反相键合相液相色谱仪流动相概述
反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低，洗脱能力越强。一、常用流动相：1、甲醇－水。2、乙腈－水。3、四氢呋喃－水。溶剂强度为水＜甲醇＜乙腈＜四氢呋喃。系统2较系统1好，原因如下：系统2的粘度较系统1小，柱效好。粘度降低，柱压降低，传质阻力降低（溶质扩散阻力降低）， 柱效升高。乙腈的紫外末端吸收较甲醇小，在低波长处测定时，基线波动较甲醇小，测定误差小。二、流动相的选择：1、二元溶剂系统：一般以洗脱能力zui弱的水作为底剂，再加入一定量的可与水互溶的有机极性调节剂。常用的极性调节剂为甲醇和乙腈。2、多元溶剂系统：在二元溶剂系统中加入少量的四氢呋喃，常能改善某些难分离的物质对的分离度。用水、甲醇、乙腈和四氢呋喃组成三元或四元溶剂系统，并进行优化，选出zui佳溶剂系统。三、溶质保留值随溶剂极性变化的一般规律：有机溶剂比例减小：1、溶剂的极性增加，洗脱能力降低，溶质的保留时间增加。2、不同溶质组分间的分离度增加。3、溶质的柱效降低。......阅读全文
键合相及其分离模式
键合相及其分离模式多数分析色谱是在通过硅胶表面共价键合了固定相来修饰了吸附性能的载体上进行的。或者说，填料表面通过涂布化学性质稳定的吸附层来修性。能和建合相形成化学性质稳定的键的基质只有硅胶和高聚物。硅胶表面可以通过硅烷化来衍生化。通常使用的HPLC填料是在硅胶吸附剂表面衍生一条长链的脂肪烃硅烷。这
键合相色谱仪键合相的性能指标与特点
键合相色谱仪的键合相是通过化学反应将官能团键合在键合相色谱仪的载体表面上所形成的固定相。一、性能指标：1、含碳量：指键合在硅胶表面上的烷基所含碳的质量占固定相质量的比例。含碳量随链长而增大，从3%～22%。2、覆盖度：指硅胶被键合后，参与反应的硅醇基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例。二、特点：1、使用
化学键合相色谱仪流动相的要求与常用溶剂
化学键合相色谱仪流动相由为底剂和洗脱剂组成。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分进行选择性分离。一、流动相的要求：1、溶剂具有稳定的化学性质。2、溶剂的选择与检测器相容。3、溶剂的粘度小。4、溶剂的沸点不能太低。5、溶剂的纯度高且价格便宜。二、常用溶剂：1、正相键
键合相气相色谱仪分类
键合相气相色谱仪分类有多种。 1、按分离目的可分：实验室键合相气相色谱仪和工业键合相气相色谱仪。 2、按功能可分：分析型键合相气相色谱仪和制备型键合相气相色谱仪。 3、按产地可分：国产键合相气相色谱仪和进口键合相气相色谱仪。 4、按进样自动性可分：自动进样键合相气相色谱仪和手动进样键合相气
键合相气相色谱仪分类
键合相气相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分：实验室键合相气相色谱仪和工业键合相气相色谱仪。2、按功能可分：分析型键合相气相色谱仪和制备型键合相气相色谱仪。3、按产地可分：国产键合相气相色谱仪和进口键合相气相色谱仪。4、按进样自动性可分：自动进样键合相气相色谱仪和手动进样键合相气相色谱仪。5、按分
正相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相，以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪，简称键合相色谱仪。固定相极性比流动相极性强的键合相色谱仪称为正相键合相色谱仪。一、固定相：在载体表面键合含中等极性或较强极性的官能团，如氰基（－CN）、氨基（－NH2）和二羟基等。二、流动相：以非极性
正相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相，以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪，简称键合相色谱仪。固定相极性比流动相极性强的键合相色谱仪称为正相键合相色谱仪。一、固定相：在载体表面键合含中等极性或较强极性的官能团，如氰基（－CN）、氨基（－NH2）和二羟基等。二、流动相：以非极性
液相色谱仪键合相为什么要封端？
液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前，键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si－O－Si－C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2，由于空间位阻效应，不可能将较大的有
高效液相色谱仪化学键合相解析
高效液相色谱仪化学键合相有 Si－O－C 键型、Si－N 或 Si－C 键型、Si－O－Si－C 键型等。一、Si－O－C 键型：酯化反应是最早用于制备键合相的反应。用硅羟基 Si－OH 和醇类 R－OH 通过酯化反应制得的单分子层硅酸酯易水解，醇解，热稳定性差，现已不大使用。二、Si－N 或 Si
液相色谱仪键合相的端基封尾
液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应，将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因：残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响，特别是在非极性键合相的情况下，硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附，使键合相的分离性能改变。二、方法：
液相色谱仪键合相为什么要封尾？
液相色谱仪键合相的封尾是用三甲基硅烷等小分子与键合了C18的硅胶进行进一步反应的化学处理过程。一、C18和其它键合相在发生键合反应时只能覆盖不到50%的硅胶表面，经封尾处理的硅胶基质固定相减小了溶质与固定相之间的次级相互作用，使分离效果明显改善。二、、硅胶表面未被键合的酸性硅羟基会与样品组分相互作用
正相与反相化学键合相色谱仪的比较
化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪，有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下：一、固定相极性： 1、正相化学键合相色谱仪：大。 2、反相化学键合相色谱仪：小。二、流动相极性： 1、正相化学键合相色谱仪：小至中等。 2、反相化学键合相色谱
正相与反相化学键合相色谱仪的比较
化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪，有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下：一、固定相极性：1、正相化学键合相色谱仪：大。2、反相化学键合相色谱仪：小。二、流动相极性：1、正相化学键合相色谱仪：小至中等。2、反相化学键合相色谱仪：中至大。三、
键合相色谱仪分类
键合相色谱仪分类有多种。 1、按分离目的可分：实验室键合相色谱仪和工业键合相色谱仪。 2、按固定相和流动相的极性大小可分：正相键合相色谱仪和反相键合相色谱仪。 3、按固定相物理状态可分：键合相气液色谱仪和键合相液液色谱仪。 4、按流动相物理状态可分：气相键合相色谱仪和液相键合相色谱仪。
键合相色谱法介绍
