3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

经验交流(0)实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约 2Ci/mmol) 安全提示 处理 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷时要谨慎, 因为它是放射活性物质和基因产物!要遵照当地指南操作(见 7.7 节)。 多孔培养板,内含 13 mmThermanox 盖片(Nalge Nunc) 非无菌 血球计数板或电子计数器 D-PBSA 醋酸甲醇(1 份冰醋酸加入 3 份甲醇),冰冷,新鲜配制 显微镜载片 封胶(如 DPX 或 Permount) 三氯乙酸(TCA ),0.6mol/L ,冰冷 去离子水 甲醇 操作步骤 1. 在装有盖片的 24 孔培养板中,以 2X1......阅读全文

双脱氧核苷三磷酸的基本信息

中文名称双脱氧核苷三磷酸英文名称dideoxyribonucleoside triphosphate;ddNTP定  义非天然的核苷三磷酸,其中核糖单位的第2位碳原子和第3位碳原子位上的羟基都被氢原子取代。有双脱氧腺苷三磷酸(ddATP)、双脱氧鸟苷三磷酸(ddGTP)、双脱氧胞苷三磷酸(ddCTP

细胞化学词汇寡脱氧核苷酸

中文名称:寡脱氧核苷酸英文名称:oligodeoxynucleotide定  义:由20个以下脱氧核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成的化合物。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

脱氧核苷酸的基本功能

脱氧核苷酸为白细胞、血小板、 T淋巴细胞及 NK细胞的增殖提供脱氧核苷酸原料,刺激上述细胞的增殖及分化成熟,促进骨髓释放白细胞,提高白细胞水平,减少重度骨髓抑制发生率,提高免疫功能,减少感染的发生。另外脱氧核苷酸通过补充机体肝脏、肌肉等全身的脱氧核苷酸,防止CSF过度动员骨髓造成的脱氧核苷酸转移到骨

脱氧核苷酸有哪些主要价值?

  脱氧核苷酸为白细胞、血小板、 T淋巴细胞及 NK细胞的增殖提供脱氧核苷酸原料,刺激上述细胞的增殖及分化成熟,促进骨髓释放白细胞,提高白细胞水平,减少重度骨髓抑制发生率,提高免疫功能,减少感染的发生。另外脱氧核苷酸通过补充机体肝脏、肌肉等全身的脱氧核苷酸,防止CSF过度动员骨髓造成的脱氧核苷酸转移

末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)检测

末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)检测(酶标免疫细胞化学显示法)阳性反应为棕黄色颗粒,定位在细胞核上。TdT为早期T淋巴细胞的标志,在正常情况下不成熟的胸腺淋巴细胞出现阳性反应,正常人外周血细胞中极少或无活性。

脱氧核苷酸的生成的反应过程

体内的脱氧核苷酸是通过各自相应的核糖核苷酸在二磷酸水平上还原而成的。核糖核苷酸还原酶催化此反应。

脱氧核苷酸的生成的反应过程

①嘌呤类似物:6-巯基嘌呤(6MP)、6-巯基鸟嘌呤、8-氮杂鸟嘌呤等。6MP应用较多,其结构与次黄嘌呤相似,可在体内经磷酸核糖化而生成6MP核苷酸,并以这种形式抑制IMP转变为AMP及GMP的反应。②氨基酸类似物:氮杂丝氨酸和6-重氮-5-氧正亮氨酸等。结构与谷氨酰胺相似,可干扰谷氨酰胺在嘌呤核苷

脱氧核苷酸组成结构及功能特点

脱氧核苷酸(deoxynucleotide)是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,简称DNA)的基本单位 ,是一类由嘌呤或嘧啶碱基 、脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的小分子化合物 ,是构成生物体遗传物质DNA的物质基础 。决定生物的多样性的就是脱氧核苷酸中四种碱基腺嘌呤 (ade

简述双脱氧核苷酸末端终止法

  双脱氧核苷酸末端终止法也称 Sanger法,是常用的方法进行核酸序列分析。其原理是利用四种2’,3‘双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)代替部分脱氧核苷三磷酸(dNP)作底物参与DNA的合成。 ddNTP与普通dNP的不同之处在于其脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基。 ddNTP可以在DNA聚合酶作用下通

关于脱氧核苷酸的基本信息介绍

  脱氧核苷酸(deoxynucleotide)是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,简称DNA)的基本单位 [1] ,是一类由嘌呤或嘧啶碱基 、脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的小分子化合物 ,是构成生物体遗传物质DNA的物质基础 。决定生物的多样性的就是脱氧核苷酸中四种碱基腺嘌

H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约

细胞生物学名词脱氧核苷一磷酸

中文名称:脱氧核苷一磷酸英文名称:deoxyribonucleoside monophosphate定  义:脱氧核苷的一磷酸酯,体内通常为5′-磷酸酯。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

末端脱氧核苷酸转移酶的简介

  【浓度】20u/ul  【性状】悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase,TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把

