特异性位点的DNA甲基化的检测方法

相关专题1 甲基化敏感性限制性内切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法这种方法利用甲基化敏感性限制性内切酶 对甲基化区的不切割的特性,将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。常使用的甲基化敏感的限制性内切酶有HpaⅡ-MspⅠ(识别序列CCGG)和SmaⅠ-Xmal(CCCGGG)等。由于后者识别的碱基数相对较多,其碱基序列在体内出现的概率相对较低,所以以前者即HpaⅡ-MspⅠ更常用。其中HpaⅡ和MspⅠ均能识别CCGG序列,然而当序列中的胞嘧啶发生甲基化时,HpaⅡ不切割,利用HpaⅡ-MspⅠ的这种属性处理DNA,随后进行Southern或PCR扩增分离产物,明确甲基化状态]。这是一种经典的甲基化研究方法,其优点是:相对简单,成本低廉,甲基化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此......阅读全文

增加RTPCR特异性

第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法,各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在整个转录本的多个位点退火,产生短的,部分长度的cDNA。这种方法经常用于获取5'末端序列及从带有二级结构区域或带有逆转录酶不能复制的终止位点的RNA模

肿瘤特异性抗原的定义

肿瘤特异性抗原(TSA)指仅表达于肿瘤组织,而不存在于正常组织的肿瘤抗原。

肿瘤特异性抗原的概念

肿瘤特异性抗原(tumor specific antigen)指仅表达于某种肿瘤细胞表面而不存在于正常细胞上的新抗原,故又称独特肿瘤抗原(unique tumor antigen)。

药物特异性抗体的定义

  抗体(antibody)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于 脊椎动物的血液等体液中,及其 B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为 抗原。药物特异性抗体即能够特定识别某种或某类药物的抗体

肿瘤特异性抗原的简介

  此类抗原可存在于不同个体同一组织类型的肿瘤中,如人恶性黑色素瘤基因编码的黑色素瘤特异性抗原可存在于不同个体的黑色素瘤细胞,但正常黑色素细胞不表达。TSA也可为不同组织学类型的肿瘤所共有,如突变的ras癌基因产物可见于消化道、肺癌等,但由于其氨基酸顺序与正常原癌基因ras表达产物存在差异,可被机体

什么是特异性皮炎?

  特异性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)是具有遗传倾向的一种过敏反应性皮肤病,特异性皮炎的多数患者由婴儿湿疹反复发作迁延而成,70%的患者家族中有过敏、哮喘或过敏性鼻炎等遗传过敏史,因此也被称为异位性湿疹、特应性皮炎、遗传过敏性皮炎、泛发性神经性皮炎等。特异性皮炎是一种具有慢性、瘙

哪些是特异性免疫细胞?

  特异性免疫B细胞和T细胞和记忆细胞  在特异性免疫中处理抗原的抗原决定簇(这种处理指使抗原内部的抗原决定簇暴露)然后将抗原传递给T细胞.  另外在浆细胞(效应B细胞)分泌出来的抗体和抗原结合后,抗体的Fc段可以和吞噬细胞表面受体结合,从而将抗原吞噬消灭!  体液免疫:源头为B细胞,大多数病原体经

特异性免疫的获得方式

1.自然自动免疫。一个人得了某种传染病,痊愈后,便不会得第二次。这种免疫力是后天获得的,是因为自然感染了某种病原微生物,痊愈后,人体自动产生的;2.人工自动免疫。用人工的方法使人感染毒性极微的某种病原微生物,比如接种卡介苗,人们便自动获得了对某种疾病,如肺结核的抵抗力;3.自然被动免疫。婴儿由母亲身

前列腺特异性抗原

前列腺特异性抗原医学术语,前列腺特异性抗原(Prostatespecific antigen,PSA)是由前列腺上皮细胞合成分泌至精液中,是精浆的主要成分之一。在上个世纪60年代末,在研究免疫避孕过程中Hare等人发现,在前列腺液及精液中含有一种分子量大约34000的精液特异性蛋白质。1979年从前

序列特异性引物的概念

中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定  义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳

特异性免疫的免疫机理

机体经病原微生物抗原作用后,可产生特异性体液免疫和细胞免疫,抗体主要作用于细胞外生长的细菌,对胞内菌的感染要靠细胞免疫发挥作用。

特异性免疫的相关介绍

  特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫,是一种经由与特定病原体接触后,产生能识别并针对特定病原体启动的免疫反应。  特异性免疫主要存在于有颌下门的脊椎动物中,也在细菌以及古菌中发现,即 CRISPR/Cas 系统。脊椎动物的后天免疫系统可粗略分为体液免疫和细胞免疫。这种免疫只针对一种病原。是获得免

酶的特异性的特点

一、酶促反应具有极高的效率。二、酶促反应具有高度的特异性。

序列特异性引物的作用

序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳及放射自显影,胶片上的显带是标记同位素的引物所扩增的产物。

