一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(二)

三、结果1、无苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取在下面介绍的第一批实验中,我们开发并测试了一种使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟叶片的冷冻叶组织提取RNA的方法。在发表的文献中,用于困难树种开发的大多数RNA提取方法,通过使用CTAB / PVP裂解缓冲液中调高盐(NaCl)浓度,可以提高RNA产量和质量。因此,我们使用该缓冲液裂解我们的样品。大多数提取方法都使用此缓冲液来提取RNA,同时联合使用苯酚/氯仿法从蛋白质中分离出核酸。但是,我们不使用苯酚和氯仿,因为它们具有毒性,同时它们不可能在96孔板中实现高通量。因此,我们决定通过加入一定量的异丙醇,并在裂解步骤后离心样品,来得到RNA沉淀(图1)。在这个阶段,蛋白质和不需要的化合物(如多糖和多酚)会溶解在上清液中,并且很容易可以除去。用乙醇洗涤沉淀后,将核酸重悬,并进行DNase处理,然后在异丙醇中进行另一轮沉淀并洗脱以回收......阅读全文

有酚红培养基与无酚红培养基的区别

培养基中为什么加入酚红?何时选择不含酚红的培养基? 在培养基中通常会添加酚红作为酸碱指示剂(中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色)。但在某些应用中,酚红的颜色会起到干扰作用,如流式细胞仪检测;同时,酚红还是类固醇类激素类似物,如果使用者的研究是激素敏感的实验,如雌激素,应该避免使用含酚红的培养基

如何从细胞中提取dna

提取基因组DNA和细胞核DNA是不同的方法提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠:可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离CATB是一种抽提液,破坏细胞膜的~具体忘了~DNA不溶于异丙醇,异丙醇可以析出DNA,产生白色絮状沉淀,用枪头挑出就可以了以下

改写教科书,Nature发现脂肪代谢一种独一无二的调控机制

  脂肪对我们的身体至关重要。所有脂肪的核心成分都是脂肪酸(fatty acids),脂肪酸最初需要ACC酶催化合成。来自巴塞尔大学的一组研究人员发现了ACC组装成不同微丝结构的分子机制,这些微丝类型控制着酶的活性,因而也控制了脂肪酸的生成。  这一研究成果公布在6月13日的Nature杂志上。  

无血管软骨组织缺氧耐受新机制揭示

  军事科学院军事医学研究院孙强研究员团队与空军军医大学张丰副教授团队联合攻关,发现软骨组织细胞能够产生大量血红蛋白,并通过液—液相分离方式在细胞内形成聚集小体,为软骨细胞持续提供氧气供应。这一发现揭示了无血管软骨组织缺氧耐受的新机制。《自然》杂志日前在线发表了这一原创成果的研究论文。  红细胞中的

吸口气无创诊断有望取代癌症组织活检

  重度吸烟者被认为是肺癌高风险人群,这些人通常需要接受计算机断层扫描(CT)以检测肺部肿瘤,但是这项检查假阳率极高,因为它也能发现肺部的良性结节。  现在MIT开发了一种肺癌早期诊断新方法,尿检与肺癌相关的蛋白质。这种无创检测可以减少假阳性,发现更多早期患者。  早确诊早治疗对肺癌存活率非常重要,

厂界无组织排放恶臭监测解决方案

厂界无组织排放恶臭监测需要一套针对整个工业园区的恶臭、异味进行及时监测,超标及时作出报警以及通过检测分析寻找溯源的整套恶臭气体监测系统,更好的有效配合工业园区及时进行恶臭污染状况的评估和监测,以及快速排查恶臭污染排放源头企业。监测设备主要采集环境空气中的恶臭气体、气象五参数等数据,并通过传输网络上传

利用CTAB法提取植物基因组DNA

一、实验原理 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜并能与核酸形成复合物,该复合物在高离子强度(0.7mol/L)的溶液里是可溶的,通过离心可将复合物同蛋白质、多糖类物质分开。在酚仿变性的条件下,去除残留的CTAB和蛋白质等杂质,然后利用异戊醇或无水乙醇将DNA分

无标记近红外二区荧光成像用于慢性肝脏疾病无创监测

NIR-II应用|无标记近红外二区荧光成像用于慢性肝脏疾病无创监测慢性肝脏疾病以及随之带来的肝纤维化是普遍且日益严重的公共健康问题。非酒精性脂肪性肝病(NAFLD, Non-alcoholic fatty liver disease)是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积

