组织培养培养基配制、灭菌及保存
培养基的配制1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。4、用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入3中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀,并用pH试纸测其pH值,直到将培养基的pH值调到5.8。5、将配好的培养基,用漏斗分装到三角瓶(或试管)中,并用棉塞塞紧瓶口,瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。培养基的成分比较复杂,为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉,可以准备一份配制培养基的成分单,将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时,按表列内容顺序,按项按量称取,就不会出现差错。培养基的灭菌及保存灭菌: 培养基配制完毕后,应立即灭菌。培养基通常应......阅读全文
配制组织培养培养基
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 ②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,
组织培养培养基配制
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,
组织培养培养基配制、灭菌及保存
培养基的配制1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000
组织培养中培养基配制灭菌及保存操作流程
培养基的配制 1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂 放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂 加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入
植物组织培养基母液配制的若干关键环节
植物组织培养(plant tissue culture)是指植物的任何器官、组织或细胞,在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中,使其生长、分化形成完整植株的过程.植物组织培养具有取材少,培养材料经济;人为控制培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁殖率高;管
组织培养常用培养基
组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下:MS培养基 MS
植物组织培养基成分
1. 培养基的配制注意事项 植物组织培养最常用到MS培养基,包含十几种化合物。因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀,影响培养基的营养成分,准备MS培养基需要配制多种高倍母液。且配制母液时,尤其涉及大量元素的母液时,一定要等一种成分溶解之后,再缓慢的添加另一种成分,切记“一锅煮”,即不能将各
SOC培养基配制
成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。
简述培养基配制
一、配制用水 培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的 双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。
培养基的配制
1.配料 配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。 2.溶解 淀粉溶解:少量冷水调成糊状 加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
培养基的配制
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HC
培养基配制方法
配制培养基有两种方法可以选择:一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、B5等。
培养基的配制
一、配制用水 培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的 双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。
培养基的配制
培养基的配制:1、称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。2、加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断
天然培养基配制
实验方法原理 鸡血浆为最早用于培养的液体,含有纤维蛋白原和一定的营养成分,当与鸡胚胎汁混合后,能发生凝固,构成细胞生长的环境,利于细胞向三维空间生长,缺点是易于液化。因制备血浆后不再做无菌处理,全过程必须在严密无菌条件下进行。实验材料 雄鸡试剂、试剂盒 肝素生理盐水酒精仪器、耗材 手术架棉球注射器离
培养基如何配制
1.牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化钠0.5g,琼脂 1.5g,水 100ml在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调
LB培养基配制
将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
外周血培养基配制
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HC
TB培养基配制
将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压
固体培养基配制
试剂、试剂盒 琼脂胰化蛋白胨NaClNaOH四环素仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 一、极限培养基平板800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml 培养基(每升培
培养基的配制
一、 仪器 设备及 试剂 电炉 天平(0.0001 g) 高压灭菌锅 量筒:l0 ml、20 ml、100 ml、500 ml 烧杯:1000 ml、500 ml、250 ml 移液管:1 ml、2 ml、 5 ml 吸管若干、记号笔
SOB培养基配制
将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1 mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
培养基的配制
1.配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量。2.溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,边加热边搅拌以防止烧焦。3.调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4.过滤:滤纸或棉花进行过滤。5.分装:一般培养基放在三
组织培养常用液的配制实验
实验方法原理 胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相互离散。胰蛋白酶的活力是用解离酪蛋白的能力表示的。实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 D-HanksDulbeccoNaHCO3仪器、耗材 滤纸玻璃棒实验步骤 1. 将D
组织培养常用液的配制实验
胰蛋白酶溶液的配制法 pH调整液的配制实验 实验方法原理 胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。主要作用是使
天然培养基配制实验_胶原的配制
实验方法原理胶原是细胞生长良好的基质,它是从动物特定组织中用人工法提取出的,利于组织和细胞的固定,亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着,能改善细胞表面性质,促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等,其中以鼠尾胶原最为常用和制备简便,可配制成0.1%—1%的醋酸溶液,实验材料鼠
极限培养基的配制
试剂、试剂盒 水Na2HPO4KH2PO4NH4Cl抗生素仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。(1)5 X M9培养基,每升 30 g Na2HPO4 15 g K
极限培养基配制实验
试剂、试剂盒水Na2HPO4KH2PO4NH4Cl抗生素仪器、耗材玻璃瓶烧瓶实验步骤1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。(1)5 X M9培养基,每升 30 g Na2HPO4 15 g KH2P
外周血培养基配制方法
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(
丰富培养基配制实验
实验方法原理配制方法同极限培养基,但高压需25 min (除非特殊说明的),不需稀释。试剂、试剂盒胰化蛋白胨NaClNaOH甘油Na2HPO4KNO3仪器、耗材玻璃瓶烧瓶实验步骤1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。(1)H 培养基,每升10 g胰化蛋白胨8