高效液相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用,高效液相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。流动相又称洗脱剂、淋洗液、展层剂或溶剂。一、流动相选择的一般要求:1、流动相的纯度。2、流动相与固定相不互溶,不发生化学反应。3、对样品要有适宜的溶解度。4、必须与检测器匹配。5、溶剂的粘度要小,以降低色谱柱的阻力。二、常用溶剂的极性顺序:水>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>二氧六环>四氢呋喃>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>异丙醚>二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油。三、流动相的选择:1、化学键合相色谱:(1)正相键合相色谱:常用非极性溶剂,样品组分的保留值可加入适当的有机溶剂(调节剂)调节。常用溶剂:氯仿、二氯甲烷、已腈和醇类等。(2)反相键合相色谱:多以水或无机盐缓冲液为主体,再加入一种能与水相溶的有机溶剂调节,如甲醇、乙睛和四氢呋喃等。2、离子交......阅读全文
常见色谱仪的色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。 1.液固色谱法:使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或
气相色谱和色谱理论的出现
1952年马丁和詹姆斯提出用气体作为流动相进行色谱分离的想法,他们用硅藻土吸附的硅酮油作为固定相,用氮气作为流动相分离了若干种小分子量挥发性有机酸。 气相色谱的出现使色谱技术从最初的定性分离手段进一步演化为具有分离功能的定量测定手段,并且极大的刺激了色谱技术和理论的发展。相比于早期的液相色谱,
气相色谱色谱柱的安装方法
一、进样应注意问题手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特快)
高效色谱仪的色谱柱简介
色谱柱是高效色谱仪的分离系统,是高效色谱仪的核心部件之一。一、柱形状:1、填充柱:有U型和螺旋型,一般内径为2~4mm,长度为1~3m。2、毛细管柱:呈螺旋型,一般内径为0.2~0.5mm,长度为30~300m。二、柱材质:不锈钢管和玻璃管。三、柱固定相:1、气液色谱仪的柱固定相由载体和固定液组成。
液相色谱仪—色谱柱的安装
a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0
色谱仪色谱峰的数学表达
色谱仪色谱峰的数学表达:一、零阶中心矩代表色谱峰的面积。二、一价原点矩代表色谱峰的保留值。三、二阶中心矩代表色谱峰的散度。四、三阶中心矩代表色谱峰的不对称性。五、四阶中心矩代表色谱峰的尖陡程度。
气相色谱色谱柱的安装方法
一、进样应注意问题手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特快),每次进
常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(1)
按色谱分离的机理来分,常用的色谱方法可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱和亲合色谱。一、吸附色谱(adsorption chromatography)吸附色谱是指混合物随流动相通过由吸附剂组成的固定相时,由于吸附剂对不同组分有不同的吸附力,从而不同组分随流动相移动的速度不同,最终可将混合
常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(2)
常用离子交换剂的类型见表2-1 表2-1 常用的离子交换剂的种类及解离基团 种类 解离基团 阳离子交换树脂 强酸型 弱酸型
色谱柱是色谱仪最重要的部件色谱柱的介绍
色谱柱是色谱仪最重要的部件(心脏)。通常用厚壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的,对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时,可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。柱子内径一般为1~6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm ,长度为15 ~30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5 ~10μm ,柱效以
常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(3)
(二)凝胶 凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体颗粒状物质,其内部都具有很微细的多孔网状结构。目前市场上供应的色谱用凝胶主要有交联葡凝聚糖、交联聚丙稀酰胺以及琼脂糖等。 交联葡聚糖,瑞典出品商品名称为Sephadex,国产商品名称为Dextran,它是由葡聚糖(右旋糖苷)和甘油通过醚桥
色谱塔板理论和色谱速率理论在色谱研究中的优缺点
塔板理论是基于热力学近似的理论,虽然能很好地解释色谱峰的峰型、峰高,客观地评价色谱柱地柱效,却不能很好地解释与动力学过程相关的一些现象。如色谱峰峰型的变形、理论塔板数与流动相流速的关系等。而速率理论是从动力学方面考虑的,和塔板理论可以互补。因此在色谱研究领域这两个理论是非常有用的。
做气相色谱和液相色谱时怎么样选择色谱柱
气相色谱柱选择:柱长:增加柱长可提高分离效果。但柱长过长,使分析时间延长。所以在满足一定分离度的条件下,应选用尽可能短的色谱柱。填充柱的柱内径一般为 3~6 mm,毛细管柱的内径0.1~0.5 mm。固定液的用量选择:担体的表面积较大时,固定液用量可多些,允许的进样量也相应增加。但从速率方程式的传质
高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点
高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点 :与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外,液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用,而且与固定相一
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响..
