分离技术问题中最佳优化与最稳定优化的对比

FDA是QbD概念最积极的倡导者和推动者。为了使色谱技术得到更好的发展,美国FDA要求利用QbD(质量源于设计)理念制定针对色谱技术的系统实验计划,以取代目前仍被广泛使用的试错法。 本文作者Hans-Werner Bilke为HPLC技术服务专家;Stefan Moser为过程最佳化技术专家。 图1.寻找最佳工作点时的单纯性值分析评估;最佳工作点有关数据:梯度时间tG=38.3分钟、温度T=30.1摄氏度、乙腈中的甲醇三元提取剂成分tC=4.0%、初始浓度%Bs=5.7%、最终浓度%Be=90%、酸碱度PH值=2.9、流动系数F=1.4ml/分、滞留容积=1.06ml。 21世纪初,美国推出QbD(质量源于设计)理念。QbD(Quality by Design,),其定义是:在可靠的科学和质量风险管理基础之上的,预先定义好目标并强调对产品与工艺的理解及工艺控制的一个系统的研发方法。质量不是通过......阅读全文

分析HPLC如何放大到制备型HPLC?

在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级,甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:10000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积(小于1:100)。 在这种条件下,会达到很好的分离效果,峰形尖锐并且很对称。分析系统线形放大到制备型HPLC意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增

HPLC法中定量分析方法大致有哪几种

气相色谱定量检测一般就两种,一个是外标法,一个是标法,对于没有标准物质的,就只能靠容面积归一法粗略定量。通过对人类和环境有影响的各种物质的含量、排放量的检测,跟踪环境质量的变化,确定环境质量水平,为环境管理、污染治理等工作提供基础和保证。简单地说,了解环境水平,进行环境监测,是开展一切环境工作的前提

液相色谱法检测人血浆甲氨蝶呤的浓度HPLC

 甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是二氢叶酸还原酶抑制剂,是通过抑制细胞内二氢叶酸酶达到杀灭肿瘤细胞的作用。目前临床采用大剂量甲氨蝶呤配合亚叶酸钙解救(HD-MTX+CF)治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)。有研究表明,ALL患者MTX血药浓度与不良反应和疗效之间存在密切关系且个体差异大。

液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉毒素的方法介绍

  HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。  该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素

HPLC的应用

  一、样品测定  1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱。  2.样

维他命HPLC剖析

  维他命做为关键的食品类或是饲料原料,在国家标准或是各种各样制造行业、产品标准常有涉及含水量的检验。文中共享一下对于某些维他命剖析的检验的实例:   一、食品类中维他命、的测量   第一:食品类中维他命A和维他命E的测量 反相液相色谱法   国家标准连用的是C30柱,水/乙醇的流动性相管理体

HPLC用水来源

HPLC用水可以通过以下几个方面来得到:1 专门的纯水机或超纯水机;2 去离子水重蒸;3 二次或三次重蒸水;4 采用类似家用的纯水机;5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水;6 其它途径不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水,并通过0.22um

安捷伦HPLC维护

  一、如何处理 HPLC 中的盐带来的问题?   很多问题是由于流动相含有盐成分造成的。建议在清洗时将水加热后再冲洗,这样既可以将盐溶解的更好,也可以溶解一些脂溶性物质,会减少很多问题的发生,包括管路堵塞,盐析出,基线噪音……   二、安捷伦1100及1200液相泵的日常维护   泵是

HPLC系统概述

HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。最早的

HPLC中液相联质谱法与液相色谱法有什么区别?

HPLC中液相联质谱法与液相色谱法有什么区别;HPLC系统由两个功能组成:一个是分离,另一个是检测。所谓的液相色谱质谱仪,MS也用作检测器,当然一般是在紫外检测器(包括DAD)之后串联连接。因为MS比较昂贵,所以它比普通的HPLC机器贵得多,而且它的功能也很好。因此,它也是一种HPLC系统。MSD有

高效液体相色谱法(HPLC)“瘦肉精”检测的液体处理

简介“瘦肉精”是一类动物用药,有数种药物被称为“瘦肉精”,例如莱克多巴胺(Ractopamine)及克伦特罗(Clenbuterol)等。“瘦肉精”能使猪提高生长速度、增加瘦肉率、猪毛色光亮,卖相好、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但对人体会产生副作用,轻则导致心律不齐,严重会导致心脏病。

三聚氰胺HPLC检测方法之固相萃取(SPE)法

1. 依据:GB/T 22388—20082. 原理:试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用高效液相色谱测定,外标法定量。3. 试剂与材料:除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。3.1甲醇:色谱纯;3.2乙腈:色谱纯;3.3氨水:含量为25%~

HPLC法中,色谱纯和分析纯有什么区别和要求

对纯度的要求,各试剂是不一样的。同样是99%的纯度,对一种试剂来说可能是HPLC级,对另一种试剂就可能连AR都够不上。关键的区别是,HPLC级试剂要求杂质颗粒物的含量少,否则会堵色谱柱。如果要在色谱上用分析纯的试剂的话,就要把溶液经过0.45μm或0.22μm的滤膜过滤后再用,以去除颗粒物

