【探针技术用于检测由siRNA介导的基因调制】 为了研究基因功能,科学家们常常会有针对性地关断某些特定的基因。 而要验证这种基因沉默的有效性, 就需要运用适当的具特异性的检测方法。理想的检测方法不仅要测量准确, 而且还要能让细胞保持完好无损。 利用诸如RNA(核糖核酸)技术来调节基因表达已成为研究基因功能和生物反应机理的一种基本手段。常规的测定基因沉默率(基因敲除)的方法,需要采用细胞裂解或细胞壁通透以及细胞固定的方法将细胞加以破坏。而且这些技术的缺点还在于所测定的结果只能反映细胞群体的平均的基因表达。 转染报告构建是一种对细胞无损害的检测方法。然而这种方法虽能让细胞保持活性, 却不能对内源基因的表达进行检验。此外, 该方法对细胞的活性也有负面影响。理想的、非破坏性的RNA检测试剂不仅要适合基因表达的研究, 还应能够用于后续离析得到的活细胞的分选及分析中。 Smartflare“......阅读全文
中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员、吉林大学教授赖良学博士的研究团队利用最新的CRISPR/Cas9技术成功地培育出两种基因敲除克隆小型猪,即酪氨酸酶基因敲除猪和PARK2和PINK1双基因敲除猪,建立了人类白化病和帕金森综合征两种猪模型,该研究成果于10月2日在线发表在Cellular
研究历史 20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这
CRISPR/Cas9基因编辑技术以它效率高、操作简便、成本低等特点被广泛应用于基因敲除小鼠实验中,但是在将RNAs注入受精卵的环节中,传统的显微注射技术需要借助显微操作系统人工逐个进行受精卵注射,十分耗时。同时,想要提高基因敲除的成功率,需要获得更多受精卵,再加上人工设计基因打靶方案耗时费力,
苦于多基因 or LncRNA敲除的同学,你的福音来啦! 我们都知道基因剪刀CRISPR/CAS9技术今年大火,之所以这个技术这么火和其对基因操作的方便性,高效性,准确性及高性价比是分不开的。CRISPR/Cas9是一种能够对任何物种基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶C
2015年12月10日,中国农业大学特聘教授韩建永带领的研究小组,以Letter的形式在《Protein & Cell》杂志上发表题为“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRI
2015年12月10日,中国农业大学特聘教授韩建永带领的研究小组,以Letter的形式在《Protein & Cell》杂志上发表题为“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRI
CRISPR/Cas9基因编辑技术以它效率高、操作简便、成本低等特点被广泛应用于基因敲除小鼠实验中,但是在将RNAs注入受精卵的环节中,传统的显微注射技术需要借助显微操作系统人工逐个进行受精卵注射,十分耗时。同时,想要提高基因敲除的成功率,需要获得更多受精卵,再加上人工设计基因打靶方案耗时费力,
20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这个方法在当年来说,存
Daniel MacArthur对人体功能不需要的基因的寻找起源于两个生病的男孩。2000年,作为一名大学生,他开始在Kathryn North的实验室工作,North是一位研究罕见病例的遗传学家,她在澳大利亚悉尼大学的团队最近发布了两兄弟肌营养不良症早发性形成的可能原因。他们怀疑其原因是ACT
Daniel MacArthur对人体功能不需要的基因的寻找起源于两个生病的男孩。2000年,作为一名大学生,他开始在Kathryn North的实验室工作,North是一位研究罕见病例的遗传学家,她在澳大利亚悉尼大学的团队最近发布了两兄弟肌营养不良症早发性形成的可能原因。他们怀疑其原因是ACT
从南方医科大学获悉,该校实验动物中心科研团队运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,成功培育出世界首例白化西藏小型猪,同时敲除了与免疫相关的基因,这标志着自主构筑的基于小型猪受精卵制备基因修饰猪的平台取得了突破性进展。而在此之前,全世界尚未有纯白藏猪的先例。 藏猪作为我国独有的高原特殊品种,全
TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破 近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、
人类有自然发生的基因敲除 科学家经常用基因敲除的小鼠来了解基因的功能。在人类中自然发生的“基因敲除”是指从父母中继承了两个非活性的拷贝,而导致基因失活。 4月12日的Nature在线报道了超过1800个人携带的“基因敲除”。这是宾夕法尼亚大学医学院的研究人员领导的一项国际合作项目。该计划迄今
AAV-TBG-Cre/GOI系统简介: l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。 Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。 Ø Cre重组酶是
p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor g
