液相色谱仪反相色谱柱的平衡

液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中,新柱应先用10~20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱,一定确保分析样品所使用的流动相与乙腈-水互溶。每天用足够的时间以流动相平衡色谱柱,会在处理问题方面获得zui大的“补偿”,而且色谱柱的寿命会变得更长。平衡操作步骤:1、平衡开始时,将流速缓慢提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线。缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,需要较长时间来平衡。2、如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水“过渡”。即每天分析开始前,必须先用纯水冲洗30min以上,再用缓冲盐流动相平衡。分析结束后,必须先用纯水冲洗30min以上,除去缓冲盐之后,再用甲醇冲洗30min保护色谱柱。......阅读全文

反相液相色谱柱样品前处理

反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合

反相液相色谱柱样品前处理

反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合

反相液相色谱柱样品前处理

反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合

反相液相色谱柱样品前处理

反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合

正相和反相色谱柱的区别

  在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流

简述反相HPLC色谱柱的再生步骤

  1.取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。   2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。   3.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。   4.用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。   5.用25毫升正己烷冲洗色谱柱。

反相色谱柱的优点和影响因素

液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等

反相色谱仪色谱柱的维护与清洗

色谱柱是反相色谱仪最主要的部件,被测样品能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性作用。因此,应注意色谱柱的维护与清洗,以延长色谱柱的使用寿命。一、色谱柱清洗体积确定:色谱柱清洗体积一般是柱体积的10~20倍。根据柱内径和柱长计算出柱体积,清洗时间可计算出。二、色谱柱清洗:为了使被测样品和杂质不

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱?

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

反相键合相液相色谱仪概述

反相键合相液相色谱仪又称非极性键合相液相色谱仪,在液相色谱仪中占有重要地位。一、分离机理:有疏溶剂理论和双保留机理。1、疏溶剂理论:疏溶剂理论认为非极性烷基键合相是在硅胶表面蒙覆了一层以Si-C键化学键合的十八烷基(或其它烃基)的分子毛。溶质分子(分析物)有非极性部分和极性官能团部分组成。当溶质分

浅析液相色谱仪中正反相色谱置换现象

在液相色谱分析中关于正反相色谱的置换内容我们做以下总结: 1.首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现); 2.卸掉硅胶柱,封好保存; 3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次;

液相色谱仪色谱柱保护柱如何使用?

  色谱柱是液相色谱中重要的一个组成部分。众所周知,色谱是一种分离、分析手段,分离是其核心,而色谱柱担负的就是其分离作用,可以说,色谱柱就是液相色谱仪的心脏。保护柱则是为了降低分析柱受污染程度,延长分析柱使用寿命的重要组成部分。   如何使用保护柱   1、专柱专用,避免保护柱成为不同项目间的交叉污

探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu

探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测

色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

高性能聚合物基质反相色谱柱

图1.  ODP2 HP-4D与早期产品聚合物基质反相色谱柱(ODP-50 4D)相比,理论塔板数(N)提高了约2倍。 创新点: 与早期产品(ODP-50)比较理论塔板数提高了约2倍。 对高极性物质保留力强。 可以很好地分离蛋白质和药物。   图2. 各种色

反相液相色谱柱原理及运用维护

反相液相色谱柱是根据溶质、极性活动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱形式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是运用面较广的一种别离形式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,活动相多选用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶

常规反相色谱柱安装及使用维护指南

何谓常规反相色谱柱?在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如C18、C8、C4或苯基等键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中zui常使用的分离模式,而C18柱是zui常使用的反相色谱柱之一。新色谱柱开启和安装的推荐步骤:使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不

极性改性反相色谱柱有哪些新特性

Spursil HPLC 极性改性反相色谱柱是以高纯硅胶为基质,采用独特的极性改性技术生产的色谱柱。这个系列的色谱柱不但保留了传统硅胶基质反相色谱柱的性能,而且又增加了一些新的特性: * 填料表面具有极性基团,适合于高水相流动相条件下的分离;* 增强了对亲水性、极性化合物的保留能力;* 独特的选择性

如何对反相色谱柱进行保养和保存

色谱柱保存,要避免的是两点:细菌滋长导致的发霉以及因保存溶剂挥发导致的填料变干。有机相成分有杀菌作用,在保存试剂中含量不能太低;但100%有机相或接近100%有机相,因为挥发性太强也不好。所以80%上下甲醇含量的甲醇水作为保存溶剂是适宜的。当然,无论选什么作为保存试剂,色谱柱两端的Peek堵头是一定

液相色谱仪保护柱

 液相色谱仪保护柱是内径为1.0mm、2.1mm、3.2mm、4.6mm或10mm、20mm、40mm,长7.5mm、10mm或20~60mm的短填充柱,通常填充和分析柱相同的填料,可看作是分析柱的缩短形式,安装在分析柱前。其作用是收集、阻断来自进样器的机械和化学杂质,以保护和延长分析柱的使用寿命。

液相色谱仪色谱柱的柱材料及规格

 液相色谱仪色谱柱的柱材料及规格:  1 柱材料  常用内壁抛光的不锈钢管作色谱柱的柱管以获得高柱效。使用前柱管先用氯仿、甲醇、水依次清洗,再用50%的HNO3对柱内壁做钝化处理。钝化时使用HNO3在柱管内至少滞留10min,以在内壁形成钝化的氧化物涂层。    2 柱规格  一般采用直形柱管,标准

液相色谱仪色谱柱净化样品

用溶剂溶解的样品,多数组分在一定的时间内能完全从柱中流出来,不会造成危害。有些样品可能含有微粒物质,样品中的某种组分在柱头上沉积下来,组分子在固定相上保留很强,溶剂带走柱填料等,都会造成液相色谱仪色谱柱柱效下降或降低寿命,有必要采取措施防止色谱柱性能下降。如在光线照射下观察样品是浑浊的火带有乳白色,

液相色谱仪色谱柱填料选择

    色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。而对于液相色谱而言,色谱填料的选择有时候恰恰决定了样品分析效果的好快。今天小编就围绕常见的色谱填料种类,讲解一下,应该如何针对仪器使用环境对色谱填料进行合适的选择。   硅胶填料