活力染色
经验交流(0)实验方法原理各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别 10%~20% 的活力差异。除此之外,排斥染料的细胞有可能不贴壁或不能较长时问生存或繁殖。实验步骤1) 胰蛋白酶处理细胞(见上文“胰蛋白酶处理分离细胞”),无菌状态下取 0.5 ml 细胞用 PBS 稀释至每毫升 2X105~4X105。2) 向另一管中无菌加人 0.5 ml 上述细胞稀释液,并加人 0.5 ml 台盼蓝溶液 (0.4%)3) 细胞在染料中停留时间为不短于 3 分钟、不超过 10 分钟, 用毛细吸管取含染料的细胞悬液,靠毛吸作用使其进入计数器内。4) 至少计数总数 500 个细胞,蓝色细胞单独计数。记录不排斥染......阅读全文
果胶酶活力检测方法
掌握可靠的酶分析定量方法是开展果胶酶研究工作的重要前提。果胶酶的测定方法很多,各具特点,且酶活单位的定义不同,要根据不同情况加以选择对比。常用的酶活力测定方法有:1 滴定法滴定法主要用于测定果胶酯酶的活力,根据该酶作用机制,采用滴定羧基来评价酶活。果胶酯酶的活力还有一种测定方法,即,通过气相色谱或液
见证中国创新的活力和韧劲
1月8日,2018年度国家科学技术奖励大会在北京人民大会堂举行,科技创新领域的佼佼者们齐聚一堂,接受党和人民给予的崇高荣誉。两位国家最高科学技术奖获得者,38项国家自然科学奖,67项国家技术发明奖,173项国家科学技术进步奖……成果涉及基础科学与产业技术的各个方面,覆盖国民经济和社会发展的主要领
细胞活力分析仪的应用
NucleoCounter能分析哺乳动物细胞的总数(浓度)、死细胞总数(浓度)、活细胞数(浓度)和细胞活力,因而,其能用于普通实验室细胞培养,微载体培养和生物反应器培养等方面的细胞计数和测定细胞活力。 ◇操作非常简单 ·样品处理 将细胞样品与等体积的试剂 A-100(裂解/分散缓冲液)和试
构建富有活力的创新生态
今年天津市将国家自主创新示范区建设作为深入实施创新驱动发展战略的一项重大战略举措来抓,并推出了“一区二十一园”的规划方案,缘何天津市对这一工作如此重视?今后又将采取哪些举措?全国两会前夕记者采访了天津市委代理书记、市长黄兴国。 高水平建设国家自主创新示范区 记者:去年底国务院对天津建设国
让科技成果转化更具活力
——《深化科技体制改革实施方案》系列解读 10月1日,修改后的《中华人民共和国促进科技成果转化法》将正式实施。与施行了19年的旧法相比,修改后的《中华人民共和国促进科技成果转化法》着力解决成果的所有权、成果的处置权和成果的收益分配权,而这正是近十年来,制约科技成果转化的“三权”。 “成熟稳定可
济宁:新型煤化工焕发“煤都”活力
●思路:园区化、生态化、规模化、绿色化、集约化、一体化 ●布局:以煤基多联产为主体,生物医药、精细化工及新材料为两翼,建设六个化工专业园区 ●方式:调结构转方式为主线,以园区为平台,以大项目为支撑,以技术创新为驱动力 济宁市煤炭等矿产资源丰富,全市总储量270亿吨,已探明煤炭资
精子活力检测及其临床意义
精子活力检测:以下是WHO推荐的一种简单的分级方法。 操作 取10μl 标本涂片,连续观察至少5 个视野,对200 个精子进行分级,首先计数a 级和b 级精子,随后在同一视野内计数c 级和d 级精子。 结果判断 根据下述标准把精子活力分为a 、b 、c 、d 四级。
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、
守护科技伦理就是守护创新活力
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/497935.shtm4月4日,科技部发布关于公开征求对《科技伦理审查办法(试行)》意见的公告,提出建立伦理高风险科技活动清单制度,人工智能、基因编辑等部分前沿探索在清单之列。该公告一经发出,引发科学技术界
精子活力检测及其临床意义
精子活力检测:以下是WHO推荐的一种简单的分级方法。操作 取10μl 标本涂片,连续观察至少5 个视野,对200 个精子进行分级,首先计数a 级和b 级精子,随后在同一视野内计数c 级和d 级精子。结果判断 根据下述标准把精子活力分为a 、b 、c 、d 四级。 a 级
植物花粉生活力测定技术
在育种工作中,有时需要将花粉保存一段时间。虽然人们已经知道,花粉保存以温度较低(0~15℃),空气湿度稍干(不能太干)、黑暗条件下为宜。但是各种不同植物 花粉寿命长短相差悬殊,这一是由花粉本身的特征决定的,二是由贮藏条件决定的。一般来说,禾谷类作物花粉的寿命较短,自花授粉植物花粉的寿命尤其短,
植酸酶的酶活力值
