外植体的灭菌
接种用的材料表面,常常附有多种多样的微生物,这些微生物一旦带进培养基,就会迅速滋生,使实验前功尽弃。因此,材料在接种前必须进行灭菌。灭菌时,既要将材料上附着的微生物杀死,同时又不能伤及材料。因此,灭菌采用何种药剂,什么浓度,处理多长时间,均应根据材料对药剂的敏感情况仔细敲定。经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉、溴水和低浓度的氯化汞等。使用这些灭菌剂,都能起到表面杀菌的作用。但氯化汞灭菌后,汞离子在材料上不易去掉,必须将材料用无菌水多清洗几次。外植体的灭菌工作应在接种室或接种箱内无菌的条件下进行。花药的灭菌用于组织培养的花药,按小孢子发育时期要求,实际上大多没有成熟,花药外面有萼片、花瓣或颖片、稃片保护着,通常处于无菌状态。所以一般只对整个花蕾或幼穗进行灭菌。如茄(Solanum melongena L.)的花药,灭菌时先去掉花蕾的萼片,用70%酒精擦洗花瓣,然后将整个花蕾浸泡在饱和漂白粉上清液中10分钟,再经无......阅读全文
干热灭菌与湿热灭菌的区别
干热灭菌与湿热灭菌是实验操作常用的杀菌方式,那它们有何不同呢.(一)干热灭菌 1.焚烧:是一种彻底的灭菌方法,但仅适用于废弃物品或尸体等。 2.烧灼:直接用火焰灭菌,适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌. 3.干烤:用鼓风干燥箱灭菌。一般加热至160℃~170℃经
湿热灭菌和干热灭菌的区别
湿热灭菌 在同样的温度下,湿热的杀菌效果比干热好,其原因有:①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分,因较大同一温度的干热空气中易于凝固。②温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热,加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所要温度低,如在
干热灭菌器的灭菌原理
干热灭菌器采用最先进的碳纤维远红外加热管作为热源,使灭菌腔能迅速达到预设温度。并采用先进的空气涡流机及特殊风道的设计,从而更好的实现了强制对流,使得温度更均衡。灭菌介质通常为被灭菌品所处湿度下的热空气干热灭菌是使微生物氧化而不是蛋白质变性,从而达到灭菌的目的。
高压灭菌器对于不同灭菌物品的灭菌操作要求
将灭菌物品放入腔体摆放整齐,需注意的是,物品摆放的高度要低于腔体,以免堵塞顶部排气阀门,造成危险。不同的灭菌物灭菌的方法和时间都有区别,特别要注意的是敷料的灭菌,敷料是装在不锈钢器皿中的,多数用户都忘记打开敷料盒的通气小孔,以致于每次灭菌达不到试纸条的颜色,造成灭菌失败。一些器具的灭菌是用布带扎
叶盘转化法
实验概要本实验介绍了根癌农杆菌介导的植物转化-叶盘转化法的原理及操作步骤。了解根癌农杆菌介导的植物基因转化的方法和用途,掌握叶盘转化法的基本原理和操作。实验原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应,向植物受伤组织集中。经共培养后,受伤部位的化学
如何应对植物组培过程中的污染问题?
植物组织培养是20世纪初发展起来的一门新兴技术,随着这项技术的日益完善,其应用也越来越广泛。但是在组织培养过程中,常常会遇到污染问题使实验无法进行下去,甚至导致整个实验失败,给科研和工厂化生产带来损失。污染是指在植物组织培养过程中,培养基和培养材料滋生杂菌,最终导致培养失败的现象。常见的污染类型包括
组培技术之春兰组培快速繁殖
1、建立小型家庭组织培养室,自制设备。众所周知该项工作要在无菌条件下进行。为此,必须研制密封良好的玻璃接种箱、净化空气装置,采取种种技术措施,以降低转瓶污染率。用酒精喷雾降尘,成功率上升为92%,这就给筛选最佳培养基配方赢得了时间,奠定了良好的基础。2、无菌操作。所有接触培养基、能耐高温的器 用
高压灭菌器的灭菌方法原理
高压灭菌器是用比常压高的压力,把水的沸点升至100℃以上的高温,而进行液体或器具灭菌的一种高压容器。高压蒸气灭菌方法的原理是水在大气中100℃左右沸腾,水蒸气压力增加,沸腾时温度将随之增加,因此,在密闭的高压蒸气灭菌器内,当压力表指示蒸气压力增加到15磅(1.05 kg/cm)时,温度则相当于121
如何验证高压灭菌器灭菌效果
微生物实验室最少不了的实验仪器之一就是灭菌器,一般实验室常用的是高压蒸汽灭菌器。GB 4789.1-2016中要求:实验设备应定期进行检查和/或检定(加贴标志)、维护和保养,以确保工作性能和操作安全。但你的灭菌器有没有类似的检查呢?如果要做类似的验证,又需要怎么做呢?今天就给大家汇总一下高压
高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证!
高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求,这是微生物实验的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格是实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解,不需高压灭菌外,大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底,直接关系到对样品的无菌试验结果。因此必须认真
压力蒸汽灭菌器的灭菌操作流程
(一)清洗 由于物品清洁与否影响灭菌效果,除污物和液体外,对于实验室使用的物品应该尽量先清洗干净后灭菌,物品洗涤后,应干燥并及时包装: (二)包装 1.包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透人。市售普通铝饭盒与搪瓷盒,不得用于装放待灭菌的物品,应用自动启闭式或带通气孔的器具装放; 2.常用的包
高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证!
