细菌内毒素检查法所用试剂的基础知识

细菌内毒素 医院临床在使用药品注射剂时,常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡,这种症状称为热原反应。 什么是热原?目前国内外仍未有统一的认识,但从国内外文献报道中,一个共同的意见,都普遍认为:它是指细菌内毒素。欧洲药典委员会副主席J.Van Noordwijk提出:“严格地讲,不是每一种热原都具有脂多糖的结构,但所有已知的细菌内毒素脂多糖都有热原活性”。在药品生产质量管理规范(GMP)条件下,药品生产的质量控制一般可以接受的观点是:不存在细菌内毒素意味着不存在热原。 细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖(Lipoply Saccharide)和微量蛋白(Protein)的复合物,它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物,而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。其化学成分广泛分布于革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、布氏杆菌、伤寒......阅读全文

细菌内毒素的量值介绍

  在80年代以前,所有研究内毒素的报道,毫无例外地使用重量单位表示内毒素的量,在 鲎试剂建立后也同样以重量单位表示 鲎试验的灵敏度。随着人们对细菌内毒素生物活性认识的提高, 以重量单位表示的不科学性被揭示,即相同重量的内毒素,对于菌种来源不同,其生物活性相差很大。1980年 美国学者Hochste

细菌内毒素(定性)概述

  细菌内毒素(Endotoxin),是革兰氏阴性菌的细胞壁成分,当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。细菌内毒素的主要化学成分为脂多糖。

细菌内毒素检验(一)

1.首先谈谈细菌内毒素的概念。细菌内毒素,英文称作Endotoxin,是G-菌细胞壁个层上的特有结构,内毒素为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。细菌内毒素的主要化学成分为脂多糖。.一般细菌毒素可分为两类,一类为外毒素(Exotoxin);它是

细菌内毒素检验(二)

4.3.3.2漩涡混合器作用:混旋细菌内毒素标准品,保证标准品溶液的浓度一致。方式:对冻干粉的细菌内毒素标准品复溶后,应混旋15min。标准品梯度稀释过程中,每步稀释应混旋30s.4.3.3.3试管恒温仪:作用:提供37℃恒温的环境。方式:对加入了内容物的鲎试剂分别放置于试管恒温仪中,37℃恒温60

消化所用的试剂有哪些?

消化所用的试剂,应采用高纯的酸和氧化剂,所含杂质要少,并同时按与样品相同的操作做空白试验,以扣除消化试剂对测定数据的影响。如果空白值较高,应提高试剂纯度,并选择质量较好的玻璃器皿进行消化。

鲎试剂分类及选购——细菌内毒素检测试验新手必看

显色基质鲎试剂、凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、比色法鲎试剂、显色法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、浊度法鲎试剂 、动态比浊法鲎试剂、弃G因子鲎试剂、终点显色法鲎试剂...。如果你是一位刚准备做细菌内毒素检测的实验人员,看到有这么多种鲎试剂,是不是有个疑问:“这么多种鲎试剂,我该怎么选择呢?

细菌内毒素的出现时间

  细菌内毒素这个概念在1890年的时候就已被提了出来,它是在研究发热物质过程所引起的,1933年Boivin最先由小鼠伤寒杆菌提取出来,进行化学免疫学方面的研究,到1940年时候,Morgan使用志贺氏痢疾菌阐明了细菌内毒素是由多糖脂质及蛋白质三部分所组成的复合体,到了1950年以后,随着生物学,

中国药典2020年版四部通则-1143-细菌内毒素检查法

  本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。  细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时,可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时,除另有规定外,以凝胶限度试验结果为准

热原和细菌内毒素

一、热原(progon)医院临床在使用药品注射剂时,常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡,这种症状称为热原反应。为提高药品质量和用药安全,人们对热原进行了广泛的研究,直到1923年Seibert提出了用家兔检测热原的方法。在1942年美国药典首先将家兔热原检查项

微生物热原检查技术及注意事项

热原是微生物的代谢产物,即能引起恒温动物和人体体温异常升高的致热物质,包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。这些物质进入血液后被吞噬细胞吞噬而产生内源性致热原(内热原),作用于下丘脑体温调节中枢,结果使动物体温上升,引起发热等一系列不良反应,必须严格控制。 除另有规定外,《

热原检查方法鲎试剂法

细菌内毒素检查法(鲎试剂法)细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法.细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。细菌内毒素检查包括凝胶法和光度测定法两种方法,前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒

细菌的染色检查法

作细菌  染色检查,首先要制备细菌涂片。制备细菌涂片一般包括涂片、干燥、固定三步。 1.涂片:取洁净玻片一张,按以下步骤操作 肉汤培养物涂片:   ① 右手拿接种环的黑色胶柄部分,左手托持试管。 ② 接种环以15°角置于酒精灯的外焰中烧灼灭菌,直至金属丝烧红(图1-3),然后将金属柄部也回旋

ELISA实验所用试剂详解

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制

细菌内毒素的结构构造相关介绍

  细胞壁较薄,厚约10-15nm,结构也较复杂。肽聚糖含量低,仅占细胞干生10%左右,层薄又较疏松,因肽聚糖之间仅四肽侧链直接联结,缺乏五肽桥;肽聚糖居于细胞最内层,外面由内向外还有脂蛋白, 外膜和 脂多糖的三层聚合物。  蛋白质  脂蛋白(lipoprotein) 由 类脂和蛋白质构成,联结在

