凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响..

凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响因素一、凝胶过滤色谱:一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有:1、凝胶本身性质:每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。2、色谱柱装填的好坏:凝胶过滤色谱柱装填完后,一般可以用丙酮(或NaCl)测定柱效和峰对称性,一般对于平均颗粒直径在30~34微米的Superose PG、Superdex PG系列凝胶,柱效应在9000以上,而颗粒平均直径在90微米的Sepharose FF凝胶柱效应在3000以上。通常,越是分辨率高的细颗粒凝胶对于装柱的技术要求越高。除了柱效以外,影响分离的因素主要有:a、色谱柱的长短,一般较长的柱分离较好,L/D>20。但一般商用色谱空柱长100cm左右,最多可以装到90~95cm高左右,如果仍不能取得满意的分辨率,可以用两......阅读全文

凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响..

凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响因素一、凝胶过滤色谱:一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有:1、凝胶本身性质:每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。2、色谱柱

凝胶过滤色谱

根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

弱阳离子交换色谱中疏水作用对蛋白保留的影响

孙 萱, 杨 云, 耿信笃3 (西北大学现代分离科学研究所,现代分离科学省级重点实验室,教育部合成与 天然功能分子化学重点实验室,陕西西安710069) 摘 要:选取了四种常用的弱阳离子交换(WCX) 商品柱以研究标准蛋白在其上的色谱保留行为。发现在疏水色谱( HIC

弱阳离子交换色谱中疏水作用对蛋白保留的影响

由于用离子交换色谱(IEC)分离后所得的蛋白能保持较高的活性,且不用昂贵和有毒的有机溶剂作流动相,在蛋白质科学和蛋白药物领域中有着广泛的应用。为提高蛋白的质量回收率,IEC的固定相表面应具有尽可能高的亲水性,以消除因疏水性对蛋白产生的非特异性吸附。然而众所周知,在过去一个世纪以来所设计的一切色谱介质

凝胶过滤色谱-与凝胶渗透色谱的区别

凝胶过滤色谱 与凝胶渗透色谱的区别是凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。

常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(2)

常用离子交换剂的类型见表2-1  表2-1 常用的离子交换剂的种类及解离基团   种类 解离基团 阳离子交换树脂 强酸型   弱酸型

常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(3)

(二)凝胶 凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体颗粒状物质,其内部都具有很微细的多孔网状结构。目前市场上供应的色谱用凝胶主要有交联葡凝聚糖、交联聚丙稀酰胺以及琼脂糖等。 交联葡聚糖,瑞典出品商品名称为Sephadex,国产商品名称为Dextran,它是由葡聚糖(右旋糖苷)和甘油通过醚桥

常用的色谱方法(吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(1)

按色谱分离的机理来分,常用的色谱方法可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱和亲合色谱。一、吸附色谱(adsorption chromatography)吸附色谱是指混合物随流动相通过由吸附剂组成的固定相时,由于吸附剂对不同组分有不同的吸附力,从而不同组分随流动相移动的速度不同,最终可将混合

凝胶过滤色谱柱

凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分

疏水作用色谱概述

 疏水作用色谱始于1972年SHaltiel及其工作者,他们利用带有碳氢化合物配基的琼脂糖凝胶以“疏水亲和色谱”分离蛋白 质。在其他实验室内也进行了类似研究和探索,1976年Hofstee将这种类型的色谱命名为疏水作用色谱。1980 年前后,不少学者就疏水作用的机理、分离规律等进行了大量研究

凝胶渗透色谱GPC/凝胶过滤色谱GFC基础知识

    凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography, GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开),优点是:保留时间短,

疏水作用色谱的相关介绍

  HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可与固定相之间产生疏水作用而达到分离分析的目的,其比RP-GPLC 具有较少使多肽变性的特点。利用GIC 分离生产激素(GH)产品的结构与活性比EP-GPLC 分离的要稳定,活性较稳定。Geng 等利用HIC 柱的低变性特点,将大肠杆菌表达出的经盐酸胍乙啶变性得

离子交换色谱仪疏水性离子交换介质

离子交换色谱仪疏水性离子交换介质由基质、活性基团和可交换离子(反离子)组成,是一种与水亲和力较小的合成树脂,zui常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。一、按引入电荷基团的性质分类:1、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带

凝胶过滤色谱仪分类

凝胶过滤色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室凝胶过滤色谱仪和工业凝胶过滤色谱仪。2、按功能可分:分析型凝胶过滤色谱仪和制备型凝胶过滤色谱仪。3、按灵敏性可分:微量凝胶过滤色谱仪和痕量凝胶过滤色谱仪。4、按产地可分:国产凝胶过滤色谱仪和进口凝胶过滤色谱仪。5、按使用范围可分:专用型凝胶过滤色谱