甲基化特异性PCR

亚硫酸氢钠法             实验方法原理 MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因 组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶

特异性变应原脱敏疗法介绍

特异性变应原脱敏疗法(花粉的减敏治疗):特异性变应原(如花粉)减敏疗法是对已查明但难以避免接触的变应原可采用小剂量,较长时间间隔,反复多次皮下注射相应变应原,使机体脱敏的治疗方法。其可能的机制为:⑴通过改变抗原进入途径,诱导机体产生大量IgG类抗体,降低IgE应答水平;⑵IgG与相应变应原结合,影响

什么是抗体的特异性

抗体是动物接种疫苗后产生的免疫球蛋白。通过一定方法制备的抗血清或高免卵黄抗体均是含有大量抗体的生物制剂。给动物注射抗体制剂后,对于传染病既有预防作用,也有治疗作用。由于动物接种疫苗后,一般需要3~5天,甚至7~10天才会有明显的保护作用,对于发病日龄较早的鸭病,最好在免疫母鸭的基础上,用抗血清或高免

甲基化特异性PCR

实验方法原理 MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因 组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变,然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳,凝胶扫描观察分析结果。实验材料 DNA

序列特异性引物的概念

中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定  义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳

提高PCR特异性的方法

 热启动PCR是除了好的引物设计之外,提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃,聚合酶在室温仍然有活性。因此,在进行PCR反应配制过程中,以及在热循环刚开始,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成,就会被有效扩增。在用于引物设计的

特异性免疫的基本特点

特异性1、具有特异性(或称专一性):机体的二次应答是针对再次进入机体的抗原,而不是针对其他初次进入机体的抗原;免疫记忆2、有免疫记忆:免疫系统对初次抗原刺激的信息可留下记忆,即淋巴细胞一部分成为效应细胞与入侵者作战并歼灭之,另一部分分化成为记忆细胞进入静止期,留待与再次与进入机体的相同抗原相遇时,会

双特异性抗体的应用

双特异性抗体的应用:1.在体外免疫检测中的应用2.在体内免疫治疗中的应用3.在体内肿瘤放射免疫显像诊断中的应用

血浆特异性酶的定义

主要是指在血浆中发挥作用的酶。有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能,这一类酶具有代表性的就是和凝血过程有关的一系列凝血因子及有关的纤溶因子。它们以酶原状态分泌入血,在一定的条件下被激活,引起相应的生理或病理变化。它们大多数在肝内合成,在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。有的可以作为肝功能试

什么是血浆特异性酶?

血浆特异性酶主要是指在血浆中发挥作用的酶。有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能,这一类酶具有代表性的就是和凝血过程有关的一系列凝血因子及有关的纤溶因子。它们以酶原状态分泌入血,在一定的条件下被激活,引起相应的生理或病理变化。它们大多数在肝内合成,在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。有的可以

特异性免疫的获得方式

主动免疫自然主动免疫:患病,隐性感染.人工主动免疫;接种菌苗,类毒素等.被动免疫自然被动免疫:通过胎盘,初乳.人工被动免疫;注射抗毒素,丙种球蛋白,细胞因子等.人工免疫是采用人工方法,将菌苗,类毒素等或含有某种特异性抗体,细胞免疫制剂等接种于人体,以增强机体的抗病能力.生物制品 用于人工免疫的免疫原

特异性免疫的形成过程

在抗原刺激下,机体的特异性免疫应答一般可分为感应、反应和效应3个阶段。分为三个阶段:1感应阶段是抗原处理、呈递和识别的阶段;2.反应阶段是B细胞、T细胞增殖分化,以及记忆细胞形成的阶段;3.效应阶段是效应T细胞、抗体和淋巴因子发挥免疫效应的阶段。如果某些病原体突破了第一道和第二道防线,即进入人体并生

抗原的特异性取决什么

抗原的免疫原性与特异性  一.异物性  二.抗原的特异性  抗原特异性决定抗原特异性的因素:抗原决定基抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,又称表位,是与TCR/BCR及抗体结合的基本单位。抗原决定基的结构:构象决定基与线性决定基T细胞识别线性决定基B细胞识别构象与线性决定基功能性决定基:存在于抗

PCR的特异性指什么

由于碱基互补配对原则导致的PCR在进行反应时所合成的DNA永远是特异性的(和起始DNA相同)

血清变应原特异性IgE诊断

  血清变应原特异性IgE可应用于婴儿,但不作为独立诊断FA 的依据。sIgE检测结果呈阳性时,还必须结合临床症状、回避试验等确定变应原种类。联合SPT和血清变应原sIgE检测,可提高FA阳性检出率。若SPT发现摄入牛奶、鸡蛋、花生、鱼类时,导致的风团直径分别>8mm(6mm),>7mm(5mm),

影响PCR特异性的因素

  ①退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。  ②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。  ③引物二聚体是最常见的副产品,降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发,尤其是引物的二聚化。  ④改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性,这可能是提高反应严格性或