HPLC组成

HPLC由溶剂输送系统(脱气机、高压泵等)、进样系统(定量泵、六通阀、定量环、进样针等)、分离系统(色谱柱等)、检测系统(检测器等)、记录及数据处理系统。高压输液泵:将流动相在高压下连续不断地送入液路系统,具有有足够的压力,输出流量恒定、可调,输出压力平稳,泵室体积小,泵体抗腐蚀、耐酸等特点。压力平稳、流速恒定是HPLC系统稳定、重现性良好的前提条件,多数的HPLC故障、色谱数据异常均会表现出压力异常,如偏高、偏低、波动大等,在日常使用中需要特别关注压力变化。在线脱气机:四元低压系统属于泵前混合,由于在常压下混合,极易产生气泡,必须配有在线脱气机,并要求流动相使用前进行脱气,流动相脱气得目的如下:使色谱泵输液均匀准确,减小脉动。提高保留时间和色谱峰面积的重现性。防止气泡引起尖峰。使基线稳定,提高信噪比。降低溶剂的紫外吸收本底。减少死体积。 防止填料氧化。进样系统:分为手动进样系统和自动进样系统, 主要由定量环、六通阀、......阅读全文

基于温度梯度的HPLC分析——温度梯度淋洗的HPLC方法

在近年来所开发的一系列液相色谱方法中,温度梯度淋洗方法有着独特的应用,尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱(HPLC)的方法开发中,原则上都是采用反复试验法来建立的,实验室用户根据自己的经验来改变一

HPLC基础知识教程(七)

 几种检测器的主要性能全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射信号吸光度荧光强度电流离子流强度散射光强噪音10-510-310-9线性范围105104105宽选择性是是是否否流速影响无无有无温度影响小小大小

HPLC的故障及处理(二)

(五) 鬼峰1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗。2.样品中未知物 处理样品。3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)。4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂。5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水。(六) 基线

HPLC基础知识教程(十一)

全屏显示表格硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有机溶剂++++++++++适用pH范围++++++++抗膨胀/收缩++++++++耐压+++++++++表面化学性质+++++++++效能+++++++注:+++好 ++一般 +差

HPLC保留时间快速变化现象

1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合

HPLC基础知识教程(八)

全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13<10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7<1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无

hplc级是什么意思

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶

HPLC-System-features-stackable,-modular-design

Product News Network,  March 25, 2005  Finnigan™ Surveyor Plus provides PDA detection for high-throughput sample processing environments. It feature

HPLC对流动相的要求

① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动

HPLC日常维护有哪些步骤

  高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。  高效液相色谱(HPLC)的日常维护有哪些呢?  1.高效液相级色谱醇,

关于HPLC的流动相问题

  1)PH值特别重要:一般C18柱PH小于3时,容易损坏色谱柱,但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。  2) 注意选择试剂的截止波长:如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。  3)流速:流速要适当,否则影响峰形、浪费溶剂,一般常规

HPLC基础知识教程(四)

  III.HPLC系统  HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还

VE中苯并芘的HPLC检测

苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物,是一种强致癌物,在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前,维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料,因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标,本方法

HPLC组分的快速冻干法

  分析测试百科网讯 Genevac的系列3 HT蒸发器的快速冻干功能是为了提供一种快速、高通量可以替代冷冻干燥的HPLC纯化组分的方法而开发的。  传统的蒸发去溶剂方法,例如水和乙腈,通常会因为溶剂与样品的相互作用而形成胶状或油状物质。采用系列3 HT蒸发器的LyoSpeed™快速冻干技术,使得制

过滤与HPLC还有这关系

在日常生活中你是不是经常看到这些... 生活用水的净水器 早起的纯纯的豆浆 最美的男医生(身上的过滤器) 等等如此这些 那么 今天,咱们分享的主题就是膜分离。 膜分离其主要分类有反渗透、微滤、超滤、纳滤扩散渗析、电渗析、气体分离、

HPLC部分问题解答

1、除了流速外,还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下,减少保留时间或缩短分析时间的

HPLC级叔丁基甲醚促销

   货号:CAEQ-4-018397-4000   HPLC级叔丁基甲醚   规格:4L   报价:540元   促销价:整箱起订432元/瓶,4瓶/箱   促销时间:2011年5月3日至2011年5月31日   高效液相色谱法已经在产品检测、研发以及药物质量控制和环境

HPLC基础知识教程(一)

  I.概论  一、液相色谱理论发展简况  色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法

离子色谱和HPLC的区别

  从色谱原理上分类,离子色谱属液相色谱的一种,但由于离子色谱与普通高效液相色谱在结构和分析对象上有一些差异,一般作为独立的一个色谱大类考虑。离子色谱与高效液相色谱的差别主要体现在仪器结构和应用范围两个方面。  1)在仪器结构方面:离子色谱和高效液相色谱均有溶剂输送系统、进样系统、检测系统和信号记录

HPLC基础知识教程(十)

  一、基质(担体)  HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少

HPLC基础知识教程(十四)

  V.HPLC应用  一、样品测定  1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱

HPLC基础知识教程(十二)

  二、化学键合固定相  将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。  1.键合相的性质  目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷

液相色谱(HPLC)入门(四)

高效液相色谱分离模式总的来说,化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是:· 极性· 电荷· 分子大小首先,让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式:正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部,决定了其特殊性质和可预测

HPLC常见故障排除小贴士

  高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。  鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛,因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC,对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余,才能在运行故障的时候即使解决问题,提高工作效率。

HPLC的维护与使用注意

  HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势,在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。   主要部件介绍   输液系统   输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线

HPLC固定相及应用范围

名称    别名       功能基团   正相  反相  离子对  应用 Silica                      -OH            √                          非极性和中等极性以及非离子性有机化合物(HPLC固定相及应用范围(液相配件:高效液相

HPLC的酸清洗和钝化

  HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。  •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。可能

液相色谱(HPLC)入门(五)

正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极

HPLC对流动相的要求

① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动

液相色谱(HPLC)入门(一)

什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料,粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