做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱柱头处。随着流动相中有机相比例的提高,洗脱能力不断增强,一开始富集的杂质被洗脱下来,流出色谱柱而进入检测器,从而形成鬼峰。2、流动相脱气不完全。当水和有机相在混合器中混合时,产生了气泡。3、操作问题。针对以上原因,给出的对策如下:原因1,主要有几种情况:1、试剂问题:a)有机试剂:甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单,杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广,所以当使用紫外检测器时,尤其是波长较低时,尽量使用乙腈作为有机相,用甲醇的话漂移太大。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高,一般用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。b......阅读全文
做HPLC分析时,柱压不稳定有什么原因
柱压的影响因素有很多:1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留,也会影响柱压稳定。4、密封片损坏,空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
大亚湾:与“鬼粒子”较量的日子
电瓶车在隧道里徐徐穿行,车上的人仿佛被这个阴暗潮湿、看不见尽头的迷宫震慑住了,一路默不作声。电瓶车孤独的马达声反射在周围的花岗岩上,演化成为一种延绵不绝的回响。 突然,一切戛然而止。在这座大山的腹地,海平面以下20米的地方,眼前出现了一个高达十几米的空旷大厅。就在一个月前,一项轰动全
液相色谱仪的选型(2.2)
2.停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新启动时往往会出现鬼峰;另一缺点是保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中,效果较好。
做HPLC分析时柱压不稳定的原因及解决办法
①泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; ②比例阀失效,更换比例阀即可; ③泵密封垫损坏,更换密封垫即可; ④溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; ⑤系统检漏,找出漏点,密封即可; ⑥梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
做液相时,为什么进的标品都没出峰
不出峰原因大概有几个一:确保检测器灯是否打开,灯能量是否达到更换的条件了二:方法问题。确认你的检测条件,波长是否满足你的实验要求。流动相的配比等三:工作站基线是否正常,有没有和检测器正确连接起来四:泵是否有漏液现象五:色谱柱是否适合你的实验要求,可以测试下柱效
做液相时,为什么进的标品都没出峰
不出峰原因大概有几个一:确保检测器灯是否打开,灯能量是否达到更换的条件了二:方法问题。确认你的检测条件,波长是否满足你的实验要求。流动相的配比等三:工作站基线是否正常,有没有和检测器正确连接起来四:泵是否有漏液现象五:色谱柱是否适合你的实验要求,可以测试下柱效
酒鬼酒确实有“鬼”
昨日,国家质量监督检验检疫总局挂出湖南省质量技术监督局最新发布的对酒鬼酒的检测结果,称50度酒鬼酒样品DBP(邻苯二甲酸酯类物质,俗称塑化剂)最高检出值为1.04mg/kg,已要求企业整改。酒鬼酒公司相关人士昨日对记者表示,企业正高度关注此事,正在召开紧急会议,接下来会有相关措施
血晶是个什么“鬼”?
血晶是什么鬼?想必从事检验医学工作的同仁都比较陌生,国内鲜有论述,图谱更是几乎查不到。唯一能查到的是在医学百科中的描述:血晶为棕黄色斜方形(对角相等且对边也相等,但边不全相等且角不是直角的四边形)结晶,见于胃肠道出血后的粪便内,不溶于氢氧化钾溶液,遇硝酸呈蓝色。然而终归无图无真相,我是不见棺材不落泪
做-HPLC-分析时,柱压不稳定,原因何在-如何解决
原因可能有: 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; 比例阀失效,更换比例阀即可。 泵密封垫损坏,更换密封垫即可。 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; 系统检漏,找出漏点,密封即可。 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
反相液相色谱仪分析中乙腈与甲醇的区别
反相液相色谱仪分析中乙腈与甲醇的区别:一、价格:乙腈价格高,特别是HPLC级乙腈价格很高。二、吸光度:HPLC级乙腈和甲醇吸收光谱中,HPLC级乙腈吸收zui小(特别是在短波长上)。所谓HPLC级是除去具有UV吸收的杂质,在规定波长上,吸光度在规格值以内,噪声小。在进行UV短波长的高灵敏度分析时,H
高效液相色谱的日常维修保养规则
鬼峰产生的缘由是多种多样的,依据自己的经历以及文献报道,将缘由归结为以下几个方面: 1、活动相、样品稀释液、仪器或是容器中存在杂质,当梯度开端时由于有机相比例不高,洗脱才能不强,杂质在色谱柱柱头富集,随着活动相比例变化,洗脱才能加强,富集的杂质被洗脱,从而构成鬼峰。 2、活动相脱气不
高效液相色谱的日常维修保养规则
鬼峰产生的缘由是多种多样的,依据自己的经历以及文献报道,将缘由归结为以下几个方面: 1、活动相、样品稀释液、仪器或是容器中存在杂质,当梯度开端时由于有机相比例不高,洗脱才能不强,杂质在色谱柱柱头富集,随着活动相比例变化,洗脱才能加强,富集的杂质被洗脱,从而构成鬼峰。 2、活动相脱气不
做荧光时为什么会有锐利散射峰,而且是尖峰
因为激发光子会被样品散射到所有的方向上去,包括荧光检测器的方向。 这样,在收集到的荧光光谱上也能看到固定频率的(被散射的)激发光源的光子(频率或能量)。
用钨灯做光源的液相色谱仪(HPLC)时使用时-注意的问题
液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器,在细胞生物学、生物医学、环境化学中常常采用,而在液相色谱仪设计方案中常见灯源有氘灯和一部分小量钨灯,用钨灯做灯源的高效率液相色谱仪(HPLC)时,必须注意什么问题呢? 1、重视钨灯电源
水质对-HPLC-分析的影响
简介: 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时,在流动相准备阶段,色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎,所以水质是非常重要的。在洗脱液中,中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移,柱效可能会阻塞,导致分辨率降低,峰拖尾。大量实验表明,水中的有机物可能极大地影响液相色谱
减少HPLC分析中的纯水干扰
图1. 图4.带空心过滤器的 Barnstead-Nanopure-UV 试剂级纯水机与某一类似纯水机所得基线的比较(经用8升水预冲洗)。无论是质谱分析、气相色谱还是高效液相色谱,几乎没有一种分析方法可以不用纯水能够进行的。本文讨论了以下几个问题:水的纯度如何影响HPLC,水中有机物的污
eLife:wtf!基因在搞什么鬼?
