,流动相所采用的溶剂必须具有较高的纯度和化学稳定性。从实用角度考虑,溶剂应价格低廉、容易购得且使用安全。对流动相选择的一般要求包括:  1 化学稳定性好,不与固定相和样品组分发生化学反应;  2 

选择液相色谱流动相时应考虑以下几个方面?

选择流动相时应考虑以下几个方面:1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含

简介高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求

  (1)流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。  (3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收

关于液相色谱流动相的一些问题

  流动相相当于液相的血液,可以想象对液相的重要程度。那么流动相都需要注意什么呢?  过滤溶剂  溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤,如果使用固体化学试剂(缓冲盐)配制流动相,过滤特别重要,不能让固体微粒污染泵,阻塞进样器和柱头过滤片。本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择(反光面朝上),

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

流动相出现问题,液相色谱图出现的问题

  液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

流动相脱气

流动相脱气对于避免HPLC系统出问题,顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如

在液固色谱中流动相选择

在液-固色谱中,选择流动相的基本原则是极性大的试样用极性较强的流动相,极性小的则用低极性流动相。为了获得合适的溶剂极性,常采用两种、三种或更多种不同极性的溶剂混合起来使用,如果样品组分的分配比k值范围很广则使用梯度洗脱

液相报错,流动相吸空了,怎么处理

1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走;4

流动相的特点和常见的流动相介绍

色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。

液相色谱柱基础知识

有关色谱柱的内容,我们做过打开色谱柱知识“魔法口袋”、如何选择液相色谱柱保护柱?、色谱柱的使用和维护12要点、你可能遇到的360°全景式色谱柱问题、色谱柱保养心得等内容,今天我们把有关色谱柱的相关知识进行梳理,打包奉上,以飨各位。今天推送的主要内容包括:11月23日周四液相色谱柱基本理论知识常用液相

制备液相色谱基础知识

制备液相色谱基础知识: 一、制备液相色谱理论发展简况  色谱法的分离原理是:溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层

制备液相色谱基础知识

 一、液相色谱理论发展简况  色谱法的分离原理是:溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。  色谱法最早是由俄

气液相色谱柱常用知识

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。常用色谱柱简介1.气相色谱毛细柱 (键合,聚二甲基硅氧烷) HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1

气液相色谱柱常用知识

  色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。  常用色谱柱简介  1.气相色谱毛细柱  (键合,聚二甲基硅氧烷)  HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB

所有可以用作液相色谱流动相的有机溶剂

常用,乙腈水正己烷脂肪醇(甲醇,异丙醇)氯代烷烃酰胺苯,烷基取代苯氯苯脂肪酮(丙酮等)

液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办

偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