从普通无脊椎动物系统获取配子实验

实验材料 海胆和沙币试剂、试剂盒 KCl 溶液3-氨基-124-三唑仪器、耗材 巴斯德吸管Nytex 滤器实验步骤 一、海胆和沙币体腔内注射 0.5 mol/L 的 KCl1. 制备 0.5 mol/L 的 KCl 溶液。2. 用海水冲洗一下动物以去掉颗粒物质。3. 用一个 23~26 号的针头向动

从普通无脊椎动物系统获取配子实验

海胆和沙币海星海鞘软体动物实验材料海胆和沙币                                                          试剂、试剂盒KCl 溶液                                                          

从普通无脊椎动物系统获取配子实验

海胆和沙币 海星 海鞘 软体动物             实验材料 海胆和沙币

禁止从日本进口牛肉-本市餐桌无正规“神户牛肉”

  神户牛原产于日本兵库县的但马地区,据说在生长期间不仅要喝啤酒、听音乐,每天还要享受人工按摩,口感嫩滑许多。顶级牛肉每斤售价能达到5000元左右。  据央视披露,建国门附近一家日式铁板烧的高档餐厅,工作人员明知道日本牛肉禁止进口,仍在贩卖。在北京一大型肉类批发市场,一些商铺

从Sequenom看无创产前检测的市场前景

  Sequenom是国外基因测序中游企业的代表案例。这家公司的核心业务是无创产前基因检测服务(NIPT),2015年的检测样本数量是18万例,(其最主流的产品是用于唐氏筛查的MaterniT21)。其他几家同领域的公司还包括Verinata Health(Verifi)、Ariosa Diagno

高通量组织研磨仪对动物器官组织的研磨

1.加钢珠1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,1min,每种样品基本充分匀浆2. 将上述匀浆液每0.2体积 TRIzol 试剂用量的匀浆液中加入0.04体积,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新

组织研磨仪研磨柑桔果皮组织的具体步骤

    组织研磨仪是专用于样品研磨的仪器设备,广泛应用于农业、医学等行业试验中,组织研磨仪具有研磨效果好,效率高,无交叉污染等有点,在农业中,常常用于种子研磨,用于测定种子的相关质量指标。而将组织研磨仪用于研磨柑桔果皮组织,是否也能够达到良好的研磨效果呢?因此为了检验组织研磨仪研磨柑桔果皮组织的可行

高通量组织研磨仪对植物组织的研磨步骤

    测定植物组织的成分含量是植物生理学研究中的重要部分。为什么这么讲呢?植物的基本组成物质如蛋白质、糖、脂肪和核酸以及它们的代谢都与其他生物大同小异。但是,植物本身又有一些独特的地方,如:植物的生长没有定限,虽然部分组织或细胞死亡,仍可以再生或更新,不断地生长;植物的体细胞具全能性,在适宜的条件

从毒品到药品:大麻二酚有望上市

  【新闻事件】:日前英国制药公司GW Pharmaceuticals在《新英格兰医学杂志》发表了其大麻二酚(CBD)液体制剂Epidiolex在治疗一种叫做Dravet综合症的罕见癫痫三期临床结果。患者观察4周后使用14周CBD或安慰剂,结果CBD组患者每月发病次数从12.4次降到5.9次,而安慰

无纸无笔记录仪简介

无纸无笔记录仪摒弃了传统记录仪中使用的记录笔和记录纸,把工业现场的各种需要监视记录的输入信号,通过本机CPU数据处理,一方面在大屏幕液晶显示屏幕上以多种形式的画面显示出来,另一方面把这些监察信号的数据存放在本机内藏的大容量存储芯片内,以便在本记录仪上直接进行数据和图形查询、翻阅和打印。带有软磁盘驱动

丁二酮是否溶于氯仿

物化性质2,3-丁二酮(431-03-8)的性状:    1.本品为浅黄绿色油状液体。有苯醌臭味,但稀溶液却有奶酪香味。    2.能与乙醇、乙醚相混溶,溶于约4份水。    3.熔点-3~1℃;沸点88℃;闪点80°F (26℃);d15150.990 ;n18D1.3933。LD50大鼠口服;1

