做HPLC的“鬼峰”知识

鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱柱头处。随着流动相中有机相比例的提高,洗脱能力不断增强,一开始富集的杂质被洗脱下来,流出色谱柱而进入检测器,从而形成鬼峰。2、流动相脱气不完全。当水和有机相在混合器中混合时,产生了气泡。3、操作问题。针对以上原因,给出的对策如下:原因1,主要有几种情况:1、试剂问题:a)有机试剂:甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单,杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广,所以当使用紫外检测器时,尤其是波长较低时,尽量使用乙腈作为有机相,用甲醇的话漂移太大。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高,一般用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。b......阅读全文

气相检测峰纯度怎么做

气相色谱仪检测峰纯度需要做内标。即:用已知的待测样品先做出不同浓度的5个点, 然后用浓度和积分面积做图, 求出对应的直线。 直线斜率就是校正因子。将实际得到的色谱面积, 乘以这个因子, 就是纯度。。

气相检测峰纯度怎么做

气相色谱仪检测峰纯度需要做内标。即:用已知的待测样品先做出不同浓度的5个点, 然后用浓度和积分面积做图, 求出对应的直线。 直线斜率就是校正因子。将实际得到的色谱面积, 乘以这个因子, 就是纯度。。

色谱分析仪器中出现鬼峰可能是试剂有问题

色谱分析仪器中出现鬼峰可能是试剂有问题,更多分析仪器维修保养知识请查看仪器无忧网维修保养笔记。总体有三个原因:a) 有机溶剂甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单,杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广,所以当使用紫外检测器时,尤其是波长较低时,尽量使用乙腈作为有机相,用甲醇的话漂移太大。而用作

HPLC中峰的相对保留时间是怎么计算的

正常的,证明第二种流动相的柱效更好,计算一下分离度,也就是R可以知道分离度更好。是否有利于谱图的观察可以通过计算分离度得到,分离度越大越好,一般超过1.5就认为完全分离。柱效通过理论踏板数表示,表明你的柱子的对这个样品的分离能力。分离度R表明你的柱子对这两种样品的分离能力。

HPLC色谱峰一个峰分为二个是什么原因造成的

1.预柱脏了或者.柱子脏了2.柱头塌陷3.目标物质分解了如果你这种情况是你第一次开发方法就这样,有可能是你流动相不合适啊,比如用酸性流动相分离含氮类化合物,就可能出双峰啊,一个峰为游离,另一峰为盐形式,如果你以前分离正常,只是现在又问题,就如我上面所说的。

HPLC中的加样回收率试验怎么做

回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物,经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法,绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物,经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来,而不是同

做HPLC分析时,柱压不稳定,原因何在

1. 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理;2. 比例阀失效,更换比例阀即可;3. 泵密封垫损坏,更换密封垫即可;4. 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;5. 系统检漏,找出漏点,密封即可;6. 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。

制备液相让峰提前出怎么做

  发现问题  XX月XX日早上,小A上班后,调出昨天下午上机(液相)的XX品种时候,发现已经在进第二个成分的对照品的第四针,但是对照品2的3针都没有出峰,且对照品2是昨天新称量的。  原因分析  以下是原因分析的经过:  1:初探究竟:初略的看了下图谱,从对照品2的第一针开始出现了问题,没有峰,且

峰面积重现性故障排除小知识

  1.进样口污染,这是较为常见的原因。样品当中的高沸点污染物,由于在现有气相色谱条件下无法汽化,且随着进样次数的增加,在进样口中逐渐累积,导致进样口受到污染。这种污染不仅会增加本底噪音,而且由于污染物可能与样品当中部分高活性目标化合物相互作用,而导致该化合物峰形变差或者峰面积变小。所以去活的衬管和

HPLC分析样品时出现倒峰是怎么回事

最主要是和你的样品有关,再者就是和你的流动相有关。比如说样品溶剂用的不是乙腈,有时出再这样的问题,再者是你的流动相和你的样品本身问题,有一些盐类也经常这样我们遇到这样的问题多是更换一下溶剂,不行再调整流动相,还不行就把波长调高就可以了,这在做HPLC时也很正常。

做HPLC分析时,你遇到过溶剂效应现象吗?

