反相离子抑制色谱仪流动相的选择
采用反相色谱分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相pH值,抑制样品组分的解离、增加组分在固定相上的保留和改善峰形的反相液相色谱仪,称为反相离子抑制色谱仪。一、弱酸样品:对于弱酸样品,流动相pH值越小,组分k值越大,当pH值远远小于弱酸pKa值时,弱酸主要以分子形式存在。分离弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液。二、弱碱样品:对于弱碱样品,情况与弱酸样品相反。分离弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用,减轻或消除峰拖尾现象,在这种情况下有机胺(如三乙胺)称为减尾剂或除尾剂。 ......阅读全文
反相色谱分离极性物质的高水流动相的色谱填料塌陷
在如今的色谱分析应用中,反相色谱无疑是应用的zui为广泛的色谱分离模式.但是当用反相色谱法分离极性化合物时,因为溶解度的因素很多极性化合物更适用于用高水流动相,有的甚至要在非常高的水流动相时色谱柱才具有保留能力,一些非常高极性的化合物甚至要用100%的水作流动相.而反相色谱柱的固定相通常疏水性很强,
反相离子对色谱仪常用离子对试剂
反相离子对色谱仪离子对试剂种类决定于被测样品的性质,通常选用与被测样品电荷相反的离子对试剂。一、离子对试剂:烷基磺酸盐,如庚烷磺酸盐和樟脑磺酸盐等。主要应用对象:强碱、弱碱、儿茶酚铵和肽类。二、离子对试剂:烷基磺酸盐,如辛基和十二烷基磺酸盐等。主要应用对象:强碱、弱碱、儿茶酚铵和肽类。三、离子对试剂
在液固色谱中流动相选择
在液-固色谱中,选择流动相的基本原则是极性大的试样用极性较强的流动相,极性小的则用低极性流动相。为了获得合适的溶剂极性,常采用两种、三种或更多种不同极性的溶剂混合起来使用,如果样品组分的分配比k值范围很广则使用梯度洗脱
制备色谱分离纯化之流动相选择
制备色谱的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和分析色谱不同,在选用流动相时,还要考虑后续溶剂去除等分离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其中。这里小编介绍下制备色谱做分离纯化的流动相选择。 一般常用的正相,反相流动相 制备色谱纯
高效液相色谱仪维护保养技巧
高效液相色谱仪维护保养技巧流动相的要求液相色谱是指样品组分在柱填料和流动相之间进行的物质交换以达到分离的目的因此流动相要求具有以下特点:纯度流动相在使用前必须使用高效液相色谱仪试剂和过滤器去除颗粒杂质和其他物质(用0.45um或更细的膜过滤)杂质在色谱柱上的积累将影响色谱柱的使用寿命。溶解度样品的溶
气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速
因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改
气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速
因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变
液相色谱仪流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱仪系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸
液相色谱仪流动相的选用要求
液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求:HPLC中,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k值减小;较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加,相应的容量因子k值
液相色谱仪流动相脱气的办法
高效液相色谱仪所用的流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。才外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂形成
液相色谱仪对流动相的要求
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下特点:1 纯度 流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。溶剂所含杂质在柱上积累,会影响色谱柱的使用寿命。2 溶解度 样品的溶解度要适宜如果溶解度
高效液相色谱仪流动相的处理
高效液相色谱仪流动相的处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等。一、水的处理:水的等级分纯化水、蒸馏水和去离子水等。将一般的蒸馏水加入少许高锰酸钾,消耗水中的氧气,在 PH=9~10 的条件蒸馏,可用于梯度洗脱。二、溶剂的提纯:通常用蒸馏法可除去大部分有紫外吸收的杂质。三、溶剂的过滤与脱气:
高效液相色谱仪流动相的要求
高效液相色谱流动相是液体,对组分有亲合力,并参与固定相对组分的竞争,正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂与检测器匹配:对于紫外吸收检测器,不能用对紫外光有吸收的溶剂。对于示差折光检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,
液相色谱仪流动相的预处理
