三氟乙酸在流动相里有什么作用?

在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中,多使用三氟乙酸作为离子对试剂,流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作用,来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。三氟乙酸优于其他离子修饰剂的原因是它容易挥发,可以方便地从制备样品中除去。另一方面,三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于 200nm ,对多肽在低波长处的检测干扰很小。改变三氟乙酸的浓度,可以细微地调整多肽在反相色谱上的选择性。这一影响对于优化分离条件、增大复杂色谱分析(如多肽的指纹图谱)的信息量是非常有益的。三氟乙酸添加在流动相中的浓度一般为 0.1% ,在这个浓度下,大部分的反相色谱柱都可以产生良好的峰形,当三氟乙酸浓度大大低于这个水平时,峰的展宽和拖尾就变得十分明显。......阅读全文

效液相色谱流动相的溶剂选择

流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰

液相色谱流动相的性质要求

一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流

快速了解气相色谱流动相的作用

  色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等 。  特点  液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分

液相色谱流动相的选择要求

 在液相色谱分析中,除了固定相对样品的分离起主要作用外,流动相的恰当选择对改善分离效果也产生重要的辅助效应。  从实用角度考虑,选用作为流动相的溶剂应当价廉,容易购得,使用安全,纯度要高。除此之外,还应满足液相色谱分析的下述要求:  1 用作流动相的溶剂应与固定相不互溶,并能保持色谱柱的稳定性;所用

高效液相色谱流动相的选择原则

高效液相色谱仪分析时流动相的选择原则:1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相,应避免不必要的浪费,防止污染环境,危害身体健康。应该根据样哦数量,计算需要使用的溶剂体积,添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质,比如四氢呋喃在光照下就容易变质,甲醇或

液相色谱样品和流动相的处理

样品和流动相的处理溶解的样品进样前用滤膜过滤,以除去不溶物。如果必要,需进行样品的预处理。流动相中如有不纯物质将影响柱效,所以溶剂尽量使用色谱级别的,至少是分析纯级别,流动相使用前用微孔薄膜过滤。在流动相的输液管前安装过滤器。过滤器定期用甲醇超声清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。对于堵

高效液相色谱流动相和固定相

液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰

气相色谱术语(固定相和流动相)

1、 固定相:stationary phase 色谱柱内不移动的、起分离作用的物质。2、 吸附剂:adsorbent 具有吸附活性并用于色谱分离的固体物质。3、 固定液:stationary liquid 固定相的组成部分,指涂渍于载体表面上起分离作用的物质,在操作温度下是不易挥发的液体。4、 载体

三氟乙酸酐衍生化羟基后用什么溶剂溶解

紫外衍生化试剂 、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、...用有机溶剂萃取富集后,在一定温度下蒸发、浓缩,再以甲醇或乙腈溶解或稀释

用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别

乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先,对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量

用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别

乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先,对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量

用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别

乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先,对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量

用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别

乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先,对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量

用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别

乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以,除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外,色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先,对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量

高效液相色谱仪分析开发流动相调整的三个原则

高效液相色谱仪分析与开发流动相调整的三个原则是从强到弱、三重规则和精细调整。一、由强到弱:一般使用90英寸的乙腈或甲醇水或缓冲溶液进行测试。可以快速得到分离结果,并根据峰值调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。二、三倍规则:对于有机溶剂(乙腈或甲醇)的量每减少10%,保留因子增加约3倍,这是三倍规则。调

液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则

液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则是由强到弱、三倍规则和粗调转微调。一、由强到弱:一般先用90%的乙腈或甲醇-水或缓冲溶液进行试验,可很快得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。二、三倍规则:每减少10%的有机溶剂(乙腈或甲醇)的量,保留因子增加约3倍,此为三倍规则。

气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速

因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变

气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速

 因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改

保留时间为何不恒定?

“液相故障与排除”是分析工作者经常遇到的问题,而这两者都与液相色谱方法中的保留时间变化有关,本文就这方面进行了一些探讨。 流动相组成的敏感度 流动相的组成对保留时间的影响是十分灵敏的,例如在使用反相液相色谱法分离两个分子量约为400Da,不含离子化基团的异构体,流动相为乙腈和水。通常这

实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十一

做多肽药物时遇到下列问题:1)基线不稳定波动大,流动相  A  :1%TFA 水溶液  B:1%TFA 乙腈溶液检测波长 210nm  流速 1.0ml/ml  什么原因?怎么解决?TFA 有什么作用?流动相中不加 TFA 见不到主峰,基线良好。2)做完肽类样品时怎么冲洗 C18 比较好;3)药典上

高效液相色谱流动相的性质要求

流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。

液相色谱实验中应用的流动相特点

液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:(1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。(2)流动相与样品不产生化学反应(3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的使用寿命(可运用

气相色谱法用得流动相是什么

气相色谱法用得流动相是气体,一般有氮气,氦气,氢气等,而液相色谱法流动相是液体,一般有乙腈,甲醇,水(反相),正乙烷,乙醇,异丙醇(正相)等。

液相色谱流动相的几点注意事项

一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去

液相色谱流动相具备的特点有哪些?

  液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:  (1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。  (2)流动相与样品不产生化学反应  (3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的

液相色谱流动相的优化组合方法

液相色谱应用广泛的是反相色谱,其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系,根据两者线性关系,可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱

常用的气相色谱流动相和固定相

极性比较相近的几种物质的混合物,是极性大还是极性小?可能要用极性柱子。 极性比较相近的几种物质的混合物用梯度洗脱试试。气相的流动相主要就是氮气或者氦气。极性相近的混合物那也得具体对象具体分析啊,现在柱子多的是,不同的目标物可以选用不同的色谱柱。

液相流动相怎样将乙腈换成甲醇

直接将色谱纯乙腈脱气换上就行 甲醇和乙腈混溶 没关系的直接换过来就行了,冲柱子的时候多用几个梯度,延长一点冲住时间就好了可以直接接上柱子 用100%的乙腈冲一段时间后再慢慢变化到50%的乙腈

反相液相色谱中流动相pH的确定

  反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定  反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中,选择正确的缓冲液PH值,对可离解的化合物分析的重现性十分重要,不恰当的PH值可能导致不对称峰,宽峰,分裂峰或肩峰,而尖锐的,对称的峰是定量分析中获得低的检测限以,两次分析之间较低的相对标准偏差(

液相流动相怎样将乙腈换成甲醇

直接将色谱纯乙腈脱气换上就行 甲醇和乙腈混溶 没关系的直接换过来就行了,冲柱子的时候多用几个梯度,延长一点冲住时间就好了可以直接接上柱子 用100%的乙腈冲一段时间后再慢慢变化到50%的乙腈