凝胶渗透色谱市场概况和主要玩家

    凝胶渗透色谱法(Gel permeation chromatography,GPC)是一种基于尺寸排阻的色谱技术。它最常用于确定聚合物的分子量分布,以确认分析物的纯度,进一步用于聚合物的分离和表征。这是一种进行聚合物表征的专用方法,进而用于评估分析物的分子量分布。聚合物的总结意义重大,因为它

离子交换色谱仪疏水性离子交换剂分类

离子交换色谱仪疏水性离子交换剂由基质、活性基团和可交换离子组成,是一种与水亲和力较小的人工合成树脂,分类有多种。一、按引入电荷基团的性质可分为:1、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。按电荷基团酸性强弱可分为:(1)强酸型:

疏水色谱的原理和应用

  疏水色谱是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同,用流动相洗脱时,各组分迁移速度不同而达到分离的目的。流动相一般为pH 6-8的盐水溶液,具有对蛋白质的回收率高,蛋白质变性可能性小等优势。由于流动相中不使用有机溶剂,也有利于蛋白质保持固有的活性。   疏水作用色谱是在高离子强度的条件下,蛋白质

凝胶色谱仪的主要部件

GPC仪器主要由输液系统(柱塞泵)、进样器、色谱柱、检测系统(示差折光检测器、多波长UV、FTIR等)及数据采集与处理系统。

凝胶色谱仪的主要应用

a .生产工艺的选择选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺对聚碳酸酯分子量分布的影响见下图。从图中看出:三种不同工艺的聚合产物在高分子量尾端差别不大,但以PC-62(

凝胶色谱仪的主要应用

a .生产工艺的选择选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺对聚碳酸酯分子量分布的影响见下图。从图中看出:三种不同工艺的聚合产物在高分子量尾端差别不大,但以PC-62(

凝胶色谱仪的主要应用

a .生产工艺的选择选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺对聚碳酸酯分子量分布的影响见下图。从图中看出:三种不同工艺的聚合产物在高分子量尾端差别不大,但以PC-62(

凝胶色谱仪的主要应用

  1在聚合物生产及使用过程的应用  a .生产工艺的选择选择  什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺的聚合产物在高分子量尾端差别不大,但以PC-62(1)塔式连续聚合

凝胶色谱仪的主要应用

a .生产工艺的选择选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺对聚碳酸酯分子量分布的影响见下图。从图中看出:三种不同工艺的聚合产物在高分子量尾端差别不大,但以PC-62(

分配色谱,吸附色谱和离子交换色谱各是什么

吸附色谱吸附色谱利用固定相吸附中对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离,吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程吸附色谱的分配系数表达式如下:向左转|向右转其中Xa表示被吸附于固定相活性中心的组分分子含量,Xm表示游离于流动相中的组分分子含量。分配系数对于计算待分离物质组

下游纯化工艺简介4

2、离子交换色谱(ion exchange chromatography)蛋白质、多肽均属于两性电解质,在缓冲液pH小于其等电点时,带净正电荷,而在缓冲液pH大于其等电点时,带净负电荷。阴离子交换凝胶本身带有正电荷基团,阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上,再采用盐浓

凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析

体积排阻,也叫凝胶过滤,根据物质尺寸大小的不同分离。如果分子的尺寸大于树脂的最大孔径,这种分子就不能进入树脂颗粒内部,它所经过的有效体积最小,最先从洗脱液中流出。而小分子能够进入树脂的孔道中,经过的有效体积比较大,从洗脱液中流出较晚,分子量越小,流出越晚。  体积排阻层析可以用于纯化的*步,按分子量

柱层析原理及影响因素

  免疫亲和层析  原理:亲和色谱分离蛋白以一个蛋白与特异性配基配对到色谱基质上,且蛋白质与配基间具有可逆的相互作用作为基础。目标蛋白与配基之间的生物学相互作用,可以是由于静电学的相互作用或是分子间疏水的相互作用,也可以是范德华力或氢键结合力产生的。  影响因素:主要是亲和标签的完整程度,缓冲液的组

凝胶色谱

凝胶色谱1.原理凝胶色谱的原理比较特殊,类似于分子筛。待分离组分在进入凝胶色谱后,会依据分子量的不同,进入或者不进入固定相凝胶的孔隙中,不能进入凝胶孔隙的分子会很快随流动相洗脱,而能够进入凝胶孔隙的分子则需要更长时间的冲洗才能够流出固定相,从而实现了根据分子量差异对各组分的分离。调整固定相使用的凝胶

凝胶色谱法主要应用方向

凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

凝胶色谱仪主要应用介绍

主要应用1在聚合物生产及使用过程的应用a.生产工艺的选择选择什么样的工艺流程会直接影响产品的分子量及其分布。因此分析不同工艺流程的分子量分布为选择最佳的工艺提供依据。用凝胶色谱研究釜式、釜式连续以及塔式连续聚合等三种不同生产工艺对聚碳酸酯分子量分布的影响见下图。从图中看出:三种不同工艺的聚合产物在高