LAMP(环介导等温扩增)技术
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Res杂志上公开了一种新的基因诊断技术,即LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),中文名为“环介导等温扩增反应”,受到了世卫组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注,短短几年,该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中,在这次甲型H1N1流感事件中,日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广,LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中,并得到了欧美......阅读全文
LAMP原理及引物设计与实例
1.LAMP引物的设计LAMP引物的设计主要是针对靶基因的六个不同的区域,基于靶基因3' 端的F3c、F2c和Flc区以及5' 端的Bl、B2和B3区等6个不同的位点设计4种引物。FIP(Forward Inner Primer):上游内部引物,由F2区和F1C区域组成,F2区与靶基
食品微生物检验新技术
摘要:食品安全是全球面临的难题和巨大挑战,不仅影响着人们的健康与生活,还关系着社会的稳定。本文初步介绍了几种食品检测中微生物检验的新技术,希望为从事食品检验工作的人员提供帮助。 《中华人民共和国食品安全法》中定义食品安全是指食品无毒、无害,符合应当有的营养要求,对人体健康不造成任何急性、亚急
新一代CRISPR技术实现SARSCoV2高灵敏度即时检测
新冠病毒检测对于控制疾病传播、及早诊断治疗具有重要意义。荧光定量PCR由于高灵敏度和特异性成为了新冠病毒检测的金标准。由于设备昂贵、操作繁琐,荧光定量PCR技术很难用于现场即时检测。近些年来,也开发出了重组酶扩增(RPA)、环介导等温扩增(LAMP)、DNA纳米传感器等快速检测方法。然而假阳性问题制
长崎大学成功研制新冠检测系统-LAMP基因扩增上“热搜”
目前,新型冠状病毒感染(COVID-19)已成为世界各地的威胁,作为全球公共卫生的首要议题,需要尽快采取措施。 但是在医疗领域,如今日本的新型冠状病毒快速检测方法还没有确立完成。 但是最近也有一个好消息。 3月19日,长崎大学研究团队宣布:长崎大学与佳能医疗系统株式会社共同开发的新型冠状病
从唾液中检测到寨卡病毒
近日,美国宾夕法尼亚大学(Upenn)的科学家们开发出了一种低成本的3D打印设备可以快速检测寨卡(Zika)病毒。 据悉这个3D打印的检测装置只有一个苏打水罐大小,成本仅2美元,而且无需用电,也不用专业技术人员操作。患者只需提供一份唾液样本。当遗传分析检测到病毒存在时,装置中可变色的燃料将
中国检科院研发抗体检测试剂盒助力非洲猪瘟疫情防控
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒感染引起猪的一种急性、烈性、高度接触性传染病,家猪感染后死亡率接近100%,病毒发生扩散后难以根除。2018年我国发现首例非洲猪瘟,疫情导致猪肉价格急剧上涨,目前已造成超过千亿人民币的经济损失,对民生经济和生
新的智能手机夹可以检测血液样本中的寨卡病毒
从COVID-19大流行的情况看,快速、简单、准确和敏感的检测方法对检测病毒病原体和控制传染病传播至关重要。不幸的是,基于实验室的方法通常需要训练有素的人员和复杂的程序。在一项新研究中,伊利诺伊大学香槟分校(University of Illinois Urbana-Champaign)的研究人员联
我国动植物检疫性疫病的分子检测技术取得显著进展
国家“863计划”现代农业技术领域在动植物检疫性疫病的分子检测技术取得突破,开发出一批适用于口岸检疫和野外诊断的快速、特异、灵敏检测技术产品,研究成果获得2007年教育部科技进步一等奖。 研制出动物水泡性疾病分子鉴别检测试剂盒,并进行了验证应用。该试剂盒适合于水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、猪水泡病病
LAMP方法通过微波照射检测疟原虫
图片:Blockthermostat BT 200微波照射是有前景的平台,一套程序通过微波照射从人血和疟原虫体内快速可靠地提取核酸。虽然血液涂片的显微镜检仍被视为诊断疟疾感染的金标准,但是显微镜检常检测不到低密度感染,且要求高度技巧。德国蒂宾根大学的科学家与刚果共和国的同行合作收集了严重恶性疟原虫感
“分子诊断万花筒”——新型双向置换荧光探针
随着化学合成核酸技术的不断发展,利用核酸探针进行相关研究已成为当今生物和医学领域常用分子生物学技术之一。核酸荧光探针则是对特定的核酸探针进行荧光基团标记,通过记录荧光信号的变化来分析和检测对应目标分子的一种核酸探针形式。作为最常用的信号转导媒介,核酸荧光探针具备分析灵敏度高、检测手段简单和对生物分子
农科院技术团队告诉你如何20分钟鉴定鳕鱼真假?
