高效液相色谱基线漂移的原因同解决方法
一、高效液相色谱基线漂移的原因(1)柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、UV检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。(2)高效色谱流动相不均匀流动相条件变化,引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。(3)污染或气体循环池(4)探测器出口堵塞。(高压导致循环水池窗口爆裂,产生噪声基线)(5)不正确的流量比或流量变化(6)柱的平衡是缓慢的,特别是当移动相发生变化时。(7)由低质量的溶剂污染、变质或制备。(8)个样品具有较强的保留力(高K‘值)至汕头峰(9)洗脱样品,显示基线逐渐增加。回收溶剂不使用,不推广.. 探测器未调整..(10)检测器未设置为最大吸收波长。二、高效液相色谱基线漂移的解决方法(1)控制色谱柱和流动相的温度,并在测试前使用热交换器。(2)采用高效液相色谱级溶剂、高纯度盐和添加剂流动相在使用前脱气,用于在线脱气或氦气脱气。(3)用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流动槽必要时可使......阅读全文
高效液相色谱基线漂移的原因同解决方法
一、高效液相色谱基线漂移的原因(1)柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、UV检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。(2)高效色谱流动相不均匀流动相条件变化,引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。(3)污染或气体循环池(4)探测器出口堵塞。(高压导致
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相基线漂移原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。然后如果基线往下飘,最容易的就是在流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:1、流动相有没有混合均匀。2、流动速度快,流动相中的配比在逐渐的发生变化。3、第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做
液相色谱基线漂移
为何会基线漂移 1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器) 2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移) 3、流通池被污染或有气体。 4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破
怎样避免液相色谱基线漂移?
①控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器; ②使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用在线脱气或氦气脱气; ③用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池,如有需要,可以用1n的硝酸(不要用盐酸); ④取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗;
气相色谱基线漂移原因有哪些?
引起基线不稳的原因来有很多,下面列举的主要是针对毛细管柱、FID检测器:柱子中残留有机溶剂或柱子固定相流失会导致基线不稳(基线波动较大,出峰),一般将柱子两端截去一小段,然后老化1小时左右即可载气流量的变化会导致基线漂移,检查进样口处源是否拧紧、查看气瓶气体是否充足柱子切口不平或是装柱长度不合适
液相色谱基线漂移的影响因素
气泡,流速,流动相纯度
高效液相色谱出峰时间晚的原因
是和标准样品比较出峰晚,还是同一待测样自身重现性实验时出峰晚
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)
附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
液相色谱柱压异常的原因及解决方法
液相色谱柱压异常的原因及解决方法色谱柱是液相的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。我们的色谱工程师大致总结为以下几个方面:1、流动相的前处理:流动相
液相色谱柱压异常的原因及解决方法
色谱柱是液相的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。我们的色谱工程师大致总结为以下几个方面:1、流动相的前处理:流动相或杨平中杂质堵塞色谱柱进口滤片
液相色谱图异常的问题、原因与解决方法
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设后
液相色谱图异常的问题、原因与解决方法
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设后
液相色谱图异常的问题、原因与解决方法
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设
液相色谱柱压异常的原因及解决方法
色谱柱是高效液相的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命是非常重要。色谱柱压力过高、过低都属于柱压问题。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。我们的色谱工程师大致总结为以下几个方面:1、流动相的前处理:流动相或杨平中杂质堵塞色谱柱进口滤
液相色谱的基线漂移怎么办
1、色谱柱污染。用洗脱力强的溶剂长时间清洗色谱柱或更换色谱柱。 2、管路污染。用清洗液清洗流路或更换被污染的部件。 3、流动相污染或纯度不够。流动相重新配置,净化处理或更换纯度高的流动相。 4、检测池污染。清洗检测池,参见检测池清洗操作步骤。 5、环境温度变化大。 6、泵压力不稳。参见
高效液相基线漂移至负值要怎么解决
高效液相色谱仪基线漂移的原因 ①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) ③流通池被污染或有气体 ④检测器出口阻塞。(高压造成流通
高效液相色谱常见故障的判定及解决方法
故障 可能原因 解决方法 (一) 保留时间变化 1 柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱
液相色谱柱压升高原因及解决方法
色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。这两个原因,大致又可以分为以下几方面:1、流动相的前处理杂质堵塞色谱柱进口滤片,导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤,或过滤不彻
液相色谱柱压升高原因及解决方法
色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。这两个原因,大致又可以分为以下几方面: 1、流动相的前处理 杂质堵塞色谱柱进口滤片,导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤
液相色谱保留时间漂移常见的原因及解决方法
保留时间 保留时间漂移通常是由老化柱,和列老化不易引起不规则的保留时间的波动引起的。事实上,大多数的原因,保留时间漂移是由于柱老化的不同机制,例如作为固定相(例如,通过水解),柱的污染(或相位所造成的样本流)的损失和喜欢。最常见的原因和解决的几个保留时间漂移如下: 色谱柱平衡
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混