原代细胞、细胞系与细胞株的区别

原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。 细胞系(cell strain):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系, 如可以连续培养, 则称为连续细胞系, 培养50代以上并无限培养下去。 细胞株(cell line):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株,也就是说,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。如果不能继续传代或传代数有限,称为有限细胞株;如果可以连续传代,称为连续细胞株。对于人类肿瘤......阅读全文

原代细胞的作用

  原代细胞可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA,可转染绝大多数原代细胞。目前,无论国外还是国内,原代细胞的核酸转染都是个热点难题,市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。原代细胞能够高效转染绝大多数原代细胞

原代细胞的释义

  动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得单个细胞,再生长于培养皿中。大多数组织可以制备原代细胞,但生长的快慢及难易程度不一。肾和睾丸最常用,甲状腺细胞生长较慢,只用于某些特定的病毒如猪传染性肠胃炎病毒的培养。

原代细胞的取材

一、取材的基本要求(1)取材要注意新鲜和保鲜新鲜组织易于培养成功,取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞,尽快入箱培养,若不能即时培养,应将组织浸泡于培养液内,于4℃存放。若组织块较大,应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后,切碎于培养液内4℃存放,但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、

原代细胞的培养

  原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。[1]  最常用的原代细胞的培养有组织块培养和分散细胞培养

细胞技术专题:肿瘤细胞原代培养实验

肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清

细胞系的概念

细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广

细胞系的简介

  经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生

细胞传代培养的优点和缺点

传代培养 原代培养形成的单层细胞汇合以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,都将影响细胞的生长,这一程序常称为传代或传代培养。原代培养在首次传代时即为细胞系,能连续培养下去的为连续细胞系;不能连续培养的为有限细胞系。通常,传代培养是指扩大培养,也就是将一份细胞

原代细胞培养在药物测试的使用与注意事项

长期以来,科学家多依赖永生化的细胞系来进行各种研究,但在过去十年,随着细胞生物学的发展,细胞培养领域发生了巨大变化,新型的技术和培养试剂让使用原代细胞作为研究对象成为可能。相比于细胞系,原代细胞更多保留了体内原始组织的生物学特征,如生长和衰老,因此通过原代细胞可建立更好的细胞疾病模型。 原代细胞(P

细胞株的传代与培养

 培养细胞株传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长细胞如COS-7、CHO等用消化法传代;部分贴壁生长的细胞如PC12用直接吹打即可传代。  一、用品  (1)  0.25%胰蛋白酶,全培养液  (2)  滴管,离心管,培养瓶(皿),培养瓶盖,注射器,计数6  二、步骤  (1) 贴壁细胞的消化法

稳定转染细胞株的构建

1. 2 稳定转染细胞株的构建原理:稳定转染,就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。应用:    

细胞株的概念和特性

通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。

稳定表达细胞株的建立

1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中(一般选用1:10和1:100两个梯度),分别采用1200mg/ml,1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选;以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照;2、每3~4天换液一次;3、筛选20~30天,

细胞株的保存方法介绍

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基

细胞株是如何构建的?

1,什么是瞬时转染和稳定转染?瞬时转染:外源片段的表达时间短暂。这主要是因为外源导入的裸露的载体整合入基因组的几率非常低,所以以染色体外(episomal)形式存在,不能随细胞分裂而一同复制导致后拷贝数被稀释导致的。而且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量,所以起初转染的质粒拷贝数极高。这就导致瞬时转染呈现

单细胞分离与孔板成像组合的高效细胞株开发流程

  高剪切乳化机是一种能将物料充分细化均匀的机器,其名称来源应该是能促使油性物质(油相)与水性物质(水相)相混并形成均匀的乳化液的机器。而细化均匀的机器又有多种,如球磨机、砂(珠)磨机、粉碎机、胶体磨、分散机、高压均质机等,这些能细化物料的机器适用范围、细化均质能力各不相同。而高剪切乳化机具备了细

单细胞分离与孔板成像组合的高效细胞株开发流程

 细胞株开发的典型工作流程当前细胞株开发的工作流程有一些局限,如低细胞活率、低效的单细胞分离以及有限的单克隆性证据。有限稀释,一种传统分离单细胞的方法,依赖于统计概率,无法提供单克隆性的可视化证据。此外,该技术的效率非常低,最终导致每块微孔板上可供筛选的克隆非常少。 CloneSelectTM高通量