细胞生物学名词脱氧核苷酸

脱氧核苷酸(deoxynucleotide)是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,简称DNA)的基本单位  ,是一类由嘌呤或嘧啶碱基 、脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的小分子化合物 ,是构成生物体遗传物质DNA的物质基础 。决定生物的多样性的就是脱氧核苷酸中四种碱基腺嘌呤 (ad

关于脱氧核苷酸的基本信息介绍

  脱氧核苷酸(deoxynucleotide)是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,简称DNA)的基本单位 [1] ,是一类由嘌呤或嘧啶碱基 、脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的小分子化合物 ,是构成生物体遗传物质DNA的物质基础 。决定生物的多样性的就是脱氧核苷酸中四种碱基腺嘌

反义寡脱氧核苷酸的结构组成

中文名称反义寡脱氧核苷酸英文名称antisense oligodeoxynucleotide定  义与靶核酸互补的、具有“反义功能”的DNA片段。用于阻断基因表达研究的人工合成片段,链长通常少于20个脱氧核苷酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

寡脱氧核苷酸的基本信息

中文名称寡脱氧核苷酸英文名称oligodeoxynucleotide定  义由20个以下脱氧核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成的化合物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是双脱氧核苷酸末端终止法?

双脱氧核苷酸末端终止法也称 Sanger法,是常用的方法进行核算序列分析。其原理是利用四种2’,3‘双脱氧核苷三磷酸(ddNP)代替部分脱氧核苷三磷酸(dNP)作底物参与DNA的合成。ddNTP与普通dNP的不同之处在于其脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基。 ddNTP可以在DNA聚合酶作用下通过其5′

双脱氧核苷酸末端终止法的概念

双脱氧核苷酸末端终止法也称 Sanger法,是常用的方法进行核酸序列分析。其原理是利用四种2’,3‘双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)代替部分脱氧核苷三磷酸(dNP)作底物参与DNA的合成。 ddNTP与普通dNP的不同之处在于其脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基。 ddNTP可以在DNA聚合酶作用下通过其

细胞化学词汇反义寡脱氧核苷酸

中文名称:反义寡脱氧核苷酸英文名称:antisense oligodeoxynucleotide定  义:与靶核酸互补的、具有“反义功能”的DNA片段。用于阻断基因表达研究的人工合成片段,链长通常少于20个脱氧核苷酸。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

脱氧核苷酸分解代谢反应基本过程

分解代谢反应基本过程是核苷酸在核苷酸酶的作用下水解成核苷,进而在酶作用下成自由的碱基及1-磷酸核糖。嘌呤碱最终分解成尿酸,随尿排出体外。黄嘌呤氧化酶是分解代谢中重要的酶。嘌呤核苷酸分解代谢主要在肝、小肠及肾中进行。嘌呤代谢异常:尿酸过多引起痛风症,患者血中尿酸含量升高,尿酸盐晶体可沉积于关节、软组织

细胞生物学名词脱氧核苷三磷酸

中文名称:脱氧核苷三磷酸英文名称:deoxyribonucleoside triphosphate定  义:脱氧核苷的三磷酸酯,体内通常为5′-三磷酸酯,如脱氧腺苷5′-三磷酸(dATP)、脱氧鸟苷5′-三磷酸(dGTP)、脱氧胞苷5′-三磷酸(dCTP)和脱氧胸腺苷5′-三磷酸(dTTP)。应用学

反义寡脱氧核苷酸的基本信息

中文名称反义寡脱氧核苷酸英文名称antisense oligodeoxynucleotide定  义与靶核酸互补的、具有“反义功能”的DNA片段。用于阻断基因表达研究的人工合成片段,链长通常少于20个脱氧核苷酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

经验交流(0)实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml)

双脱氧核苷酸的基本结构和组成成分

双脱氧核苷酸。这些核苷酸亦被称为2',3'-双脱氧核苷酸,常被简写为ddNTPs(ddGTP、ddATP、ddTTP与ddCTP)。

简述末端脱氧核苷酸转移酶的功能

  "末端转移酶"催化的加上核苷酸至DNA分子的3'末端。不像大多数的DNA聚合酶,它不需要一个模板。这种酶的优选底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotifes)至"钝末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end

3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约

细胞生物学名词脱氧核苷二磷酸

中文名称:脱氧核苷二磷酸英文名称:deoxyribonucleoside diphosphate定  义:脱氧核苷的二磷酸酯,体内通常为5′-二磷酸酯,如脱氧腺苷5′-二磷酸(dADP)、脱氧鸟苷5′-二磷酸(dGDP)、脱氧胞苷5′-二磷酸(dCDP)和脱氧胸腺苷5′-二磷酸(dTDP)。应用学科

关于双脱氧核苷酸末端终止法的介绍

双脱氧核苷酸末端终止法也称 Sanger法,是常用的方法进行核酸序列分析。其原理是利用四种2’,3‘双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)代替部分脱氧核苷三磷酸(dNP)作底物参与DNA的合成。 ddNTP与普通dNP的不同之处在于其脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基。 ddNTP可以在DNA聚合酶作用下通过其

人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒

人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 BrdU 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BrdU与单抗结合,加入生物素化的抗人BrdU,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显