三氟乙酸在流动相里有什么作用？
在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中，多使用三氟乙酸作为离子对试剂，流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作用，来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。三氟乙酸优于其他离子修饰剂的原因是它容易挥发，可以方便地从制备样品中除去。另一方面，三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于 200nm ，对多肽在低波长处的检测干扰很小。改变三氟乙酸的浓度，可以细微地调整多肽在反相色谱上的选择性。这一影响对于优化分离条件、增大复杂色谱分析（如多肽的指纹图谱）的信息量是非常有益的。三氟乙酸添加在流动相中的浓度一般为 0.1% ，在这个浓度下，大部分的反相色谱柱都可以产生良好的峰形，当三氟乙酸浓度大大低于这个水平时，峰的展宽和拖尾就变得十分明显。......阅读全文
液相色谱流动相注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
液相色谱质谱仪流动相的要求
流动相的要求 每次开机前，保证超纯水和流动相的新鲜，泵的各个管路不应余留上次残留的溶剂。 流动相需符合HPLC与LC-MS要求等级，流动相中尽量加易挥发的盐，尽量不使用表面活性剂之类； 否则容易导致离子抑制，表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据。 如果遇到离子抑制，可以把样品峰往后推
液相色谱流动相选择要点
1）流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2）纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。3）必须与检测
液相色谱的流动相的要求
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求：（1）能溶解样品，但不能与样品发生反应。（2）与固定相不互溶，也不发生不可逆反应。（3）粘度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效。（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶剂要不吸收紫外光。（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火，价格尽量低等
液相色谱流动相注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
高效液相色谱的流动相要点
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
液相色谱流动相的pH值
流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；
液相色谱流动相注意事项
一、流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中,溶剂应当易于除去,不
液相色谱的流动相怎么制备
照着要求制备呀，一般都给了流动相要求，照着配就行了，配置完要用0.45的膜虑过，再脱气，方可使用。
高效液相倒吸收的原因是什么
高效液相色谱以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 高效液相空白色谱柱出峰的原因？ 分析原因： 1.确定检测波长，如果是末端吸收，排除三氟乙酸的干
用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区
乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外，色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先，对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量
液相出现倒峰的原因
高效液相色谱，色谱柱是Kromasil C18（15cm*5Um），流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水，走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰，走了好几针空白，每针的响应都不同，有的很高，有的又很低，但杂峰一直存在，不像是色谱柱里有杂质，用流动相冲洗后依然出现此问题，什么原因？
流动相，吸附剂和被分离组分三者的关系
被分离组分在流动相与吸附剂两相之间吸附剂的不断吸附与流动相的不断解吸附，到达分离组分。
流动相的特点和应用
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
流动相的基本性质
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
关于流动相的特点介绍
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： （1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 （2）流动相与样品不产生化学反应 （3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的
流动相色谱柱怎么使用？
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
影响流动相强度的因素
流动相的强度对色谱的保留起到非常重要的作用。今天，我们就来探讨下影响流动相强度的因素。 1. 有机相比例 2. 有机溶剂种类： 在反相色谱中，常用的有机相为乙腈、甲醇、四氢呋喃。 在反相色谱中，流动相的有机相（通常用B%表示）比例越高，流动相强度越大，组分的保留因子k越小。 在日常的方
流动相和流量的选择
ESI和APCI分析常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液，如甲酸铵、乙酸铵等。HPLC分析中常用的磷酸缓冲液以及一些离子对试剂如三氟乙酸等要尽量避免使用，不得已时也要尽量使用低浓度。 流量的大小对LC-MS成功的联机分析十分重要。要从所用柱子的内径
凝胶色谱仪流动相
凝胶色谱仪流动相的作用原则上不象在其它液相色谱仪中那样重要，这是由于它的分离并不依赖于样品组分与填料和流动相之间的相互作用，因此对于流动相的选择考虑较为简单，主要要求粘度低、沸点高、能溶解多种大分子样品和能润湿填料等。为了减小溶剂粘度（以降低柱压）和增加样品的溶解度，色谱柱温度通常高于室温。流动相必
关于HPLC的流动相问题
1)PH值特别重要：一般C18柱PH小于3时，容易损坏色谱柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意选择试剂的截止波长：如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。 3)流速：流速要适当，否则影响峰形、浪费溶剂，一般常规
如何选择适当的流动相
要根据样品的性质、PH值、样品的溶解度,由样品在有机溶剂中溶解度的大小,初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物,进而推断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等,还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品,并通过实验判断.若样品溶于非极性溶剂,表明样品为非极性化合物,通常可以选吸附色谱法或
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
液相出现倒峰原因解析
高效液相空白色谱柱出峰的原因？ 高效液相色谱，色谱柱是Kromasil C18（15cm*5Um），流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水，走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰，走了好几针空白，每针的响应都不同，有的很高，有的又很低，但杂峰一直存在，不像是色谱柱里有杂质，用流动
液相出现倒峰是怎么回事
高效液相空白色谱柱出峰的原因？ 高效液相色谱，色谱柱是Kromasil C18（15cm*5Um），流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水，走空白色谱柱时在整个保留时间的中间位置出现较大的色谱峰，走了好几针空白，每针的响应都不同，有的很高，有的又很低，但杂峰一直存在，不像是色谱柱里有杂质，用流动
液相色谱流动相的性质要求
一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以
高效液相色谱对流动相的脱气
高效液相色谱对流动相的脱气脱气方式：在线脱气机脱气，前期流动超声波超声脱气； 系统中气泡的产生：流动相本身存在，梯度淋洗混合后放出气泡； 气泡的影响：存在于管路中，系统压力不稳定，实验结果有偏差；存在于单向阀中，易造成液体回流，流量不准确，甚至是不吸液；存在于检测器中，出现鬼峰，影响检测准确性。
高效液相色谱的流动相选择方法
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相色谱的流动相如何选择
由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是：（1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好的选择性。（2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的