Stowers医学研究所和Fred Hutchinson癌症研究中心的研究人员合作,鉴定了一种前所未闻的遗传生存策略,简直就像江湖小说。 wtf基因是自私基因,意味着该基因存在的唯一目的就是生存和传播。具体讲到wtf4,它是减数分裂驱赶(meiotic drive genes)自私基因。它干扰
eLife:wtf!基因在搞什么鬼?
wtf基因是自私基因,意味着该基因存在的唯一目的就是生存和传播。具体讲到wtf4,它是减数分裂驱赶(meiotic drive genes)自私基因。它干扰减数分裂(细胞分裂形式之一,生产被称为配子的性细胞,如卵子和精子)过程。 配子只含有一半染色体(且不重复),产生配子的细胞则含有全部染色体
什么是“鬼带”?如何处理?
“鬼带”就是在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时,常会出现在泳道顶端(有时在浓缩胶中)的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀,主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性,致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合,聚合成大分子,其分子量要比目标条带大,有时不能进入分离胶。但它却于目标条带有相
用乙腈做流动相出峰很快是什么原因
更正一下,只有反相色谱是这样。反相色谱的流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,洗脱能力减小;流动相极性减小,它的洗脱能力就增大。一般来说,出峰顺序是极性大的先出峰,极性小的后出峰。因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。反相色谱柱水的极性是最大的,甲醇乙腈的
用乙腈做流动相出峰很快是什么原因
更正一下,只有反相色谱是这样。反相色谱的流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,洗脱能力减小;流动相极性减小,它的洗脱能力就增大。一般来说,出峰顺序是极性大的先出峰,极性小的后出峰。因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。反相色谱柱水的极性是最大的,甲醇乙腈的
气相色谱仪在不出峰时应该怎么做
气相色谱仪,将分析样品在进样口中气化后,由载气带入色谱柱,通过对预检测混合物中组分有不同保留性能的色谱柱,使各组分分离,依次导入检测器,以得到各组分的检测信号。按照导入检测器的先后次序,经过对比,可以区别出是什么组分,根据峰高度或峰面积可以计算出各组分含量。 气相色谱仪发现进样不出峰时,首先要考虑
用乙腈做流动相出峰很快是什么原因
更正一下,只有反相色谱是这样。反相色谱的流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,洗脱能力减小;流动相极性减小,它的洗脱能力就增大。一般来说,出峰顺序是极性大的先出峰,极性小的后出峰。因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。反相色谱柱水的极性是最大的,甲醇乙腈的
做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍
1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等楼主,你这
做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍
1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等
做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍
1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等
用乙腈做流动相出峰很快是什么原因
更正一下,只有反相色谱是这样。反相色谱的流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,洗脱能力减小;流动相极性减小,它的洗脱能力就增大。一般来说,出峰顺序是极性大的先出峰,极性小的后出峰。因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。反相色谱柱水的极性是最大的,甲醇乙腈的
北京吉天:做中国自主知识产权的科学仪器
四次获得BCEIA金奖,三次CISILE自主创新金奖,两次CISILE自主创新银奖;国内少数从事高端实验室分析仪器且拥有核心自主知识产权的企业,产品在国内外具有明显的竞争优势。这就是北京吉天仪器有限公司(以下简称“北京吉天”)。北京吉天是如何取得如此不凡的
反相HPLC平衡柱子时每换一次流动相都会出峰
基线的稳定只是相对稳定的流动相,所以这是很正常的。
支原体是细胞的“吸血鬼”吗?
支原体是一大群微生物,有150多个物种,它们共同特点是大小介于细菌和病毒之间,无细胞壁,形态呈高度多形性,可为圆形、丝状或梨形。因而它们也被归为柔膜体。支原体直径仅有0.1~0.3μm,并且变形能力大,故能通过滤菌器。支原体与其他细菌不同之处还在于其胞膜中含有胆固醇或其他甾醇,这种特性使支原体膜更具