大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料 一周龄Wistar 大鼠 试剂、试剂盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型胶原酶 葡萄糖 碘乙酸 仪器、耗材 ......阅读全文
抗胰岛细胞抗体检测
胰岛细胞由分泌胰岛素的β细胞、分泌胰高血糖素的α细胞和分泌生长激素释放因子的δ细胞组成。抗胰岛细胞抗体(insular cellular antibody,ICA)于1974年由Bottaazzo等首次报道,主要靶抗原为胞质中谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)和酪
胰岛细胞瘤的定位诊断
目前, 胰岛素瘤诊断的主要挑战是定位。80%以上的胰岛素瘤直径< 2 cm, 一般不引起胰腺轮廓的改变,常规的形态学定位方法如B 超、CT 和核磁共振(MRI) 均难以发现。胰岛素瘤定位诊断检查一般分为形态学定位和功能定位两大类。形态学定位主要有: (1)腹部超声,总体诊断率不高,约35.1%
胰岛细胞瘤的定性诊断
胰岛素瘤的定性诊断主要依靠Whipple三联征和血浆胰岛素水平测定。诊断胰岛素瘤首先要确定症状是否由低血糖引起。经典的Whipple三联征至今仍对诊断具有重要意义,即空腹时症状发作;空腹或发作时血糖水平< 2.78mmol/L (50mg/dl);进食或静脉推注葡萄糖可迅速缓解症状。90%以上的
大鼠胰岛素原(Proinsulin)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Proinsulin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Proinsulin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Proinsulin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色
RNc细胞大鼠皮质细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
RNc细胞大鼠皮质细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mLRNc细胞大鼠皮质细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,
RNc细胞大鼠皮质细胞注意事项
1. 上述操作方案的数据可作为参考,实际操作已实验室配备的耗材为准,2. 冻存时含 10%DMSO,事先加 9ml 培养液是为了稀释 DMSO,理论上 1%DMSO对细胞性3. 隔着 PE 手套能有效防止水浴过程中导致污染4. 重悬的体积只是作为参考,具体的根据需要可进行调整5. 由于复苏过程中已经
大鼠原代细胞分离与培养
一、大鼠神经元细胞(酶消化法) 简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。 二、大鼠雪旺细胞(植块法) 简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C
大鼠胰岛素受体(Insulin-R)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Insulin R 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Insulin R与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Insulin R,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,
最新研究发现调控胰岛β细胞分泌胰岛素的关键分子
虽然现在新的降糖药物层出不穷,但都只是通过加速身体器官组织对葡萄糖的摄取和利用来达到降糖目的,治标不治本。造成糖尿病最核心的胰岛β细胞功能缺陷问题,仍是目前难以解决的世界性难题。 近期,德国慕尼黑亥姆霍兹中心糖尿病与再生研究所的研究人员发现:抑制小鼠胰岛β细胞上一种名为Inceptor的分子,
胰岛细胞瘤的病理变化
(1)肉眼观:肿瘤多为单个,体积较小,约1cm~5cm或更大,可重达500g,圆形或椭圆形,境界清楚,包膜完整或不完整,色浅灰红或暗红,质软、均质,可继发纤维组织增生、钙化、淀粉或粘液样变性和囊性变;(2)镜下:瘤细胞排列形式多样,有的呈岛片状排列(似巨大的胰岛)或团块状,有的呈脑回状、梁状、索
胰岛细胞抗体的注意事项
胰岛素依赖性糖尿病抗胰岛细胞抗体阳性率为20%~40%,活动期阳性率可达60%~70%;非胰岛素依赖性糖尿病阳性率仅为6.2%。因此,检测抗胰岛细胞抗体可分1型和2型糖尿病。
胰岛细胞抗体的检查过程
将抗原片用pH7.4,0.01mol/L PBS浸湿,滤纸吸干。加入用PBS作1∶5稀释的待测血清,置37℃湿盒30min,用PBS浸洗3次,每次5min,电扇吹干。滴加抗人IgG荧光抗体,37℃湿盒30min,同上法洗后吹干。用荧光显微镜检查。
胰岛细胞如何调节血糖水平?