近日,中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所研究员陈爱亮团队,通过环介导等温扩增(LAMP)技术,仅需20分钟,便可实现多品种鳕鱼和掺假油鱼的精准快速可视化鉴定。该成果发表于Aquaculture。 鳕鱼是目前市场上常见的食用鱼类之一,然而在所有水产品中,最混乱的就是鳕鱼市场,也是近年来一
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术,采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中,该探针被掺入到双链扩增产物中,由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开,从而释放荧光,用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率,耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
金黄色葡萄球菌快速检测方法的研究进展
金黄色葡萄球菌属革兰氏阳性球菌,广泛分布于空气、水、土壤、饲料中,也存在于人、动物的体表、鼻咽喉及肠道,属于人兽共患病原菌。其中,金黄色葡萄球菌致病力最强,除引起皮肤组织及器官化脓炎症外,所产生的毒素污染食物,导致食物中毒。近年来,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件颇多。据美国疾控中心报道,由金黄色
溶酶体lamp1和lamp2区别
溶酶体lamp1和lamp2区别功能和结构。1、溶酶体LAMP1和LAMP2是两种不同的抗原识别分子,它们都是在单细胞真菌中发现的。LAMP1是一个具有多种功能的抗原识别分子,而LAMP2是一种特异性的抗原识别分子。LAMP1的多种功能包括参与细胞凋亡、膜吞噬、炎症反应和免疫抑制等,而LAMP2主要
科学家研制出便携式多疾病核酸检测设备
近日,哈尔滨工业大学任玉坤教授团队研发出用于同时检测多种疾病的紧凑型高灵敏度光热RT-LAMP芯片,并基于此研制出便携式多疾病核酸检测设备,将助力30分钟内实现疾病的现场精准快速诊断。相关成果发表于《科学进展》并入选期刊亮点推荐论文。便携式检测设备。哈尔滨工业大学供图开发具有即时诊断功能的便携式疾病
为阴道毛滴虫开发的LAMP测定
一种环介导恒温扩增(LAMP)测定产品靶向重复的DNA品种特异的序列,其设计用途是检测阴道毛滴虫。阴道毛滴虫感染最常用的诊断化验有:湿片显微镜检、培养和最近使用生殖道拭子、尿液样本或精液样本的核酸扩增检验(NAAT)。培养是诊断阴道毛滴虫的金标准,尽管其灵敏度可能和显微镜检一样低,需要至少孵育一周且
看完这些你就知道什么是生物气溶胶采样器了
生物气溶胶采样器是一款旋风式采样器,利用颗粒物在气流中高速旋转与反向运动中的惯性作用,在旋风中离心与沉降,将大气中的颗粒物采集到液体中。 本仪器可地点固定长期采样,可用于重点场所生物安保采样、战场生物战剂采样;可广泛用于疾病预防控制、环境保护、制药、发酵工业、食品工业、生物洁净以及公共场所等环
生物气溶胶采样器介绍
生物气溶胶采样器是一款旋风式采样器,利用颗粒物在气流中高速旋转与反向运动中的惯性作用,在旋风中离心与沉降,将大气中的颗粒物采集到液体中。 本仪器可地点固定长期采样,可用于重点场所生物安保采样、战场生物战剂采样;可广泛用于疾病预防控制、环境保护、制药、发酵工业、食品工业、生物洁净以及公共场所等
基因扩增技术的技术特点
特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水
感染性疾病诊断中即时检测(POCT)的应用
近年来,感染性疾病的新发突发不断威胁人类健康,非典型肺炎、中东呼吸综合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黄热病、裂谷热等传染性疾病的传播,成为全球公共卫生问题。随着城市化的发展、全球贸易往来的增加,环境改变加剧自然疫源性传染病的传播风险,感染性疾病的预防控制刻不容缓。因此,开展传染病的即时快速检测,对于感
感染性疾病诊断中POCT的应用
近年来,感染性疾病的新发突发不断威胁人类健康,新型冠状病毒肺炎、中东呼吸综合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黄热病、裂谷热等传染性疾病的传播,成为全球公共卫生问题。随着城市化的发展、全球贸易往来的增加,环境改变加剧自然疫源性传染病的传播风险,感染性疾病的预防控制刻不容缓。因此,开展传染病的即时快速检测,
多年磨一剑!韩春雨团队等温PCR平台新突破
Argonaute促进的靶向是一种酶介导的、高保真的、高效的碱基配对过程,可以重新用于升级PCR技术。来自嗜热Caloramator sp.(CalAgo)的Argonaute蛋白在65°C的Tte-UvrD解旋酶存在下切割靶dsDNA,表明dmCalAgo(一种核酸酶失活突变体)在相同条件下与
等温滴定量热仪的技术指标
短期噪音水平:0.5纳卡/秒 (2 纳瓦)。 基线重复性:优于±20纳瓦/小时 。 工作温度: 2 ℃ 到 80 ℃。 最小响应时间: 17秒 可选择化学反应的响应时间: 多种选择(ZL技术) 。 搅拌速度有多种选择。 控温方式:Peltier电子控温方式,快速达到控制温度,不需水浴。
病毒介导基因转移技术介绍
病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运
临床基因扩增检验技术
PCR技术是由Cetus公司和加利福尼亚大学1985年联合创造的,主要贡献者为Kary B mulis和HeneryA、Erlich。该方法首先被应用于人β-珠蛋白DNA的扩增及镰刀状红细胞贫血病的产前诊断。自85年首次报道PCR方法以来,PCR被广泛应用于分子克隆、序列分析、基因突变、遗传病、传染
基因扩增技术的原理
PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA
基因扩增技术的优点
特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水
基因扩增仪技术特性
1、加热模式:立体膜加热技术 2、制冷技术:新一代“peltier”效应“半导体热泵制冷” [1] 3、控温及管理:16位微机智能式 4、DTC型基因扩增仪主要由外壳、变温反应腔、散热系统、加热系统、制冷系统、电子控制系统、供电系统、人机界面等各部分组成。 5、单机操作,也可与电脑联机使
基因扩增技术的定义
又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域
恒温核酸扩增技术概述
恒温核酸扩增技术是利用各种酶,引物,脱氧核苷三磷酸(dNTP),模板DNA以及缓冲液的混合物在同一温度下温浴一定时间,让不同的酶与DNA进行反应,从而达到特定DNA片段的扩增。与传统的PCR核酸扩增相比,恒温核酸扩增不需要在不同温度之间的转换,只要保持酶反应的最佳温度,37℃、42℃、56℃或6