键合相色谱法是由液－液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上，克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解，及流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定相不断损失，色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
什么是正相键合相色谱法
正相键合相色谱法 1. 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似，也是烷烃（常用正已烷等）加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似，但极性小于硅胶，即用相同的流动相及其它条件相同时，同一组分的保留时间将小于硅胶。许多
反相液相色谱中流动相pH的确定
反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定 反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差（
高效液相色谱仪键合相为什么要封端
高效液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前，键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si－O－Si－C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2，由于空间位阻效应，不可能将较大
液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理
液相色谱仪键合相制备时，作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理：1、酸处理的目的：（1）洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。（2）除去硅胶表面层的金属氧化物杂质，如Na+、Ca2+、Al3+和Fe3+等。（3）使硅胶表面的硅氧烷键打开，形成尽可能多的自由羟基，有利于反应。2
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应，将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因：残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响，特别是在非极性键合相的情况下，硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附，使键合相的分离性能改变。二、方
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应，将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因：残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响，特别是在非极性键合相的情况下，硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附，使键合相的分离性能改变。二、方
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应，将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因： 残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响，特别是在非极性键合相的情况下，硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附
高效液相色谱键合相色谱法简述
键合相色谱法是由液－液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上，克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解，及流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定相不断损失，色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有高效、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测
反相键合相色谱仪C18柱的物理性质
反相键合相色谱仪C18柱的物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。一、硅胶纯度：硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高（硅羟基pKa低），导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶（高纯）由于金属含量低，硅羟基pKa高，碱
键合相色谱仪的特点
键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪。在液相色谱中，约有80%的分离问题采用键合相色谱解决。一、优点：通过改变流动相的组成和种类，可有效地分离非极性、极性和离子型等各种类型化合物。由于键合到载体上的基团不易流失，特别适合梯度淋洗。二、缺点：不能用于酸、碱度过大或存在氧化剂的缓冲溶液作流动
高效液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理
高效液相色谱仪键合相制备时，作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理：1、酸处理的目的：（1）洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。（2）除去硅胶表面层的金属氧化物杂质，如 Na+、Ca2+、Al3+和 Fe3+等。（3）使硅胶表面的硅氧烷键打开，形成尽可能多的自由羟基，有利于
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系：利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数，Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析，得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系，其中极性氨基酸残基在2～20 氨基酸组成的肽中，可减少在柱上
如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余？
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有高效、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质
如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质如血