高效液相色谱法入门知识(二)
2.系统适用性试验色谱中最难分离物质对或与其相关的物质对的分离度和待测物响应值的重复性是系统适用性试验的重要参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验,即用规定的对照品对色谱系统进行试验和调整,应符合要求;或规定色谱条件下的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。(1)色谱柱的理论板数(n)在规定的色谱的条件下,注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液,记录色谱图,量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR(以分钟或长度计,下同,但应取相同单位)和半高峰宽(Wh/2),按n=5.54(tR/Wh/2)2计算色谱柱的理论板数,如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数,应改变色谱柱的某些条件(如柱长、载体性能、色谱柱充填的效果等),使理论板数符合要求。(2)分离度 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为:式中tR2为相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1为相邻两......阅读全文
高效液相色谱法入门知识(二)
2.系统适用性试验色谱中最难分离物质对或与其相关的物质对的分离度和待测物响应值的重复性是系统适用性试验的重要参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验,即用规定的对照品对色谱系统进行试验和调整,应符合要求;或规定色谱条件下的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。(1)色谱柱的理论板数(n)在规
高效液相色谱法入门知识(一)
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有
高效液相色谱法(二)
二、进样 器一般HPLC分析常用六通进样阀(以美国RHEODYNE公司的7725和7725I型最常见),其关键部件由圆形密封垫子(转子)和固定底座(定子) 组成。耐高压(35~40MPA),进样量准确,重复性好(0.5%),操作方便。六通阀进样方式有部分装液法和完全装液法两种。①用部分装
高效液相色谱知识(二)
正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8
高效液相色谱入门基础知识之高压输液泵
高压输液泵是液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪,流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。 高效液相色谱仪的结构高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统
药典中的高效液相色谱法(二)
(2)分离度 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为:式中tR2为相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1为相邻两峰中前一峰的保留时间;W1及W2为此相邻两峰的峰宽。除另有规定外,分离度应大于1.5。(3)重复性 取各品种项下的对照溶液,
高效液相色谱法(二)-枸橼酸离子
照高效液相色谱法(通则0512)测定。 色谱条件与系统适用性试验 采用十八烷基硅烷键合硅胶填充色谱柱,柱长250mm,柱直径4.6mm,粒度5μm。流动相为18.2mmol/L磷酸盐缓冲液,0.1%异丙醇溶液(pH 2.0~2.5);柱温40℃;流速为每分钟1.0ml;样品池温度为室温;运行时间5
购买化学试剂的入门知识
我国的化学试剂基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要有优级纯、分级纯和化学纯3种。 (1)优级纯(GR),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最-高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作
污水处理泵的入门知识
污水处理泵其实就是排污泵简称污水泵,常用的有自吸排污泵,潜水排污泵,无堵塞排污泵,液下排污泵,管道排污泵,化粪池排污泵和污水提升泵等。污水泵的叶轮、压水室、是污水泵的两个核心要素。所以污水处理泵的抗堵塞性能、效率和汽蚀性能,主要由叶泵和压水室两大部件来保证。一、排污泵的使用范围:1、企业单位废水排放
污水处理泵的入门知识
污水处理泵其实就是排污泵简称污水泵,常用的有自吸排污泵,潜水排污泵,无堵塞排污泵,液下排污泵,管道排污泵,化粪池排污泵和污水提升泵等。污水泵的叶轮、压水室、是污水泵的两个核心要素。所以污水处理泵的抗堵塞性能、效率和汽蚀性能,主要由叶泵和压水室两大部件来保证。一、排污泵的使用范围:1、企业单位废水排放
高效液相色谱法
首先保留时间与标准峰要完全一致,你可以通过加标的方式来确认,加标浓度大致与目标响应相当,若加的标准峰与目标物完全重叠,则可认为是单个组分,若出现肩峰,则表明有杂峰。如果是DAD检测器,可以通过光谱图来识别,一般的HPLC-DAD就自带峰纯度检测功能,绿区越大表明峰越纯。当然你自己也可以看,因为峰是短