细菌内毒素(定性)的注意事项

  凝胶法试验前工作人员手要清洁消毒,试验操作应在洁净工作台进行。在使用洗耳球、移液管取样时,要注意不要将空气吸人溶液中,防止气体中的内毒素进入供试品。由于凝胶反应是不可逆的,所以在反应过程中及观察结果时注意不要使试管受到振荡,以免使凝胶破碎产生假阴性。

关于细菌内毒素的检测相关介绍

  细菌内毒素是 革兰氏阴性菌的细胞壁成分,当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。因此,细菌内毒素广泛存在于 自然界中。如自来水中含内毒素的量为1至100EU/ml。当内毒素通过消化道进入人体时并不产生危害,但内毒素通过注射等方式进入血液时则会引起不同的疾病。内毒素小量入血后被肝脏枯否细胞灭活,不造成

细菌内毒素检验实验的操作步骤

  1、实验前准备  试验所用的器皿须经处理,去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿用干热灭菌法(250℃、30min)去除;塑料器具置30%双氧水中浸泡4h,再用无热原水冲洗后于60℃烘干。  2、鲎试剂灵敏度复核  当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时,应进行鲎试剂灵敏

细菌内毒素检测及临床应用

一 细菌内毒素定量检测法应用与发展近10年,人们对疾病病因、病理的认识不断深化,发现了许多疾病与内毒素的关系。由于很小剂量的内毒素即能引起极广泛的生物作用及病理作用,因而加强内毒素的检测研究便成为临床、公卫及药检等领域的重要课题。  细菌内毒素检查法又称鲎试验法,它是1964年由美国学者Levih和

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   一、原理   与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   Blo

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   一、原理   与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   Blo

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

催化烷基化所用试剂的介绍

  一、液相烷基化催化剂  主要用:  ①酸催化剂,常用的有硫酸和氢氟酸。异丁烷用丙烯、丁烯进行的烷基化,以应用氢氟酸为多。苯用高碳烯烃或用C10~C18的氯化烷进行的烷基化,以及酚类的烷基化,则以应用硫酸为多。  ②弗瑞德-克来福特催化剂,如氯化铝-氯化氢和氟化硼-氟化氢等,常用于苯与乙烯、丙烯以

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物

检测Rh血型所用试剂和材料

(1)Rh抗血清:常用的为IgG抗D、抗C、抗E、抗c、抗e。其效价标准大致如:抗D不低于64,抗E不低于16,抗C不低于16,抗c不低于16。(2)5%受检者红细胞盐水悬液。(3)1%木瓜酶(或菠萝酶〕溶液:称取木瓜酶1.0克溶解于100毫升pH5.5的磷酸盐缓冲液内。(4)pH5.5磷酸盐缓冲液

硅酸根检测仪所用试剂

  1.钼酸铵溶液  称取50g钼酸铵溶于约500mL一级试剂水中。取42mL硫酸(相对密度1.84)在不断搅拌下加入到300mL一级试剂水中,并冷却到室温。将钼酸铵溶液加入到硫酸溶液中,用一级试剂水定容到1L。保存在聚乙烯塑料瓶中。  2.还原剂  称取1.5g1-氨 基-2萘酚-4-磺酸和7g无

凝胶法鲎试剂测内毒素方法

细菌内毒素检查法又称鲎试验法,它是一种定性或定量检测微量细菌内毒素的分析方法,由美国学者 Levin 和 Bang于 1964 年发现,并在 1968年正式建立的。该法具有灵敏度高、特异性强和操作简便快捷等特点,在制药行业、微生物学和临床检验等领域都具有广泛的应用。鲎制剂作为一种生物制剂于1973年

怎样用酶标仪(光度测定法)做内毒素检测

一、光度测定法分为浊度法和显色基质法。    浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法是依据反映混合物中的内毒素浓度和其在孵育终止时的浊度(吸光度和透光率)之间存在着量化关系来测定内毒素含量的方法。动态浊度法

细菌内毒素测定仪的使用科室

  1、医院:ICU、血液科、肾内科、检验科、烧伤科、感染科(肝病科等)、口腔科、消化科、呼吸科。  2、血站、血液中心、质量管理科。  3、药厂、医疗器械厂家、质量部QC、化验室。  4、医学院、药学院等教研室、研究所。

细菌内毒素测定仪的性能特点

  ●直接检测鲎试剂安瓿ZL技术。  ●真正一次实验同时获得的凝胶法、定量法检测数据。  ●8mm试管适配器技术,可以使用8mm试管检测,仅使用0.05ml鲎试剂,节约一半鲎试剂。  ●凝胶法、动态浊度法、动态显色法。  ●有两种检测波长可供选择(405nm和660nm)。采用660nm检测波长黄色

细菌内毒素测定仪的性能特点

  ●直接检测鲎试剂安瓿ZL技术。  ●真正一次实验同时获得的凝胶法、定量法检测数据。  ●8mm试管适配器技术,可以使用8mm试管检测,仅使用0.05ml鲎试剂,节约一半鲎试剂。  ●凝胶法、动态浊度法、动态显色法。  ●有两种检测波长可供选择(405nm和660nm)。采用660nm检测波长黄色