做过HPLC的朋友都知道一句话:用流动相溶解样品(等度洗脱),或者是用初始流动相比例溶解样品(梯度洗脱)。为什么要这么做呢?我们先来看一个列子:当用100%的乙腈来溶解样品上机时,峰1出现分叉、展宽,峰2未分叉。当换成用流动相来溶解样品时,峰1和峰2的峰形都不分叉,峰形较好。是什么原因导致这种现象发

做液相出现倒峰是怎么回事

第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动

做液相出现倒峰是怎么回事

问题太简略了点,只好来个“拉网大搜捕”:第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池

做液相出现倒峰是怎么回事

第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动

做液相出现倒峰是怎么回事

第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动

做液相出现倒峰是怎么回事

问题太简略了点,只好来个“拉网大搜捕”:第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池

做液相出现倒峰是怎么回事

第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动

做液相出现倒峰是怎么回事

第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动

做液相出现倒峰是怎么回事

问题太简略了点,只好来个“拉网大搜捕”:第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常;第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相;第三,如果是紫外检测器(mwd,ordad),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长;第四,如果是紫外检测器,流量池

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去

做气相色谱时,出峰时基线不是水平的

1 、漏气2、柱子不干净,、3、 工作站中你的坐标轴设置不合理,导致平时看起来平滑的基线在极小的坐标轴中显示锯齿状;4、 载气压力不稳;先检查软件界面的设定,在检查气体的压力,将柱温升高到柱子的温度上限以下10度左右,走上十几或几十分钟,如果还是那样,就可能是漏气了

做气相色谱时,出峰时基线不是水平的

1 、漏气2、柱子不干净,、3、 工作站中你的坐标轴设置不合理,导致平时看起来平滑的基线在极小的坐标轴中显示锯齿状;4、 载气压力不稳;先检查软件界面的设定,在检查气体的压力,将柱温升高到柱子的温度上限以下10度左右,走上十几或几十分钟,如果还是那样,就可能是漏气了

揭密“鬼兰”进化之谜

部分真菌异养紫金舌唇兰(a)和完全真菌异养广东舌唇兰(b)    受访者供图兰花给人的印象是典雅高洁的,一盆在室,芳香四溢。但是,有一种兰花却一辈子都生长的地底下,犹如鬼魅一般,只有开花的时候才会伸出地面,被人们称为“鬼兰”。更为神奇的是,这种兰花与其他植物不同,它们不需要叶子、根和阳光也照样能够生

科学让“鬼”无处可藏

  世界上有不少人相信鬼的存在。其实,大多数“见鬼”经历都是可以用科学来解释的。你所害怕的“鬼”,往往只是一种错觉。  1. 电磁场  加拿大神经学家迈克尔·波辛格花了几十年研究电磁场对于“见鬼”的影响后做出了一个假设,那就是人在意识层面察觉不到的脉冲磁场可以通过引发大脑颞叶的异常活动,让人们感觉屋

实验室分析仪器气质联用鬼峰出现原因分析及处理方法

气质出现鬼峰似乎也是一个常见的问题,平时遇到这种情况一般认为是色谱柱污染,老化色谱柱,十有八九能解决。不能解决的话,更换衬管,色谱柱柱前端切去一部分,一般就没有问题了。 可是这次的鬼峰,特别诡异,两个方法都没有任何效果,而且现象和以前也不太一样...... 进行调谐,发现其他条件都一样,但峰数有时是

做HPLC分析时,柱压不稳定有什么原因

柱压的影响因素有很多:1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留,也会影响柱压稳定。4、密封片损坏,空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的。