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响因素一、凝胶过滤色谱:一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有:1、凝胶本身性质:每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。2、色谱柱
离子色谱仪色谱泵系统介绍
色谱泵系统: 1、材质: 离子色谱的淋洗液为酸、碱溶液,与金属接触会对其产生化学腐蚀。如果选择不锈钢泵头,腐蚀会导致色谱泵漏液、流量稳定性差和色谱柱寿命缩短等。离子色谱泵头应选择全PEEK材质(色谱柱正常使用压力一般小于20MPa)。 2、类型: (1)单柱塞泵。 (2)双柱塞泵:
高效液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下,高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用 3~6 个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护:1、流动相和样液都需用 0.45um 孔径的滤膜过滤。2、加 3~5 cm 保护柱。3、进样阀进样。
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱,连接于仪器上后,应先试压,试漏,而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析,一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂,低沸点杂质,低分子量固定液等赶走,使记录器基线平直,并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程,从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
色谱仪色谱峰的对称性
色谱仪的进样量很小、样品浓度很低、在分配或吸附等温线的线性范围内的理想情况下,色谱峰的形状可近似地用高斯曲线描述。在实际的色谱过程中,样品从色谱柱中流出时,很少符合高斯分布,而是具有一定的不对称性,色谱峰的不对称程度用不对称因子As来定量。将10%色谱峰高处前半峰的宽度设为a,同高度处后半峰的宽度设
色谱仪的色谱流出曲线与基线
一、色谱仪的色谱流出曲线:是由色谱仪检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图。二、色谱仪的色谱基线:1、基线:仅有纯流动相通过色谱柱时的流出曲线。在稳定的条件下应是一条水平的直线。2、基线噪声:在没有样品进入检测器时,一定时间内基线发生起伏的信号。3、基线漂移:基线随时间定向的缓慢
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱,连接于仪器上后,应先试压,试漏,而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析,一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂,低沸点杂质,低分子量固定液等赶走,使记录器基线平直,并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程,从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会
液相色谱仪的色谱柱的安装
a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0
气相色谱柱维护和保养色谱柱
在实验过程中经常遇到的情况: ·新的色谱柱,直接上分析条件来分析样品,发现分离情况不稳定。 ·新的色谱柱,使用中发现压力突然升高。 ·新的色谱柱,发现分离度、保留时间发生了变化。 ·色谱柱使用不频繁,一开始分析样品效果比较好,但是,在使用过程中发现柱效下降快、峰形异常的情况。 ·色谱峰形
液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。此外,液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱,连接于仪器上后,应先试压,试漏,而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析,一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂,低沸点杂质,低分子量固定液等赶走,使记录器基线平直,并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程,从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)
衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱
色谱分析技术:吸附色谱法
吸附色谱法常叫做液-固色谱法(Liquid-Solid Chromatography,简称LSC),它是基于在溶质和用作固定固体吸附剂上的固定活性位点之间的相互作用。可以将吸附剂装填于柱中、覆盖于板上、或浸渍于多孔滤纸中。吸附剂是具有大表面积的活性多孔固体,例如硅胶、氧化铝和活性炭等。活性点位例如硅
高效液相色谱仪色谱柱的结构
色谱柱由柱节点、柱管和过滤器组成。柱节点是低死体积结构的螺纹组件。一端为7/16英寸外螺纹,另一端为3/16英寸内螺纹(国内外已标准化)7×16英寸外螺纹连接到1×4英寸圆筒管(Φ6.35mm),并在中间放置一个压力环进行密封3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(1.57mm)的连接管连接,中间放置一
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱,连接于仪器上后,应先试压,试漏,而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析,一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂,低沸点杂质,低分子量固定液等赶走,使记录器基线平直,并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程,从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
气相色谱法色谱柱的选择
气相色谱法色谱柱的选择柱温与温度控制程序一个已经拆开以显示出内部毛细管柱的气相色谱仪恒温箱气相色谱仪中的色谱柱放置于温度由电子电路精确控制的恒温箱内。(当分析者说“柱温”时,他实际上指的是恒温箱的温度。不过这种区别并不重要,因此在下文中对这两者并不作区分。)样品通过色谱柱的速率与温度正相关。柱温越高