细胞与细菌的区别

  1.细菌细胞的遗传信息量少,2.内部结构简单,特别是没有分化成以膜为基础的专门结构和功能的细胞器与核膜.  细菌没有细胞核结构,仅为DNA与少量RNA或蛋白质结合物,也没有核仁和有丝分裂器.  细菌的细胞通常很小,只有几个微米,而其它生物细胞一般都有几十微米.  细菌体表还有菌毛和鞭毛,这是其它

浆细胞系统

1﹒原始浆细胞(plasmablast)胞体直径为14~18μm,圆形或椭圆形;胞浆量多,呈深蓝色或淡紫色,于近核处有淡染区,偶见空泡,无颗粒;胞核圆形,占细胞的2/3 以上,居中或偏位;核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁2~4 个。在多发性骨髓瘤、浆细胞性白血病骨髓及血液中大量出现。2﹒幼稚浆细

巨核细胞系统

1﹒原始巨核细胞(megakaryoblast)胞体较大,直径为15~30μm,圆形或不规则形;胞浆量较少,呈不透明的深蓝色,有伪足突起,无颗粒;胞核圆形或不规则形,呈深紫红色,染色质较粗呈条索状,排列紧密,核仁2~3 个,淡蓝色,且不清晰。2﹒幼稚巨核细胞(promegakaryocyte)胞体明

红细胞系统

(一)正常红细胞系统1﹒原始红细胞(nor moblast)胞体直径为12~20μm,圆形或椭圆形,胞浆量少,深蓝色,不透明,有油画蓝感,偶有伪足突起,胞浆边缘着色深蓝,在核周围常形成淡染区;胞核圆形,居中或稍偏于一侧,染色质呈紫红色颗粒状,如串珠样排列,核仁1~2 个,大小不一,染浅蓝色。2﹒早幼

H9C2心肌细胞系的特性

首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究方向上,你

H9C2心肌细胞系的特性

首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究方向上,你

THP1细胞培养的一些基本问题

细胞培养(cell culture)细胞培养的含义,简单地说即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞,放在类似于体内的体外环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。还可以利用细胞进行细胞工程与细胞癌变等重大问题的研究。细胞培养也是研究病毒与研制疫苗的基础技术。因此

3d细胞培养怎么收集细胞

  细胞培养(cell culture)细胞培养的含义,简单地说即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞,放在类似于体内的体外环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。还可以利用细胞进行细胞工程与细胞癌变等重大问题的研究。细胞培养也是研究病毒与研制疫苗的基础技术。

THP1培养总结

细胞培养(cell culture)细胞培养的含义,简单地说即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞,放在类似于体内的体外环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。还可以利用细胞进行细胞工程与细胞癌变等重大问题的研究。细胞培养也是研究病毒与研制疫苗的基础技术。因此

THP1细胞培养的一些基本问题

细胞培养(cell culture)细胞培养的含义,简单地说即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞,放在类似于体内的体外环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。还可以利用细胞进行细胞工程与细胞癌变等重大问题的研究。细胞培养也是研究病毒与研制疫苗的基础技术。因此

如何构建耐药细胞株?

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一,成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此,探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程,它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科,这就决定了肿瘤细胞对化疗药物

细胞坏死与细胞凋亡的区别

细胞程序死亡(programmed cell death,PCD)也常常被称为细胞凋亡,是生物体发育过程中普遍存在的,是一个由基因决定的细胞主主动的有序的死亡方式。具体指细胞遇到内、外环境因子刺激时,受基因调控启动的自-杀保护措施,包括一些分子机制的诱导激活和基因编程,通过这种方式去除体内非必需细胞

细胞死亡与细胞凋亡的区别

区别点坏死凋亡起因病理性变化或剧烈损伤生理性或病理性范围大片组织或成群细胞单个散在细胞细胞膜破损保持完整,一直到形成凋亡小体染色质呈絮状凝聚在核膜下呈半月状细胞器肿胀、内质网崩解无明显变化细胞体积肿胀变大固缩变小凋亡小体无,细胞自溶,残余碎片被巨噬细胞吞噬有,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬基因组DNA随机