液相色谱仪流动相的预处理包括流动相过滤和脱气等。一、流动相过滤:所有溶剂使用前都必须经0.45μm或0.22μm滤膜过滤,以除去杂质微粒。色谱纯试剂也不例外,除非在标签上标明已过滤。用滤膜过滤时,要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或
液相色谱仪溶剂流动相的纯化
分析纯和优级纯溶剂在很多情况下可以满足液相色谱仪分析的要求,但不同的色谱柱和检测方法对溶剂的要求不同。目前液相色谱分析用的色谱纯溶剂除zui常用的甲醇外,其余多为分析纯,有时要进行除去紫外杂质、脱水和蒸馏等纯化操作。一、乙腈是常用的溶剂,分析纯乙腈中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯醇和噁唑等化合物,会产
液相色谱仪流动相脱气的办法
液相色谱仪所用的流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。才外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂形成有
液相色谱仪流动相脱气的原因
液相色谱仪所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵工作、柱分离效率、检测器灵敏度和基线稳定性,甚至无法检测。一、流动相中的溶解氧可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。二、溶解氧会引起溶剂pH变化,给分析结果带来误差。三、溶解氧能与某些溶剂(如甲醇和四氢呋喃)形成有紫外吸收的络
液相色谱仪对流动相的要求
液相色谱仪对流动相的要求:1.流动相:首先必须是HPLC级的,这一条相信大家都做到了。2.脱气:由于流动相里含有微量空气,经泵的压力作用,会在流通池里产生气泡,这对分析产生一定的影响,如噪音增大,甚至于掩盖信号峰。因此,流动相在使用前必须经超声脱气30分钟以上。3.过滤:由于流动相里有很微小
液相色谱仪流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱仪系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸
反相键合相色谱仪的分离机制
典型的反相键合相色谱仪是采用非极性键合相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。反相键合相表面具有非极性烷基官能团和未被取代的硅醇基,硅醇基具有吸附
液相色谱仪流动相如何贮存?
流动相一般储存在玻璃聚四氟乙烯或不锈钢容器中,但不能储存在塑料容器中因为许多有机溶剂如甲醇和乙酸可以从塑料表面沥滤增塑剂所以溶剂被污染这些被污染的溶剂,如果用于液相色谱,可能会导致柱效降低储存容器必须紧密封闭以防止由溶剂挥发引起的成分变化,从而防止氧气和二氧化碳溶解到流动相中。磷酸盐和醋酸缓冲液容易
高效液相色谱仪流动相要求
高效液相色谱仪流动相要求1.流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选择流动相时应考虑以下几个方面: ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱
高效液相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用,高效液相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。流动相又称洗脱剂、淋洗液、展层剂或溶剂。一、流动相选择的一般要求:1、流动相的纯度。2、流动相与固定相不互溶,不发生化学反应。3、对样品要有适宜
反相液相色谱中,流动相的ph应控制在什么范围内
在反相液相色谱中,流动相的pH值通常应控制在2-8的范围内。这个范围主要考虑到以下几个方面:硅胶基质的稳定性:反相色谱柱通常使用硅胶作为基质,而硅胶在高pH值下容易溶解,导致柱寿命缩短。因此,为了避免这种情况,pH值一般不超过8。样品的稳定性:许多生物样品和有机化合物在过酸或过碱的条件下可能会降解。
反相液相色谱中,流动相的ph应控制在什么范围内
一般是2~8,如果色谱柱填料被修饰过的,就可以更广泛点,比如OLAppleC18-EX,PH可以达到1~11.这个最好看色谱柱说明书。
C8反相液相色谱柱利用流动相和添加物的应用
C8反相液相色谱柱是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或
C8反相液相色谱柱利用流动相和添加物的应用
反相液相色谱柱是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间
C8反相液相色谱柱利用流动相和添加物的应用
C8反相液相色谱柱是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或
液相色谱对流动相选择的一般要求
液相色谱所采用的流动相通常为各种低沸点有机溶剂与水或缓冲溶液的混合物。为了保证色谱系统的分离过程可重复性,流动相所采用的溶剂必须具有较高的纯度和化学稳定性。从实用角度考虑,溶剂应价格低廉、容易购得且使用安全。对流动相选择的一般要求包括: 1 化学稳定性好,不与固定相和样品组分发生化学反应; 2
离子色谱流动相输运系统组成介绍
离子色谱仪器的输液系统包括贮液罐、高压输液泵、梯度淋洗装置等,与液相色谱的输液系统基本相似。 一、贮液罐溶剂贮存主要用来供给足够数量并符合要求的流动相,对于溶剂贮存器的要求是:(1)必须有足够的容积,以保证重复分析时有足够的供液;(2)脱气方便;(3)能承受一定的压力;(4)所选用的材质对所使用的溶