5月15日,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组在国际学术期刊Circulation Research上发表了题为“Genetic Targeting of Organ-Specific Blood Vessels”的最新研究成果。该项工作建立一套新的遗传操作系统以实现更加精确的遗传靶
5月15日,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组在国际学术期刊Circulation Research上发表了题为“Genetic Targeting of Organ-Specific Blood Vessels”的最新研究成果。该项工作建立一套新的遗传操作系统以实现更加精确的遗传靶
近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraO
CRISPR/Cas系统是细菌进化形成的免疫防御机制。国家遗传工程小鼠资源库瞄准该系统,开发出CRISPR/Cas9技术用于基因组改造,实现了基因精确定点插入,且无需胚胎干细胞,无物种限制,直接注射受精卵,实验周期仅为传统方法的1/10,材料成本也大大降低。 目前,资源库已成功利用该技术获得
p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor gen
CRISPR/Cas系统是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种后天免疫系统,其以消灭外来的质体或者噬菌体并在自身基因组中留下外来基因片段作为“记忆”。 CRISPR/Cas系统全名为常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白系统(clustered regularly inte
近日,中科院广州生物医药与健康研究院、南京大学-南京生物医药研究院和广州医药研究总院合作,利用CRISPR/Cas9技术成功培育两只肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除狗,从而在世界上首次建立了狗的基因打靶技术体系,该研究成果已被国际学术期刊Journal of Molecular Ce
6月6日,《细胞研究》在线发表了一项成果,应用改进的“C-CRISPR”技术可以获得单基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴。这项研究由中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心的杨辉研究组、熊志奇研究组以及神经所苏州非人灵长类研究平台孙强团队合作完成。该研究通过将多个
基因编辑技术是对某一核苷酸序列中的特定基因位点进行人为改变,插入、删除、替换或修饰基因组中的特定目的基因使其表达性状改变的一种新兴分子生物技术。CRISPR -Cas9作为一种新兴的基因编辑技术,通过定向敲除肿瘤免疫检查点分子或者通过快速简便的基因编辑,而被广泛应用于肿瘤治疗领域,其显着降低了肿
中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学博士和裴端卿博士领导的研究团队将转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)技术应用于兔基因敲除研究,建立了兔基因打靶的高效平台。并利用该技术平台成功地将负责T细胞和B细胞重排的重组激活基因(RAG)敲除,建立了世界首例免疫缺陷家兔疾病模型,该成果于7月9日
我们都知道基因剪刀CRISPR/CAS9技术今年大火,之所以这个技术这么火和其对基因操作的方便性,高效性,准确性及高性价比是分不开的。CRISPR/Cas9是一种能够对任何物种基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶Cas9蛋白通过导向性RNA (guide RNA, g
在一项新的研究中,来自英国韦尔科姆基金会桑格研究所和剑桥大学的研究人员构建出一种更加高效的和可控的CRISPR基因组编辑平台:sOPTiKO。他们描述了这种免费获得的单步骤系统如何在体内每个细胞和每个发育步骤中发挥作用。这种新方法将有助科学家们开展发育生物学、组织再生和癌症研究。相关研究结果发表
实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体,转染 293T 细胞,构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1 载体表达
动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制 备动物模型的基因修饰技术层出不穷,这不仅包括传统ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 还有TetraOne基因敲除新技术。如此繁
约翰霍普金斯大学的研究人员报告称,在酵母中任何一个基因缺失都会给生物体基因组施加压力去进行补偿,从而导致另一个基因突变。鉴于不同物种间DNA的保守性,他们的研究发现或许也适应于人类遗传学,有可能对癌症和其他研究领域的遗传分析方式造成重大的影响。 在发表于11月21日《分子细胞》(Molec