细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破膜,作用 10 min,使 FITC 染料能进入到细胞中。3. 用离心法以 PBS 液洗去破膜剂,离心收集细胞。4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入样品中,混匀,置 4℃ 冰箱中反应 30 min。5. 用 PBS 液以 1500 r/min 离心 5 min,洗去染色液,再离心去上清。6. 再加 0.5 ml PBS,混匀,上机检测。 &......阅读全文
细胞周期蛋白质的细胞周期
我们可以把细胞周期人为地划分为几个时期。开始人们按照细胞所处的形态学变化将细胞划分为间期和分裂期两相,霍华德学说划分细胞周期各期则是以细胞核的遗传物质DNA的复制和分裂作为主要标界——即按时间顺序将细胞周期确定为四个期:DNA合成前期(G1期),DNA合成期(S期),DNA合成后期(G2期)和分裂期
真核细胞蛋白质合成过程
真核细胞中,核糖体进行蛋白质合成时,既可以游离在细胞质中,称为游离核糖体(freeribosome)。也可以附着在内质网的表面,称为膜旁核糖体或附着核糖体。参与构成RER,称为固着核糖体或膜旁核糖体,是以大亚基圆锥形部与膜接着游离核糖体(freeribosome)。分布在线粒体中的核糖体,比一般核糖
蛋白质的细胞功能介绍
蛋白质是细胞中的主要功能分子。除了特定类别的RNA,大多数的其他生物分子都需要蛋白质来调控。蛋白质也是细胞中含量最为丰富的分子之一;例如,蛋白质占大肠杆菌细胞干重的一半,而其他大分子如DNA和RNA则只分别占3%和20%。在一个特定细胞或细胞类型中表达的所有蛋白被称为对应细胞的蛋白质组。 蛋白
单细胞蛋白质的用途
①用作食品有些单细胞蛋白质,特别是用农产品培养生长的酵母菌菌体可用作食品(必要时要先经过处理)。 ②用作饲料用单细胞蛋白质作为饲料,可以节约粮食,促进畜牧业发展。 ③用作其他从单细胞蛋 白质中可提取许多有用之物,如辅酶A,细胞色素C和辅酶I等医药产品,如酵母浸出汁等生物试剂。
单细胞蛋白质的优点
从单细胞微生物中提取出的蛋白。由于微生物繁殖速度快,原料要求低(包括农林副产物及废料,食品加工后的废物、副产品,石油衍生原料,厌氧废物处理过程中产生的生物质副产品等),营养价值高(含有碳水化合物、脂肪、维生素和矿物质等多种营养成分),是人类和动物获得蛋白质的手段之一。可制取蛋白质的微生物,包括含
单细胞蛋白质的介绍
从单细胞微生物中提取出的蛋白。由于微生物繁殖速度快,原料要求低(包括农林副产物及废料,食品加工后的废物、副产品,石油衍生原料,厌氧废物处理过程中产生的生物质副产品等),营养价值高(含有碳水化合物、脂肪、维生素和矿物质等多种营养成分),是人类和动物获得蛋白质的手段之一。可制取蛋白质的微生物,包括含
增加T细胞蛋白质产量,使其绝杀癌细胞
来自南卡罗莱纳医科大学(MUSC)霍林斯癌症中心的一组科学家开发了一种新的流式细胞术技术,该技术可以*量化T细胞中蛋白质的产生。T细胞是一种免疫细胞,能有效地攻击并杀死癌细胞。然而,当T细胞在肿瘤附近时,癌细胞会消耗它们的能量,导致它们产生的蛋白质减少。这种变化导致T细胞失去杀死肿瘤的能力。这项由M
细胞总蛋白质含量分析
实验步骤展开
细胞总蛋白质含量分析
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蛋白质折叠的细胞密码破解
人们通常认为,疾病是由异物(细菌或病毒)入侵人体引起的,但影响人类的数百种疾病,其实是由细胞蛋白质生成错误引起的。美国马萨诸塞大学阿默斯特分校领导的团队最近利用尖端技术,破解了基于碳水化合物的代码,该代码控制某些蛋白质的正常形状,而正常的蛋白质形状才能使人体保持健康。研究发表在最新一期《分子细胞
如何从细胞中提取蛋白质
(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。但另一方面,温度
细胞破碎和蛋白质溶解实验
实验方法原理 通过固体剪切力破碎组织和细胞,释放蛋白进入溶液。市售的匀浆器主要有四类,刀片式组织破碎匀浆器、内切式组织匀浆器、玻璃匀浆器和用于规模生产的髙压匀浆器。玻璃匀浆器的匀浆头(杵)有玻璃制的,也有特夫隆制的,既可以手动也可以电动。由于匀浆过程中蛋白质被蛋白酶降解的可能性较小,所以匀浆是简便、
植物细胞蛋白质合成的场所
(1)蛋白质的合成场所是核糖体;(1)有氧呼吸的场所是细胞质基质和线粒体,主要场所是线粒体.