植酸酶是饲料中植酸降解为无机磷酸和肌醇的饲料添加剂,中国农业科学院饲料研究所将黑曲霉Aspergillus niger 963植酸酶基因重组到毕赤酵母中得到高效表达,酶活力达8×105 IU/mL,比原黑曲霉产量提高了 3 000倍以上,大大高于国外报道的工程菌,国内已建立了多家生产企业。
酶活力测定的注意事项
(1)酶促反应过程中,要用初速度表示酶促反应速度。(2)要规定时间、温度、pH等反应条件,并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。(3)配制的底物浓度应准确且足够大,底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中,以防止底物被分解。(4)标本要新鲜,应保存于冰箱中。用血浆时,应考虑到抗凝剂对酶反
细胞活力分析仪的简介
细胞活力分析仪主要应用于哺乳动物细胞快速、准确和客观计数和细胞活力分析。 ChemoMetec A/S致力于开发颗粒分析领域的分析设备和技术,是高效、低成本颗粒分析设备的领先制造商。 ChemoMetec A/S 公司的专长在于开发低成本的高技术产品。产品系列(NucleoCounter细胞
深化改革着力激发创新活力
——四论学习贯彻习近平总书记两院院士大会重要讲话 创新决胜未来,改革关乎国运。 “全面深化科技体制改革,提升创新体系效能,着力激发创新活力。”在中国科学院第十九次院士大会、中国工程院第十四次院士大会上,习近平总书记发表重要讲话,就深化科技体制改革作出了进一步部署,对推进科技创新的政策和制度建
细胞活力分析仪的原理
ChemoMetec A/S的NucleoCounter是内置的荧光显微镜设计,检测与细胞核酸结合的荧光染料PI的信号。NucleoCounter分析的结果是总细胞浓度或死细胞浓度,取决于样品的处理。 ◇碘化丙啶 碘化丙啶(PI)是一种荧光分子和高选择性DNA染料,PI可与双链DNA(dsD
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
植物根系活力的测定(TTC法)
实验概要植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。实验原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲瓒,生
细胞计数及活力测定方法2
(三)MTT法测细胞相对数和相对活力活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使 MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。l、细胞悬液以 1000rpm离心 10分钟,弃上清液。2、沉淀加入 0.5-1ml MTT,吹打成悬液。3、37℃下保温 2小时。4、加入
细胞色素c活力测定方法概况
细胞色素c氧化晦 (Cytochrome e oxidase,COX)亦称细胞色素氧化酶,存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化。COX单体为2-亚铁血红素,23)铜蛋白,相对分子质量为150~200kuKD)COX的每个单体由至少13条不同的
关于木聚糖酶的活力介绍
定义:lg酶粉于50摄氏度、pH4.8条件下,每分钟催化分解木聚糖产生1μ mol木糖的量为一个酶活力单位,以IU/g表示。该品活力为:木聚糖酶 42,000IU/g;β-葡聚糖酶 17,000IU/g;CMCase 50,000IU/g。 酶活:5000IU/g;酶活力单位:在50℃,pH为
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
细胞计数及活力测定方法1
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber 中细刻9 个
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水
人类染色体姊妹染色单体差别染色
姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt(1973)在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),当用Hoechst33258 荧光染料染色时,发现了姊妹染色单体的色差反映和它们
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一