迪马科技酒类产品中塑化剂的检测—HPLC法

  近日,白酒行业爆出了“塑化剂超标”事件,引起了市场的广泛关注。已知白酒生产过程中自身发酵环节不产生塑化剂。白酒产品中的塑化剂主要源于塑料接酒桶、成品酒塑料桶包装等。塑化剂的危害不言而喻,2012年6月1日,卫生部曾紧急发布通知,将17种塑化剂列入《第六批食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食

HPLC法分析肾上腺皮质激素类药物的介绍

  高效液相色谱法以其快速、灵敏、分离效率高等优点广泛应用于药物分析中,近年来在各类标准中,HPLC法的应用一直处于稳步上升的趋势。由于肾上腺皮质激素类药物大多具有高亲脂性、电中性,此类药物多采用反相液—液分配色谱法,样品在弱极性(或中等极性)的固定相与强极性的流动相之间反复分配,直至达到分离,鉴于

测定鸡肉、猪肉中硝基咪唑类药物残留量实验——HPLC法

实验材料动物组织试剂、试剂盒乙酸乙酯丙酮甲醇乙腈仪器、耗材离心管鸡心瓶SCX柱实验步骤1.  提取 称取5 g(准确至0.01 g)样品于50 mL离心管中,加入20 mL乙酸乙酯,均质1 min后,超声提取5 min,再以3000 r/min的速度离心10 min,取上清液转移至鸡心瓶中。再用20

FcRn亲和层析HPLC法可用于评估IgG抗体质量属性

  IgG抗体与新生儿Fc受体(FcRn)的结合力与抗体的血清半衰期相关。细胞通过胞饮作用以非特异性方式将IgG抗体摄入。在初级内体囊泡(early endosome vesicle)的低pH下,IgG抗体能够以pH依赖性方式与FcRn结合,随后再循环回到细胞表面上,而不是在溶酶体中被降解。一旦这种

三聚氰胺HPLC检测方法之固相萃取(SPE)法

1. 依据:GB/T 22388—2008 2. 原理:试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用高效液相色谱测定,外标法定量。 3. 试剂与材料:除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1甲醇:色谱纯; 3.2乙腈:色谱纯; 3.3氨水:含量

厄贝沙坦胶囊的人体生物利用度实验设计——HPLC法

实验材料男性试剂、试剂盒国产厄贝沙坦胶囊厄贝沙坦片剂仪器、耗材离心机冰箱采血针针头高效液相色谱仪厄贝沙坦是AT1受体阻断剂,临床上用于高血压病的治疗。由于该药疗效确切,在治疗剂量下(常用量为50-300 mg/d,耐受量>900 mg/d),几乎无不良反应,因此可望成为抗高血压的一线药物。药代动力学

HPLCICPMS法分析雄黄在大鼠脏器中代谢的砷形态

  1 引言   近年来,中药慢性中毒问题受到人们的高度重视。中药雄黄在我国传统医学中有着悠久的历史,具有解毒杀虫,燥湿祛痰,截疟等功效。2010 年版《中国药典》规定雄黄饮片中As2S2的含量应不低于90%,并对As2O3的量进行了限制。现代医学研究表明,雄黄在治疗白血病、癌症等恶性疾病方面也有不

HPLCICPMS法分析海洋沉积物中有机锡的形态

  1 引 言  有机锡化合物(OTC)在工农业领域的广泛应用,导致对水域、沉积物和食品的污染,成为环境污染的重大问题之一。调查显示,丁基锡化合物污染已不仅局限在水体,已通过生态系统传递到水生生物及食品。因此,有机锡形态分析研究对了解锡的污染状况、环境行为、生态毒理等具有重要意义。  近年来, 环境

细菌ATP/ADP/AMP含量高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂...

细菌ATP/ADP/AMP含量高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂盒使用说明产品说明书(中文版)主要用途细菌ATP/ADP/AMP含量高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂是一种旨在通过高氯酸酸性处理,碱性中和后,在高效液相色谱仪和紫外光度仪下(254nm波长)检测分析,分离出ATP、ADP或AM

HPLC名词术语

色谱图(Chromatogram) : 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为时间。色谱峰(Peak):色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号。峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间连接的直线。峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距

uhplc和hplc区别

hplc是高效液相色谱,uplc是超高效液相色谱,这两个的区别是超高效液相色谱借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。

HPLC基础知识

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的

HPLC入门问题FAQ

HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决

HPLC基础知识

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary ph

HPLC入门问题FAQ

HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数 检测器池窗

HPLC分类及其原理

HPLC分类有很多种,可以根据不同的依据进行分类。1. 根据流动相和固定相的极性不同,HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。正相高效液相色谱: 色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时,由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力,使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长,因此

比较FPLC与HPLC

1、二者原理相同:都是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进  行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。  2、特点:二者均具有快速、分辨率高、检测灵敏度高、分离效能高等特点,而且FPLC还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大