变性高效液相色谱法筛选XRCC4基因突变
【摘要】 目的 应用变性高效液相色谱技术(DHPLC)惨煸此链分析对鼻咽癌患者XRCC4基因突变进行筛查与鉴定，研究鼻咽癌患者XRCC4的基因突变情况，探讨 DHPLC在筛查相关基因突变、预测放疗敏感性方面的应用。 方法 采用聚合酶链反应(PCR)和DHPLC筛查88例鼻咽癌患者XRCC4基因的突变。 结果 对DHPLC图形异常的PCR扩增片断进行DNA测序鉴定突变位点及性质，检测出28例XRCC4基因8号外显子第377位C变成T，导致126号密码子的ser→phe，导致氨基酸残基的替代变化(丝氨酸→苯丙氨酸)。 结论 用PCR睤HPLC筛查结合测序分析检测XRCC4突变是一种高效、经济、简便、可靠的方法。 【关键词】 鼻咽肿瘤 辐射耐受性 突变 肿瘤细胞 培养的 DNA修复 色谱法 高压液相 基因型 DNA分子是恶性肿瘤放疗辐射作用的靶点，细胞对电离辐射反应的分子基础是DNA损伤[1]。D......阅读全文
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载
高效液相色谱法的应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载
什么是高效液相色谱法？
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
高效液相色谱法的分类
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混
高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别
高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相（常以氨基、氰基键合相等作为固定相）.反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相（常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作
高效液相色谱法定性的参数
1.仪器工作条件环境温度:5-35℃相对湿度:20%-80%2.仪器外观仪器表面应光洁平整、字迹清晰,表面涂覆色泽均匀,不应有明显划伤、露底、裂纹、气泡等现象。各调节旋钮、按键、开关等工作正常,无松动;指示、显示清晰完整。
高效液相色谱法（HPLC）复核细则
一、对起草单位的要求：1．HPLC法用于药品的有关物质检查或含量测定时，需提供建立HPLC法的依据及参考文献。2．应对建立的方法进行论证，按照中国药典2000年版第二部凡例与附录收载的药品质量标准分析方法验证项下所列的要求进行试验。3．建立方法时，应考虑下列事项：①首选填料为十八烷基键合硅胶
高聚物用高效液相色谱法分析
高效液相色谱法仅需要将样品制成溶液而不需要气化，因此不受样品挥发性的限制原则上，高效液相色谱法可用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量高（大于400）的有机物的分离和分析（这些物质约占总有机物的75%-80%）。据统计，在已知化合物中，约有20%的气相色谱分析可用，约70%-80%的液相色谱分析可用。
高效液相色谱法的优缺点
高效液相色谱法的优缺点如下：一、优点：分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广。与气相色谱法相比具有的优点：不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广；流动相种类多，可通过流动相的优化达到高的分离效率；一般在啊室温下分析即可，不需高柱温。二、缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维
高效液相色谱法相关词汇峰高
峰高(peak height，h)—峰的最高点至峰底的距离。
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工
高效液相色谱法的技术特点
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。③高效：分离效能高。可选择固定
高效液相色谱法的优缺点
优点：分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广；与气相色谱法相比具有的优点：不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广；流动相种类多，可通过流动相的优化达到高的分离效率；一般在啊室温下分析即可，不需高柱温。缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。
高效液相色谱法的技术动态
液相色谱和质谱连接，可以增加额外的分析能力，能够准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液，血液，血浆，尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物。高效液相色谱质谱系统（ABSciex Eksigent LC / MS和LC / MS / MS）提供了一些独特的优势，包括：快速分析和流转所需的最少样品准备高灵敏
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工
高效液相色谱法相关词汇漂移
漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
高效液相色谱法的相关叙述
高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项高效、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定
高效液相色谱法入门知识（一）
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有
高效液相色谱法的组成结构
可分为“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与处理系统”等部分。
高效液相色谱法相关词汇基线
基线(base line)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
高效液相色谱法具有哪些优点？
1.高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。2.高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。3.高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到好的分离效果，
高效液相色谱法的工作原理
流动相通过高压泵进入系统，样品溶液通过注射器进入流动相，流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同，经过两相反复吸附-解吸分配后，各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件，然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时，样品浓度被转换成电信号并传送给记录
高效液相色谱法入门知识（二）
2．系统适用性试验色谱中最难分离物质对或与其相关的物质对的分离度和待测物响应值的重复性是系统适用性试验的重要参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品对色谱系统进行试验和调整，应符合要求；或规定色谱条件下的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。（1）色谱柱的理论板数（n）在规
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工