3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

经验交流(0)实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约 2Ci/mmol) 安全提示 处理 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷时要谨慎, 因为它是放射活性物质和基因产物!要遵照当地指南操作(见 7.7 节)。 多孔培养板,内含 13 mmThermanox 盖片(Nalge Nunc) 非无菌 血球计数板或电子计数器 D-PBSA 醋酸甲醇(1 份冰醋酸加入 3 份甲醇),冰冷,新鲜配制 显微镜载片 封胶(如 DPX 或 Permount) 三氯乙酸(TCA ),0.6mol/L ,冰冷 去离子水 甲醇 操作步骤 1. 在装有盖片的 24 孔培养板中,以 2X1......阅读全文

关于双脱氧核苷酸末端终止法的介绍

双脱氧核苷酸末端终止法也称 Sanger法,是常用的方法进行核酸序列分析。其原理是利用四种2’,3‘双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)代替部分脱氧核苷三磷酸(dNP)作底物参与DNA的合成。 ddNTP与普通dNP的不同之处在于其脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基。 ddNTP可以在DNA聚合酶作用下通过其

细胞生物学名词脱氧核苷二磷酸

中文名称:脱氧核苷二磷酸英文名称:deoxyribonucleoside diphosphate定  义:脱氧核苷的二磷酸酯,体内通常为5′-二磷酸酯,如脱氧腺苷5′-二磷酸(dADP)、脱氧鸟苷5′-二磷酸(dGDP)、脱氧胞苷5′-二磷酸(dCDP)和脱氧胸腺苷5′-二磷酸(dTDP)。应用学科

关于末端脱氧核苷酸转移酶的使用介绍

  末端转移酶在分子生物学中的应用。它可以被用来在cDNA末端的快速扩增(RACE)中来添加"核苷酸"(nucleotide),然后可以用来作为在后续PCR的"引物"(primer)的模板。它也可以用于添加标记放射性同位素的核苷酸,例如在TUNEL检测(末端脱氧核苷酸转移酶"dUTP缺口末端标记"(

小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒操作步骤

我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)水平。

方案21.11-3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

            实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤 材料

PCR反应体系(缓冲液、脱氧核苷三磷酸、引物、模板与DNA聚...

PCR反应体系(缓冲液、脱氧核苷三磷酸、引物、模板与DNA聚合酶)1.缓冲液标准的缓冲液含 10mM Tris·HCl , pH 为 8.3-9.0(室温),而在延伸温度(72 ℃)下,pH 值接近 7.2 。缓冲液中含有一种二价阳离子,用于激活 DNA 聚合酶的活性中心,一般使用 Mg2+ ,

基因扩增技术—聚合酶链反应影响因素三磷酸脱氧核苷酸的介绍

  四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)是DNA合成的基本原料,PCR反应中dNTP含量太低,基因扩增技术—聚合酶链反应扩增产量太少、易出现假阴性。过高的dNTP浓度会导致聚合将其错误掺入(即所谓的“热力背信”),因此应当避免。一般认为最适的dNTP浓度为50~200μmol

如何看脱氧核糖核酸(DNA)测序报告单

脱氧核糖核酸,就是DNA.核酸分脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)脱氧核糖,是五碳糖的一种,脱氧核糖是脱氧核苷酸的组成成分.脱氧核苷酸是由一分子脱氧核糖,一分子含氮碱基,一分子磷酸组成.脱氧核苷酸是脱氧核糖核酸的基本单位,脱氧核糖核酸就是由许多个脱氧核苷酸缩合而成.脱氧核糖核酸(DNA),就

DNA复制的计算规律

DNA复制的计算规律:每次复制的子代DNA中各有一条链是其上一代DNA分子中的,即有一半被保留。一个DNA分子复制n次则形成2n个DNA,但含有最初母链的DNA分子有2个,可形成2Ⅹ2n条脱氧核苷酸链,含有最初脱氧核苷酸链的有2条。子代DNA和亲代DNA相同,假设x为所求脱氧核苷酸在母链的数量,形成

DNA母链的复制方式

①时期:有丝分裂间期和减数第一次分裂的间期。②场所:主要在细胞核中。③条件:a、模板:亲代DNA的两条母链;b、原料:四种脱氧核苷酸为;c、能量:(ATP);d、一系列的酶。缺少其中任何一种,DNA复制都无法进行。④过程:a、解旋:首先DNA分子利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把两条扭成螺旋的

核苷类逆转录酶抑制剂的种类

(1)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分被修饰,包括:AZT,d4T和ABC;(2)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分没有被修饰,包括:ddI和ddC;(3)2',3'-二脱氧核苷类的L型对映体,包括:3TC。

DNA连接酶同聚物加尾法连接法的介绍

  这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA,以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混

关于单分子测序技术—第三代测序技术的关键问题分析

  第一:第三代测序技术的关键问题— 因为在显微镜实时记录DNA链上的荧光的时候,DNA链周围的众多的荧光标记的脱氧核苷酸形成了非常强大的荧光背景。这种强大的荧光背景使单分子的荧光探测成为不可能。Pacific Biosciences公司发明了一种直径只有几十纳米的纳米孔[zero-mode wav

