为保持稳定的流动相高效液相色谱添加管道过滤器
管道过滤器的原理:当液体通过筒体进入滤篮后,固体杂质颗粒被阻挡在滤篮内,而洁净的流体通过滤篮、由过滤器出口排出。为了能给高效液相色谱仪色谱柱提供稳定、无脉动和流量准确的流动相,除具备高压输液泵外,还需配备管道过滤器设备。高效液相色谱管道过滤器:在高压输液泵的进口及出口与进样阀之间应安装管道过滤器。高压输液泵的活塞和进样阀阀芯的机械加工精度非常高,微小的固体杂质进入流动相,都会导致其损坏。同时固体杂质积累在接头上,会造成柱压升高,使色谱柱不能正常工作。因此,管道过滤器的设置十分必要。管道过滤器的滤芯采用不锈钢烧结材料,孔径约2~3mm,耐有机溶剂侵蚀。若发现管道滤器堵塞,可将其浸入稀HNO3溶液中,在超声波清洗器中超声10~15min,即可将堵塞的固体杂质洗出,若清洗后仍不能达到要求,则应更换滤芯。......阅读全文
为保持稳定的流动相高效液相色谱添加管道过滤器
管道过滤器的原理:当液体通过筒体进入滤篮后,固体杂质颗粒被阻挡在滤篮内,而洁净的流体通过滤篮、由过滤器出口排出。为了能给高效液相色谱仪色谱柱提供稳定、无脉动和流量准确的流动相,除具备高压输液泵外,还需配备管道过滤器设备。高效液相色谱管道过滤器:在高压输液泵的进口及出口与进样阀之间应安装管道过滤器。高
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况
高效液相色谱的流动相要点
流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰
高效液相色谱流动相如何脱气
高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获
高效液相色谱的流动相选择方法
流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰
高效液相色谱对流动相的脱气
高效液相色谱对流动相的脱气脱气方式:在线脱气机脱气,前期流动超声波超声脱气; 系统中气泡的产生:流动相本身存在,梯度淋洗混合后放出气泡; 气泡的影响:存在于管路中,系统压力不稳定,实验结果有偏差;存在于单向阀中,易造成液体回流,流量不准确,甚至是不吸液;存在于检测器中,出现鬼峰,影响检测准确性。
高效液相色谱流动相的选择原则
高效液相色谱仪分析时流动相的选择原则:1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相,应避免不必要的浪费,防止污染环境,危害身体健康。应该根据样哦数量,计算需要使用的溶剂体积,添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质,比如四氢呋喃在光照下就容易变质,甲醇或
高效液相色谱的流动相如何选择
由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对组分的竞争。因此,正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是:(1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性。(2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的
高效液相色谱流动相和固定相
液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色谱流动相的性质要求
流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
高效液相色谱流动相的注意事项
一、普通C8及C18反相色谱柱当色谱柱使用较长时间之后,就可能发生柱压升高、分离度不好、柱效降低、峰形不好等情况,这时就需要根据故障原因对色谱柱进行清堵与再生,以延长色谱柱的使用寿命。具体原因及处理方法如下:1)筛板堵塞与柱头塌陷主要现象有柱压严重升高或不稳定、色谱峰拖尾、色谱峰变宽、色谱峰分叉、秃
高效液相色谱流动相ph有何影响
如果是中性物质,水相pH值的酸碱性对它没什么影响。不过酸性物质和碱性物质的影响就比较大。比如,碱性物质在pH值6.8的缓冲液里保留时间就会比较靠后,如果pH值变成4.5,那么保留时间肯定会前移。另外水相pH值对于峰型也会有影响。所以水相pH值通常是根据被测物质的PKa值来确定的。
高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求
高效液相色谱(HPLC)流动相溶剂具有粘度低、与检测器相容性好、产品易得、毒性低等特点。选择填料(固定相)后,强溶剂对填料表面溶质的吸附降低,相应的容量因子K降低。然而,较弱的溶剂增加了溶质在填料表面的吸附,相应的容量因子k也增加了 因此,k值是流动相组成的函数 塔板数n通常与流动相的粘度成反比
高效液相色谱流动相的几点注意事项
高效液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。 一、 流动相溶剂的选择 1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求
液相色谱流动相常用的添加剂有那些
离子对试剂:庚烷磺酸钠,表面活性剂:十六烷基三甲基溴化胺,甲酸调pH等
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
高效液相色谱仪流动相和固定相都有哪些?1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液传质速度慢,柱效低 现采用10μm以下的小颗粒。向左转|向
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
高效液相色谱日常简易保养及维护——流动相
流动相的操作要求: 高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤; 流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化,对分
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
简介高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求
(1)流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。 (3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
液相色谱流动相的特征
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求:(1)能溶解样品,但不能与样品发生反应。(2)与固定相不互溶,也不发生不可逆反应。(3)粘度要尽可能小,这样才能有较高的渗透性和柱效。(4)应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时,溶剂要不吸收紫外光。(5)容易精制、纯化、毒性小,不易着火,价格尽量低等
液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应