高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求,这是微生物实验的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格是实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解,不需高压灭菌外,大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底,直接关系到对样品的无菌试验结果。因此必须认真
高压灭菌器的高压灭菌原理
在密闭的灭菌器内蒸气不外溢,压力不断上升,使水受热达到沸点,灭菌器内温度随之升高;在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此温度下,可以很快杀死各种细菌及高度耐热的芽孢。电磁阀控制的灭菌器(全自动型)逐次排放掉空气,剩余全是蒸气,灭菌进而彻底。
干热灭菌器的灭菌效果检测
灭菌效果检测 灭菌效果监测是评价其灭菌设备运转是否正常、灭菌药剂是否有效、灭菌方法是否合理、灭菌效果是否达标的主要手段。主要的灭菌效果监测方法包括:物理监测法、化学监测法、生物监测法及化学消毒剂的监测等 。
压力蒸汽灭菌器的灭菌操作流程
(一)清洗 由于物品清洁与否影响灭菌效果,除污物和液体外,对于实验室使用的物品应该尽量先清洗干净后灭菌,物品洗涤后,应干燥并及时包装: (二)包装 1.包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透人。市售普通铝饭盒与搪瓷盒,不得用于装放待灭菌的物品,应用自动启闭式或带通气孔的器具装放; 2
实验室灭菌技术高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法的注意事项第一,无菌包不宜过大(小于50cm×30cm×30cm),不宜过紧,各包裹间要有间隙,使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。消毒前,打开贮槽或盒的通气孔,有利于蒸汽流通。而且排气时使蒸汽能迅速排出,以保持物品干燥。消毒灭菌完毕,关闭贮槽或盒的通气孔,以保持物品的无菌状态。第二,布类物
简介干热灭菌器的灭菌方法
1. 灼烧灭菌法。利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。 2. 干热空气灭菌法。这是实验室中常用的一种方法,即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至160°C,恒温1小时即可。此法
实验室灭菌技术干热灭菌法
干热灭菌比湿热灭菌需要更高的温度与较长的时间。(1)干烤:利用干烤箱,加热160~180℃2小时,可杀死一切微生物,包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。(2)烧灼和焚烧:烧灼是直接用火焰杀死微生物,适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是彻底的消毒方法,但只限于处理废弃的污
高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证!
高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求,这是微生物实验的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格是实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解,不需高压灭菌外,大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底,直接关系到对样品的无菌试验结果。因此必须认真
实验室灭菌技术化学消毒灭菌法
利用化学药物渗透细菌的体内,使菌体蛋白凝固变性,干忧细菌酶的活性,抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构,改变其渗透性,破坏其生理功能等,从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强,可以达到灭菌,又称为灭菌剂。凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品,如锐利的金属、刀、剪、缝
如何检测高压灭菌锅的灭菌效果?
高压灭菌锅是实验室中常见的一种杀菌、灭菌设备,在很多行业中都有重要的应用,具有受热面积大,热效率高、加热均匀、液料沸腾时间短、加热温度容易控制等优点,不过随着使用时间的延长,以及高压灭菌锅设备的老化,会导致仪器的杀菌效果降低,进而影响其他试验的结果,因此这个时候要避免由于高压灭菌锅杀菌不彻
高压灭菌锅灭菌时间,温度,压力是多少
具体要求是,温度121度,压力0.12MPa,时间不小于8分钟.
高压蒸汽灭菌器灭菌时间的控制
高压蒸汽灭菌器灭菌时间的控制不是一定的,灭菌温度越低,需要的灭菌时间越长;灭菌温度越高,需要的灭菌时间越短;压力蒸汽灭菌的时间,要从灭菌器柜室内达到灭菌要求温度时算起,直至灭菌完成为止。 高压蒸汽灭菌器灭菌时间包括: ①穿透时间,从锅内达到灭菌温度开始计算时间,到锅内Z难达到的部位也达到此温
高压蒸汽灭菌在灭菌中应该注意什么?
高压蒸汽灭菌具有灭菌速度快、效果可靠、温度高、穿透力强等优点,使用不当,可导致灭菌的失败。在灭菌中应注意的几点: 一、消毒物品的初步处理。 凡接触过病原微生物的医疗器械、被单、衣物等均应先用化学消毒剂进行消毒,然后按照常规清洗。特别是传染病房用后的各类物品,要严格把关,先严密消毒后,
植物组织培养的流程
一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤:(1)准备阶段查阅相关文献,根据已成功培养的相近植物资料,结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基,并经高压灭菌或过滤除菌后备用。(2)外植体选择与消毒选择合适的部位作为外植体,采回后经过适当的
橡皮树组培
一、材料处理1. 外植体选择在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。2. 材料的处理与灭菌将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3 -5cm 左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10 -20min ,自来水冲洗20 -30min 。在超净台上将预处理后的外植体用75
橡皮树组培及成品苗养护
一、材料处理1. 外植体选择在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。2. 材料的处理与灭菌将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3 -5cm 左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10 -20min ,自来水冲洗20 -30min 。在超净台上将预处理后的外植体用75
干热灭菌
实验概要1.了解干热灭菌的原理和应用范围。 2.学习干热灭菌的操作技术。实验原理干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热
消毒与灭菌
实验概要消毒(disinfection)与灭菌(sterilization)两者的意义有所不同。消毒一般是指消灭病原菌和有害微生物的营养体而言,灭菌则是指杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子。消毒与灭菌的方法很多,一般可分为加热、过滤、照射和使用化学药品等方法。实验步骤 一、加热法 又分干热灭菌和
灭菌和消毒
消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用,其实它们的含义是有所不同的。消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法,而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物,使之呈无菌状态。一、物理方法1、温度 利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物