做液相色谱不可不知的经验贴
液相色谱仪可以说是药物分析工作者最常使用的“一门武器”。何时能做液相做的如“打游戏”一般时，才算是到了游刃有余、庖丁解牛的境界。现如今的液相色谱软件均已具备了强大的数据处理功能，如能运用自如，可达事半功倍之效。 水相中溶质的溶解 水相中需溶解的无机盐和表面活性剂等固体溶质，建议采用加热法，不建议采用振摇、超声等方式。因为振摇、超声有可能使得溶质处于“临界胶团浓度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有机溶剂、温度剧降等)，极易析出结晶，损伤仪器和色谱柱，呈现泵头处析出“盐和白粉”的现象。 流动相的配制与使用 恒度洗脱 将水相与有机相混合后、使用混合型过滤膜抽滤，用一个管路(如A管)泵入仪器，这是基本原则。若使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器，极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。剩余的流动相可继续使用，需密封后放置于阴凉处，待下次实验时与新配制的流动相混合后使用。无......阅读全文
液相色谱和气相色谱有哪些不同
气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的
液相色谱和气相色谱有哪些不同
气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的
液相色谱仪与气相色谱的区别
液相色谱仪通过组织器模块对各单元部件进行供电、自动分配IP地址，实现整机联网操作，操作方便、运行稳定、结果准确。 自动进样器、溶剂管理器、紫外-可见可变波长检测器、二极管阵列检测器、激光诱导荧光检测器、示差折光检测器，以及蒸发光散射检测器等配置，满足复杂样品体系的液相色谱分析，广泛用于食品、医
液相色谱仪与气相色谱的区别
液相色谱仪通过组织器模块对各单元部件进行供电、自动分配IP地址，实现整机联网操作，操作方便、运行稳定、结果准确。 自动进样器、溶剂管理器、紫外-可见可变波长检测器、二极管阵列检测器、激光诱导荧光检测器、示差折光检测器，以及蒸发光散射检测器等配置，满足复杂样品体系的液相色谱分析，广泛用于食品、医药
液相色谱仪和气相色谱仪比较
1、液相色谱仪 （1）液体流动相可为离子型、极性、弱极性、非极性溶液。（2）液体流动相不仅起运载样品的作用，同时对样品组份有一定的亲和力（排阻色谱除外） 它会与固定相展开对组份的剧烈竞争，可与被分析样品产生相互作用，并能改善分离的 选择性。因而对分离起很大的作用。（3）液体流动相动力粘度为1
气相色谱和液相色谱仪的区别
色谱仪是一种用来进行色谱分离分析的装置，凭借其独特的分离能力以及准确度较高的分析能力，在食品安全、工业生产、医疗制药等领域都有较为广泛运用，在我们生产生活的各种领域发挥着重要的作用。 色谱仪的种类有很多，其中气相色谱和液相色谱是较为常见的两种色谱技术，今天我们就气相色谱和液相色谱的异同做
液相色谱流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。
液相色谱流动相的脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果
液相色谱流动相的特征
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求：（1）能溶解样品，但不能与样品发生反应。（2）与固定相不互溶，也不发生不可逆反应。（3）粘度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效。（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶剂要不吸收紫外光。（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火，价格尽量低等
液相色谱流动相的选择
在化学键合相色谱法中，溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中，溶剂的强度随极性的增强而增加；在反相色谱中，溶剂的强度婕缘脑銮慷跞酢?BR>正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性
液相色谱流动相的滤过
流动相的滤过所有溶剂使用前都必须经0.45µｍ（或0.22µｍ）滤过，以除去杂质微粒，色谱纯试剂也不例外（除非在标签上标明“已滤过”）。用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液，严禁用
液相色谱流动相的贮存
流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液
液相色谱流动相的贮存
液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1）由强到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍规则：每减少10％的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约增加３倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况
液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应
液相色谱流动相不过滤
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore滤膜（0.2μm或0.45μm）等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。输液泵的滤器应经常清洗或更换。
液相色谱流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： （1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 （2）流动相与样品不产生化学反应 （3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的
高效液相色谱仪流动相要求
高效液相色谱仪流动相要求1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选择流动相时应考虑以下几个方面： ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱
液相色谱仪流动相如何贮存？
流动相一般储存在玻璃聚四氟乙烯或不锈钢容器中，但不能储存在塑料容器中因为许多有机溶剂如甲醇和乙酸可以从塑料表面沥滤增塑剂所以溶剂被污染这些被污染的溶剂，如果用于液相色谱，可能会导致柱效降低储存容器必须紧密封闭以防止由溶剂挥发引起的成分变化，从而防止氧气和二氧化碳溶解到流动相中。磷酸盐和醋酸缓冲液容易
液相色谱仪流动相的极性
液相色谱仪的流动相又称溶剂，溶质和溶剂分子之间的色散力作用、偶极作用、氢键作用和介电作用使溶质与溶剂分子之间出现共作用，共作用程度称为溶剂的极性。一、色散力作用：瞬间偶极矩导致分子间的相互作用。二、偶极作用：或诱导偶极分子间的相互作用。三、氢键作用：质子（或氢键）接受体和质子（或氢键）给予体之间的相
液相色谱仪流动相的要求
液相色谱流动相是液体，对组分有亲合力，并参与固定相对组分的竞争，正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂与检测器匹配：对于紫外吸收检测器，不能用对紫外光有吸收的溶剂。对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达
液相色谱仪流动相的贮存
液相色谱仪流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂（如甲醇和乙酸等）可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂被污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐和乙酸盐缓冲
高效液相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用，高效液相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。流动相又称洗脱剂、淋洗液、展层剂或溶剂。一、流动相选择的一般要求：1、流动相的纯度。2、流动相与固定相不互溶，不发生化学反应。3、对样品要有适宜
实验室分析方法高效液相色谱仪液相色谱柱保护柱选择
在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样
Waters液相色谱教程
本资料来自于Waters中国有限公司培训中心 包括4个文件： 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识A 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识B 液相色谱教程(三)液相色谱实验操作 液相色谱教程(四)液相色谱柱基础知识 下载：Waters液相色谱教程
液相色谱基线噪音
对的，虽然理论上分析纯试剂可以上HPLC的，但很多国产的达不到要求，会使仪器噪音高很多但，你可以分析一下噪音的来源1，换100%纯水，不接柱子，当基线平稳时，进空针（就是什么都不进，走一次方法）。如果这时基线同样出现之前的情况，那么应该是仪器本身的问题，联系工程师解决吧（如果用的等度洗脱，这步省略）
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
waters液相色谱学校
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高效液相色谱分类
按照分离原理分类，大概可以分为：1.吸附色谱：基于各组分对固定相的吸附能力不同而实现分离的方法。比较常见的色谱柱是火星硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于测定结构异构体。2.分配色谱：基于样品在流动相和固定相之间溶解度不同的原理实现分离。比较常见的正相氰基柱（正相）和极为普遍的C18色谱柱（