组织研磨仪简介

  高通量组织研磨仪是实验室样品制备常用工具,它通过碳化钨小球或不锈钢小珠在样品管内来回震荡实现样本的粉碎、混合、均化以及细胞破碎等,可以对硬性、软性、弹性等样品进行快速的粉碎和均相化处理,符合理化分析实验室的要求,配置不同体积、不同材料的研磨罐,可以进行干磨、湿磨及冷冻研磨,也可以进行细胞破碎和D

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

从精子中提取DNA的方法

步骤:1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。2、管中加入400微升TNE缓冲液;25%微升sarcosyl(硅鱼精);75微升水;5微升蛋白酶K溶液手混匀,37度保温2小时。3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出,再用12000rpm离心5分钟。4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片

怎么从悬浮细胞中提取蛋白

细胞比较简单,只有细胞膜,抽提过程中,很容易破坏细胞膜,从而得到蛋白,相应蛋白中受到其他物质干扰也比较少,样品较为干净。但是用组织的时候,组织由细胞组成,但是从组织中抽提丹巴就要复杂,做组织匀浆以后,再分离组织碎片和蛋白,但是分离过程可能没有那么好,组织中含有的各种杂质,杂蛋白就比细胞中要多,要复杂

多样品组织研磨仪与组织研磨仪的详细介绍

多样品组织研磨仪与组织研磨仪的优势-产品介绍;多样品组织研磨仪与组织研磨仪两者均为实验室的常用的仪器工具、多样品组织研磨仪与组织研磨仪均为用来研磨物料,其进行试验后的成品颗粒比较小,为粉末状。     一、多样品组织研磨仪介绍     1、技术特点:     1.1、干磨,湿磨,冷冻研磨均适用;  

净信研磨仪|-人体肿瘤组织研磨

人类肿瘤有良性和恶性之分,人们通常将恶性肿瘤统称为“癌症”,几乎所有的人体器官和组织都可能发生癌症。癌症也一直位居人类“夺命杀手榜”*。癌细胞是人体内非常活跃的“捣蛋分子”,除了指甲和头发,它可以在人体的任何部位生根发芽、四处蔓延。而且研究发现,人体中有些部位的确格外受其‘青睐’,但男女会有明显不同

独一无二真那么重要吗

  如果有一天,你走在大街上,迎面走来的一个人和你穿得一模一样,估计你八成会是尴尬之中带有一丝不快。因为撞衫让你变得不再独一无二了。  那么,独一无二真的那么重要吗?这个问题在几十年前,还真不是个问题。比如,上世纪七八十年代满大街的中山装、喇叭裤,那时还没有撞衫一说。社会推崇的也是从众而不逾矩。

从肝脾着手辩治急性无黄疸型肝炎

无黄疸型肝炎多由于正气不足,湿浊邪毒承虚而入,加之饮食失调,以致湿郁热蒸,肝失疏泄而发病。本病临床表现复杂,一般从肝脾着手进行辩证施治。 急性无黄疸型肝炎多由湿热困郁,肝失疏泄,脾胃失调,治疗当以清利疏泄,调理脾胃为基本法则。方药组成为:柴胡9克,麦芽15克,山栀9克,佛甲草15克,

从普通无脊椎动物系统获取配子实验——海星

实验材料海星试剂、试剂盒精子悬液海水仪器、耗材巴斯德吸管实验步骤1. 选择带有凸起臂的动物,这些动物是具有配子的成熟动物。2. 小心地将巴斯德吸管插入接近中央板的臂内,就会获得一些配子,这样也分辨出动物的性别,并且对动物的损害最小。3. 从雌性获取卵巢:从中央板取下臂并解剖开该臂,用镊子将卵巢取出,

从普通无脊椎动物系统获取配子实验——海鞘

实验材料海鞘试剂、试剂盒海水仪器、耗材剪刀Nytex 滤器实验步骤1. 用一把锋利的剪刀插入排泄管将动物剪开,暴露出生殖管。2.首先用剪刀的尖刺破输卵管释放卵子到新鲜的海水中,涡旋使成簇的卵子分开。从所需数量的动物中收集卵子,并注意在受精前不要释放出精子。3. 用剪刀刺破输精管以释放精子,将精子直接