细胞周期蛋白质的简介
生活在自然界的各种生物,生命都将随着时间的流逝而日趋衰老,最后死亡。作为生物体基本单位的细胞也是如此。单个细胞都有一定的生命期限,活细胞到了一定阶段不是繁殖,就是死亡。细胞的繁殖是通过有丝分裂进行的,母细胞平均分裂成两个和自身相同的子细胞;子细胞逐渐成熟,又重复母细胞的生命过程,由此生命得以世代
细胞总蛋白质的分离提取
细胞器是一种动态的结构,如内质网、细胞核和高尔基体等,其蛋白质组成除了驻留蛋白质之外,还包括穿梭蛋白质和瞬间相互作用的蛋白质。对于这些组成成分的研究,即亚细胞蛋白质组研究将有助于对这些蛋白质做全面的挖掘,从而对细胞器的功能作深入的阐述。蛋白质提取与制备具体操作方法如下:一、材料的选择早年为了研究的方
如何从细胞中提取蛋白质
(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解.提取的温度要视有效成份性质而定.一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间.但另一方面,温度
如何从细胞中提取蛋白质
(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。但另一方面,温度
细胞破碎和蛋白质溶解实验
匀浆法 超声法 高压匀浆法 研磨法 (高速)珠磨法 酶溶法 化学渗透法 实验方法原理 通过固体剪切
细胞总蛋白质含量分析
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蛋白质在什么细胞中合成
一般情况,只要是活细胞就能合成。但是,没有细胞核的活细胞不能合成。比如,成熟的红细胞就不能再合成蛋白质了。细胞内,蛋白质合成的部位是:核糖体。分为游离型和附着型,都可以合成蛋白质。蛋白质合成,生物按照从脱氧核糖核酸 (DNA)转录得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遗传信息合成蛋白质的过程。蛋白质生物
细胞蛋白质的含量是多少
应该说不同细胞中含量不同的吧,质量分数在7-10%。但可以这样理解,一般的细胞含量最多的有机化合物是蛋白质,或者说占细胞干重最多的物质是蛋白质,鲜重最多的当然是水。
细胞总蛋白质含量分析
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细胞膜蛋白质提取方法蛋白质沉淀法
1.热变性及酸碱变性沉淀法 用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。 2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。4.非离子多聚体沉淀法
蛋白质帮助细胞生存还是死亡?
在一项研究中,科学家展示了细胞应激是怎样阻止和促进细胞自杀的,这两种作用是均衡对抗的。 7月3日发表在Science杂志上的一篇文章报道:未折叠蛋白反应(UPR)细胞应激通路不仅能激活死亡受体5蛋白(DR5)促进细胞自杀,也能通过降解DR5来抑制细胞自杀。该理论认为初始应激会阻碍细胞自杀或凋亡,给予
真核细胞蛋白质合成的相关介绍
真核细胞蛋白质合成的起始真核细胞蛋白质合成起始复合物的形成中需要更多的起始因子参与,因此起始过程也更复杂。 ⑴需要特异的起始tRNA即,-tRNAfmet,并且不需要N端甲酰化。已发现的真核起始因子有近10种(eukaryote Initiation factor,eIF) ⑵起始复合物形成
蛋白质生成卡顿引发细胞老化
德国莱布尼茨老龄研究所团队在一种名为鳉鱼的淡水鱼大脑中发现,随着年龄增长,细胞内合成蛋白质的“工厂”——核糖体,在制造某一类关键蛋白质时出现卡顿,从而引发一连串恶性循环,导致细胞功能不断衰退。这或许是一种潜在的细胞衰老“总开关”机制及多种细胞老化现象的根源。相关论文发表于新一期《科学》杂志。合成蛋白
蛋白质工程拓展免疫细胞语言
根据世界卫生组织统计,每年约600万人死于败血症,这些数字令人担忧。这种俗称“血液中毒”的疾病通常始于无害的感染。 一旦触发免疫系统过度反应,自身组织就会受到攻击和损伤。过度反应最终会导致危及生命的防御系统全面崩溃。仅在德国,死于败血症的人数就超过了艾滋病、结肠癌和乳腺癌的总和! 世界各地的
单细胞蛋白质的概念及优点
概念 用单细胞微生物发酵生产的蛋 白质称为单细胞蛋白质。 优点 ①单细胞蛋白质可以不受气候等外界条件的影响,能够工业化进行生产。 ②微生物的生长速率远较动、植物快,并且能在发酵罐中进行,因而可以在短时间内,在有限的体积内生产出大量的菌体,如500kg的牛每24h只能合成0.5kg蛋白质,
细胞膜蛋白质提取方法
NRC Institute for Biological SciencesTriton X-114 extraction protocol (Hydrophobic protein preparation)Ressuspend cells in Solution A (dil 1/8) and ad
动物细胞蛋白质的提取方法
1、将高压的 PBS洗涤细胞瓶两次,弃PBS,倒置纸巾上吸干。2、加入2 ml裂解液10×permeabilization buffer 2 ml。3、放入冰箱里裂解,平放,拧紧盖子,置摇床半小时,200 转/min。4、收集裂解液至 1.5 ml EP管,分两管,12000 rpm,4 ℃离心,5