胰岛素的分泌:当血糖浓度升高时,胰岛β细胞会分泌胰岛素。胰岛素能够促使身体的细胞吸收葡萄糖并将其转化为能量或储存为糖原和脂肪。这样,血糖水平就会降低。 胰高血糖素的分泌:当血糖浓度降低时,胰岛α细胞会分泌胰高血糖素。胰高血糖素能够促使肝脏分解糖原释放葡萄糖进入血液,从而提高血糖水平。 这两种
概述胰岛细胞瘤的诊断依据
胰岛素瘤分泌过量的胰岛素释放入血,引起以低血糖为主的一系列症状,患者可呈发作性低血糖昏迷,久之将损害脑组织,发生意识障碍、精神异常等。临床主要表现为低血糖综合征,血浆胰岛素水平升高。低血糖发作常随病程延长而频繁,发作时间延长, 程度加重, 多伴有身体逐渐肥胖,记忆力、反应力下降。由于胰岛素瘤的临
胰岛细胞抗体的临床意义
作为1型糖尿病发病初期的免疫标志,用于其早期诊断。 结果阳性可能疾病: 小儿糖尿病 、 外阴黑色棘皮症
什么是抗胰岛细胞抗体(ICA)
抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体,抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分,主要为lgG类,是胰岛细胞中β细胞损伤的标志。抗胰岛细胞抗体常用间接免疫荧光法测定,荧光图形的特点是胰岛细胞胞质呈斑点状着染。
胰岛细胞抗体的注意事项
胰岛素依赖性糖尿病抗胰岛细胞抗体阳性率为20%~40%,活动期阳性率可达60%~70%;非胰岛素依赖性糖尿病阳性率仅为6.2%。因此,检测抗胰岛细胞抗体可分1型和2型糖尿病。
胰岛B细胞的基本信息
胰岛B细胞也称为胰岛β细胞(英语:Beta cells、β cells),是一类位于胰岛中的细胞,主要功能是分泌能降低血糖浓度的胰岛素,数量占到胰岛中细胞数量的60-80%。1型糖尿病即由胰岛B细胞功能异常导致。经过免疫染色的人胰岛切片(胰岛位于中央),蓝色为胰岛素的信号,提示该处分布有胰岛B细胞,
大鼠葡萄糖依赖性促胰岛素激素EIA检测法
大鼠葡萄糖依赖性促胰岛素激素EIA试剂盒使用说明 原理本实验采用双抗体夹心 ELISA法。用抗大鼠GIP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GIP与单抗结合,加入酶标抗体,形成免疫复合物连接在板上,加入酶底物TMB,出现蓝色,加终止液硫酸,颜色变黄,在450nm处测OD值,GIP浓度与OD值成正比
大鼠胰岛素样生长因子1(IGF1)ELISA检测法
大鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IGF-1 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 IGF-1与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠IGF-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过
大鼠胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA检测法
大鼠胰岛素样生长因子-2(IGF-2)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IGF-2 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 IGF-2与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠IGF-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过
方案23.6-大鼠肝细胞分离实验
实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。 试剂、试剂盒
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
大鼠纤维环细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL大鼠纤维环细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约
大鼠ES细胞的实验相关介绍
IannacconePM等从大鼠PVG近交系分离克隆大鼠ES细胞系-RESC-01,该细胞系对SSEA-1和AKP呈阳性,在大鼠胎儿成纤维细胞饲养层上能很好的增殖,在体内环境能分化形成多种细胞类型。RESC-01细胞系在体外悬浮培养时形成的胚体出现有节律的收缩运动,将其注入囊胚并移植假孕母鼠能生
大鼠外周血淋巴细胞分离液
【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先取抗凝血按体积比 1:1的比例与样本稀释液(产品编号:2010C1119)混匀,根据稀释后的样本量大小,分以下两种情况:情况 A:稀释后的血液样本量小于 5ml时,实验方法如下:1.取一支15ml离心管,先加入与稀释后样本等量的
正常大鼠施旺细胞的培养
实验材料:1. 生后2d大鼠的坐骨神经;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶和0.03%胶原酶的混合消化液;4. 培养液a:DMEM培养液,加入0.02—0.025mol/L HEPES,pH7.
大鼠嗜酸细胞阳离子蛋白
大鼠嗜酸细胞阳离子蛋白 样本要求:在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,