HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应，形成Si-O-Si-C键形的单分子膜而制得。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2，由于空间位阻效应（不可能将较大的有机官能团键合到全部硅醇基上）和其它因素的影响，使得大约有40~50%的硅醇基未反应。 残余的硅醇基对键合相的性能有很大影响，特别是对非极性键合相，它可以减小键合相表面的疏水性，对极性溶质（特别是碱性化合物）产生次级化学吸附，从而使保留机制复杂化（使溶质在两相间的平衡速度减慢，降低了键合相填料的稳定性。结果使碱性组分的峰形拖尾）。为尽量减少残余硅醇基，一般在键合反应后，要用三甲基氯硅......阅读全文
液相色谱（HPLC）入门（三）
高效液相色谱量级 [分析，制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据，用于定性和定量样品中的化合物。然而，高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物，在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中，科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如：在本例中，
HPLC基础知识教程（九）
5）、池体积：除制备色谱外，大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ；l。在使用细管径柱时，池体积应减少到1~2µ；l甚至更低，不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计，否则会严重影响柱效和灵敏度。 3．紫外检测器(ul
HPLC基础知识教程（五）
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Mi
HPLC日常维护有哪些步骤
高效液相色谱（HPLC）是色谱法的一种，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 高效液相色谱（HPLC）的日常维护有哪些呢？ 1.高效液相级色谱醇，
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
液相色谱（HPLC）入门（五）
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中，茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末； 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱，英文全称是HighPerformanceLiquidChromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、
液相色谱（HPLC）入门（二）
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中，黄色谱带完全通过了检测器流通池；产生的电信号被送到计
HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分
液相色谱（HPLC）入门（一）
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
hplc进样浓度多少合适
3ug/ml。HPLC高效液相色谱法，High Performance Liquid Chromatography缩写，进样浓度为3ug/ml，S/N为180，一针一针试，先配一个浓度进针再根据结果调整，6次进样，最小检测浓度不超过1×10-7g/ml萘/甲醇溶液， 高效液相色谱法(HPLC)是应用
hplc级是什么意思
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
HPLC的维护与使用注意
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势，在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。 主要部件介绍 输液系统 输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线
HPLC与GC有什么差别？
HPLC可通过高效液相色谱(HPLC)被称为(高效液相色谱)也称为高压液相色谱法。与气相色谱最重要的区别如下：高效液相色谱流动相为液体（液-液分配原理）。GC的流动相（载气）为气体（气-液分配原理）。但是，这两项工作所采用的分离原理基本相同，都是用色谱理论分析的，都可以使用多种检测器，常用于定量分析
HPLC仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成，具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 。1. 溶剂输送系统储液器：用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器
赛默飞在HPLC－2018推出最新HPLC色谱柱－－提供更高分辨率
分析测试百科网讯 第47届高效液相分离及相关技术国际研讨会于2018年7月29日-8月2日在华盛顿举行，为了支持高效液相色谱的创新和应用，赛默飞在会上展示其最新的HPLC色谱柱产品。 “我们的客户不断面临新的分析挑战，因为他们使用用HPLC来加深对分析样品，”赛默飞色谱和质谱分析的副总裁兼总经
依利特将参加HPLC－2011－Dalian
依利特分析仪器有限公司将参加2011年10月8日至11日在大连世界博览广场览馆举办的第37 届国际高效液相色谱及相关技术会议（含仪器展览会）(HPLC 2011 Dalian)。 期间我们将向您展出大流量工业制备型高效液相色谱仪、P1201高效液相色谱仪、LU23
HPLC系统的酸清洗和钝化
30％磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂／洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害特别是对日常使用低紫外波长的应用来说。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。 一般来说，对于阳离子的离子色谱分
HPLC系统的酸清洗和钝化
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害（特别是对日常使用低紫外波长的应用来说）。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。一般来说，对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方
HPLC高压输液泵日常保养
1. 使用高纯度试剂和HPLC级纯度的溶剂；流动相使用前必须经过过滤和脱气处理。 2. 实验开始前和实验结束后，用纯甲醇冲洗整个液体流路一定时间，可避免许多麻烦发生；不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中。 3. 平时应备有泵密封垫、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等配件和工具，定期更换垫圈，需要时圆
第33－届HPLC－会议参展通知
第33 届HPLC 会议参展通知 HPLC2008 Kyoto The 33rd International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques 时间：2008 年1
液相色谱仪（HPLC）的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意：1．HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC紫外灯的维护和更换
HPLC紫外灯的维护和更换 一、HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为： 1.缩短检测前的开灯时间 尽量在检测前1小时开紫外灯，具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相，对色谱柱也不好。 2.检测
液相色谱仪（HPLC）的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意：1．HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度
良好的HPLC色谱柱使用规范
1、在使用前过滤溶剂2、完全润湿在运输中变干的色谱柱3、了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响4、对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理5、清除柱填料的局限性：pH、温度、化学兼容性6、使用新鲜的水溶液，并考虑使用生物稳定剂（如叠氮化钠）7、定期用强极性的溶剂清洗色谱柱8、储存色谱柱时，应冲净缓冲
HPLC色谱柱的分类以及选择
现代液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中，现如今多采用细粒径以获得高分辨率。但是，细粒径填料的流体阻力往往很大，必须采用高压泵以将流动相强制输运通过柱子。所以，柱子必须能承受高压而不泄漏、不破坏才行。色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。常用的HPL