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送。
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压
高效液相色谱法
高效液相色谱法概述HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模
高效液相色谱法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各
动态光散射技术入门(二)
DLS法的局限性DLS方法的大多数局限性可以或已经通过对实验操作过程进行改进,或对DLS技术进行改进来加以克服;但在区分仪器类型,尤其是对于那些要求异常苛刻的应用而言,它的局限性仍然值得我们加以关注。一般来说,DLS使用过程中遇到的大多数问题是出于以下原因: · 存在较大的颗粒超出仪器最高量程范围
手机RF设计入门(二)
11. 为什么GSM使用GMSK调制,而W-CDMA采用HPSK调制?答:主要是由于GSM和WCDMA标准所定。有兴趣的话,可以看一些有关数字调制的书,了解使用不同数字调制技术的利与弊。12. 如何解决LCD model对RF的干扰?答:PCB设计过程中,可以在单个层中进行LCD布线。13. 手机设
液相色谱(HPLC)入门(二)
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计
微量水分测定仪入门基础知识
工作原理反应所需要的碘通过外加含碘标准溶液补充。本仪器属于电量法,是基于将试样溶于含有一定碘的特殊溶剂的电解液后,水即消耗碘,所需的碘不再是用标准含碘试剂去进行滴定,而是通过电解过程,使溶液中的碘离子在阳极氧化为碘:2I———2e——→I2………………(2)所产生的碘又与样品中的水反应,终点用双铂电
扫描电子显微镜入门知识
1. 光学显微镜以可见光为介质,电子显微镜以电子束为介质,由于电子束波长远较可见光小,故电子显微镜分辨率远比光学显微镜高。光学显微镜放大倍率zui高只有约 1500倍,扫描式显微镜可放大到10000倍以上。 2. 根据de Broglie波动理论,电子的波长仅与加速电压有关: λe=h / m
高效液相色谱法(三)
三、色谱柱色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度 快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为 3,5,7,10U
高效液相色谱法依据
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。一、特点:1.
高效液相色谱法概述
高效液相色谱法(highperformanc,liquidchromatography,HPLC)是在经典液相色谱法基础上发展起来的一种新型分离、分析技术。经典液相色谱法由于使用粗颗粒的固定相,填充不均匀,依靠重力使流动相流动,因此分析速度慢,分离效率低。新型高效的固定相、高压输液泵、梯度洗脱技
手性高效液相色谱法
手性高效液相色谱法分为直接法和间接法。对映体(enantiomer):在空间上不能重叠,互为镜像关系的立体异构体。立体异构体指分子中的结构基团在空间三维排列不同的化合物。手性药物(chiral,drug):含有手性中心的药物。手性中心即为化合物中某个碳原子上连接4个互不相同的基团时,称该碳原子被称为
高效液相色谱法简介
以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱,经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。由于高效液相色
高效液相色谱法(一)
高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。 在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机 化合物和
高效液相色谱法分类
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1. 液固色谱法使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附——解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5
高效液相色谱法特点
高效液相色谱法有“四高一广”的特点: ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱医学教育|网,必须对载液加高压。 ②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。 ③高效
高效液相色谱法(四)
四、检测器HPLC的检测器分为两类:通用型检测器和专用型检测器。1.通用型检测器可连续测量 色谱柱的流出物的全部特性变化,通常采用差分测量法,这类检测器包括示差折光检测器、介电常数检测器、电导检测器等,通用检测器适用范围广,但由于对流动 相有响应,因此易受温度变化、流动相和组分的变化的影响,
手性高效液相色谱法
手性高效液相色谱法分为直接法和间接法。对映体(enantiomer):在空间上不能重叠,互为镜像关系的立体异构体。立体异构体指分子中的结构基团在空间三维排列不同的化合物。手性药物(chiral,drug):含有手性中心的药物。手性中心即为化合物中某个碳原子上连接4个互不相同的基团时,称该碳原子被称为