DNA裂解分析实验_JAM分析

实验材料细胞试剂、试剂盒胸腺嘧啶脱氧核苷HBSSPBSEDTA仪器、耗材新鲜培养基组织培养板实验步骤1. 实验前一天,将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地渗入 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。2. 收获细胞,在新鲜培养基中以 1X106 细胞/ml 重悬,用 5 μCi/ml [3H]-胸腺嘧

脱氧核糖核酸的主要组成成分

DNA由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶(C)。

组成核酸的基本成分有哪些

核酸是生物体内的高分子化合物。它包括脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)两大类。DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的,由C、H、O、N、P5种元素组成。单个核苷酸是由含氮有机碱(称碱

分子遗传学词汇链终止子

中文名称:链终止子英文名称:chain terminator定  义:可使DNA复制链停止延伸的化合物。如2',3'-双脱氧核苷三磷酸为2'-脱氧核苷三磷酸的类似物。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

脱氧核糖核酸的物质结构

  脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),又称去氧核糖核酸,是染色体的主要成分,是基因的物质基础。  DNA的结构:DNA最重要的特征是碱基序列,由四种脱氧核糖核苷酸排列成长链,两条长链互绕而成稳定结构,进而再有其他卷曲和结构。因此,人类按层次把DNA的结构划分为一级结

关于脱氧核糖核酸的物质结构的介绍

  脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),又称去氧核糖核酸,是染色体的主要成分,是基因的物质基础。  DNA的结构:DNA最重要的特征是碱基序列,由四种脱氧核糖核苷酸排列成长链,两条长链互绕而成稳定结构,进而再有其他卷曲和结构。因此,人类按层次把DNA的结构划分为一级结

脱氧核糖核酸的物质结构

  脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),又称去氧核糖核酸,是染色体的主要成分,是基因的物质基础。  DNA的结构:DNA最重要的特征是碱基序列,由四种脱氧核糖核苷酸排列成长链,两条长链互绕而成稳定结构,进而再有其他卷曲和结构。因此,人类按层次把DNA的结构划分为一级结

脱氧核糖核酸的物质结构

  脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),又称去氧核糖核酸,是染色体的主要成分,是基因的物质基础。  DNA的结构:DNA最重要的特征是碱基序列,由四种脱氧核糖核苷酸排列成长链,两条长链互绕而成稳定结构,进而再有其他卷曲和结构。因此,人类按层次把DNA的结构划分为一级结

脱氧核糖核酸的物质简介

DNA由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶(C)。DNA 分子结构中,两条多脱氧核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕,构成双螺旋结构。脱氧核糖-磷酸链在螺旋结构的外面,碱基朝向里面。两条多脱氧核苷酸链反向

脱氧腺苷酸的理化特性

生物体内核酸的主要成分是DNA和RNA,其中构成RNA的核苷酸是由碱基+核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的,构成DNA的脱氧核苷酸是由碱基+脱氧核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的。组成DNA的脱氧核苷酸根据碱基对的不同,分为dAMP,dTMP,dGMP,dCMP,其中dAMP表示腺嘌呤脱氧核糖核

脱氧腺苷酸的物质特性

生物体内核酸的主要成分是DNA和RNA,其中构成RNA的核苷酸是由碱基+核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的,构成DNA的脱氧核苷酸是由碱基+脱氧核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的。组成DNA的脱氧核苷酸根据碱基对的不同,分为dAMP,dTMP,dGMP,dCMP,其中dAMP表示腺嘌呤脱氧核糖核

脱氧腺苷单磷酸的物质信息

生物体内核酸的主要成分是DNA和RNA,其中构成RNA的核苷酸是由碱基+核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的,构成DNA的脱氧核苷酸是由碱基+脱氧核糖+磷酸以一定的方式连接组合而成的。组成DNA的脱氧核苷酸根据碱基对的不同,分为dAMP,dTMP,dGMP,dCMP,其中dAMP表示腺嘌呤脱氧核糖核

胸腺嘧啶的基本用途

是合成抗艾滋病药物AZT、DDT及相关药物的关键中间体。上游原料:冰醋酸、醋酸丁酯、甲醇、甲基丙烯酸甲酯、尿素、盐酸、乙醇。也可用化学方法合成。用于药物制造。胸腺嘧啶是脱氧核糖核酸中的碱基之一。可与脱氧核糖结合形成胸腺嘧啶的脱氧核苷,其5-位甲基上的氢为氟取代后的产物称为三氟代胸腺嘧啶脱氧核苷,用做

细胞化学基础脱氧核糖核酸物质简介

DNA由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶(C)。电子显微镜下的单链、环状、超螺旋DNA 碱基互补配对原则 DNA 分子结构中,两条多脱氧核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕,构成双螺旋结构。脱氧核糖-磷

关于单分子测序技术—第三代测序技术的原理介绍

  第三代测序技术原理主要分为两大技术阵营:  第一大阵营是单分子荧光测序,代表性的技术为美国螺旋生物(Helicos)的SMS技术和美国太平洋生物(Pacific Bioscience)的SMRT技术。脱氧核苷酸用荧光标记,显微镜可以实时记录荧光的强度变化。当荧光标记的脱氧核苷酸被掺入DNA链的时

细胞增殖的密度限制实验

实验方法原理细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料传代用的细胞                                                          试剂、试剂盒生长培养基              

细胞增殖的密度限制实验

实验方法原理细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料传代用的细胞试剂、试剂盒生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶仪器、耗材24 孔培养板培养皿实验步骤一、材料无菌1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基(无